《微生物实验》课件PPT教案活性污泥或水稻土中甲烷形成活性的测定

微生物实验课件PPT教案活性污泥或水稻土中甲烷形成活性的测定 实验十七活性污泥或水稻土中甲烷形成活性的测定活性污泥或水稻土中甲烷形成活性的测定活性污泥或水稻土中甲烷形成活性的测定活性污泥或水稻土中甲烷形成活性的测定?实验目的?实验材料?实验程序?思考题实验目的?初步掌握应用气相色谱仪测定厌氧生境。 中样品的甲烷形成活性。 ?加深对沼气发酵微生物学原理的理解。 ?加深对温室气体甲烷产生的微生物学原理的理解。 甲烷产生的微生物学原理的理解。 实验材料?活性污泥?102G G型气相色谱仪（测定条件）1.采用热导检测器时，用22m长不锈钢柱一根，内装担，层，层400载N GDX104，层担体，层析室温度040C C，载气为N N22，N N22流速为为25mL/min，甲，甲烷出峰时间为19s s，记，记录仪上纸速为10X60mm/h，灵敏度和衰减可视样品中甲烷的含量而定。 进样量为，灵敏度和衰减可视样品中甲烷的含量而定。 进样量为0.5mL。 2.用氢火焰离子检测器时，用1m长不锈钢柱一根，内装GDX502担体，层析室温度4000C C，载，载气为N N22，N N22流速为流速为为20mL/min，氢，氢气流速为60mL/min，空，空气流速为700mL/min，记，记录仪记录仪上纸速为10X60mm/h，进样量为，进样量为0.5mL。 灵敏度和衰减可视样品中甲烷的含量而定。 实验材料?100mL带有异丁基胶塞的血清瓶若干。 ?11mL、10mL密封性能良好的注射器。 ?标准甲烷气体。 ?产甲烷菌培养基HCOONa4g CH33COONa4g CH33OH4mL NH44Cl0.8g MgCl20.08g K22HPO43.2g KH22PO443.2g酵母膏0.8g半胱氨酸0.4g刃天青（0.1%）0.8mL HH22/CO22（80/20体积比）水800mLpH7.07.2沼气发酵或土壤浸出液240mL实验材料?将上述培养基配制好，湿热灭菌后备用。 上，即上，即?上，即注上述培养基厌氧配制，即采用亨格特厌氧装置，在配制过程中均用无氧N N22置换容器中之空气的情况下进行，每只100mL血清瓶中装培养基30mL（参观示范）。 （参观示范）。 实验程序?活性污泥或水稻土产甲烷量的测定。 量的。 量量。 ?甲烷含的计算?添加不同量葡萄糖对产甲烷作用的影响。 添加不同量葡萄糖对产甲烷作用的影响。 实验程序（活性污泥或水稻土产甲烷量的测定）1g1g g3m每组称取15g g活性污泥或15g g g g水稻土放入装有30mL产甲烷菌培养基的血清瓶中，应注意在打开血清瓶上的异丁基胶塞时应立即充入无氧产甲烷菌培养基的血清瓶中，应注意在打开血清瓶上的异丁基胶塞时应立即充入无氧N N2，不使外界的空气进入血清瓶内，盖好胶塞，在，不使外界的空气进入血清瓶内，盖好胶塞，在3500C C下培养4415d，培养时间取决于样品中产甲烷菌数量和活性。 培养结束，用，培养时间取决于样品中产甲烷菌数量和活性。 培养结束，用1mL气密性好的注射器自血清瓶中抽取气密性好的注射器自血清瓶中抽取取0.5mL气样，用气相色谱仪测定甲烷含量。 实验程序（甲烷含量计算）?因甲烷峰高与气体中甲烷含量成正比，故可用外标法来测定样品中的甲烷量。 因甲烷峰高与气体中甲烷含量成正比，故可用外标法来测定样品中的甲烷量。 标准甲烷气体含量（%）X测样中甲烷气体峰高（mm）X10测样中甲烷含量（%）=标准甲烷气体峰高（mm）X10测样中甲烷含量（%）由甲烷含量的百分比，再根据血清瓶中气相体积计算由甲烷含量的百分比，再根据血清瓶中气相体积计算?moles数纯甲烷体积（数纯甲烷体积（L）=测样中甲烷含量（%）X气相体积（气相体积（L）甲烷形成量（?moles）=纯甲烷体积（L）22.4LX106产甲烷活性用形成甲烷的?mol/g干土/d实验程序（添加不同量葡萄糖对产甲烷作用的影响）?每组取两只100mL血清瓶，每只中装活性污泥（或水稻土）各血清瓶，每只中装活性污泥（或水稻土）各15gg，贴，贴上标签，B，记，刚，记，刚以以A A、B B，记，刚标记，记下加多少水，刚好淹没污泥（或土壤），其中A A瓶中加0.5%葡葡萄糖，葡萄糖，B B瓶中加10%葡萄糖，摇匀，用异丁基胶塞塞好，于葡萄糖，摇匀，用异丁基胶塞塞好，于2800C C培养一周。 取出瓶子，用培养一周。 取出瓶子，用pH试纸测定A A、B B瓶中的pH值，并测定甲烷形成量。 值，并测定甲烷形成量。 考题思考题?沼气