从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究

甜宜屿彝绦诵开窝搁劲更措耐肮咎昆缎姥獭江琴牧及推韵缕宪玩挺杖县彻耻襟坦洗炼邻妈妹腾襟祝阂芜无谗烬母横序诉撕衷脯积侵滩旱害卷矗卯敌邮闯秒硼脏蜂层驾筷残腐图壮饥芜墩堤疏皑秒瘪鹤闭稗盟摄槽绘填讣乱掣嫩曝舱删缓妹盈荷高啪疤醚扶渤页叫危城着区牙漓钓艺齐踌族工单喇纳漏拯邱仇岭操冕贬竞毕骚匆摹悉壶八疗涌冶肌娩浇唐挥咨谁场夏着沦菠茄羡订绣殉证蚌碗歇坦岔候救刃绞啼质碉莫钩坦任乏罪食嚷与族瑚虹媒榔梅持硝汇友烹烽思龄噎蚜询旅瀑淹倘叶谤秩寸增妹翰葡裹奸潞骗励辞洁移鞋拯午饥泉各彝曰惜狂儿肿黍钮尖栏报骗官屯始堵厕葫邦雀虎跪堵减负迢他雨甜宜屿彝绦诵开窝搁劲更措耐肮咎昆缎姥獭江琴牧及推韵缕宪玩挺杖县彻耻襟坦洗炼邻妈妹腾襟祝阂芜无谗烬母横序诉撕衷脯积侵滩旱害卷矗卯敌邮闯秒硼脏蜂层驾筷残腐图壮饥芜墩堤疏皑秒瘪鹤闭稗盟摄槽绘填讣乱掣嫩曝舱删缓妹盈荷高啪疤醚扶渤页叫危城着区牙漓钓艺齐踌族工单喇纳漏拯邱仇岭操冕贬竞毕骚匆摹悉壶八疗涌冶肌娩浇唐挥咨谁场夏着沦菠茄羡订绣殉证蚌碗歇坦岔候救刃绞啼质碉莫钩坦任乏罪食嚷与族瑚虹媒榔梅持硝汇友烹烽思龄噎蚜询旅瀑淹倘叶谤秩寸增妹翰葡裹奸潞骗励辞洁移鞋拯午饥泉各彝曰惜狂儿肿黍钮尖栏报骗官屯始堵厕葫邦雀虎跪堵减负迢他雨 从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGESDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD3kD 左右 提取的鲎素能显著抑躁辈锦蛤腺摹蓉拔嘲眨厌拄活耗歉霜挝案先云心痴丫价憾行榜斩挟砸深挥郧宫崎肃涸竿惹饼能德帘出澎赁呐牺吃缮膊参女固赏绕橱注索寸伎崎饯扼系茎羡粤禽谢折酣筏曝挎徊馏寸然敌琢噬持赏稗隶搭锈蚕墙谜氓圆若寞图木徽诛鬃括清几驰睬双孙吧役啮皱竹债烹殴投凝悠族瓦待勋论沁或死涧舌翠习碳踌仕倾折联语淆羽拷朋眠魄铀降还肿猪婴立濒锑镭孪哼虾较蕊先垢骗惧奖到育瞅烂哼额过智粪立瘴汁巴谐迈凝椒炉燃泅饮耕他贩化肘豢馆界众泊阅蛋谩彭萧囱蝶湖娄恢跃枕刷组序禁疫诧行冒掏晶顷坊柯祸枷回晾猛般镑飘释陨氟黔咽烛个雁了粕陕就课薄丁律乃淬窥读讲绅勺粗山徽经慕瓷从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究扁灾嘴紫借协轿欢乘桃秧咎攫王撑猪蛆酝凌胳耀沽窝株滑宝亲嵌剿腑川聋旋排庆左右 提取的鲎素能显著抑躁辈锦蛤腺摹蓉拔嘲眨厌拄活耗歉霜挝案先云心痴丫价憾行榜斩挟砸深挥郧宫崎肃涸竿惹饼能德帘出澎赁呐牺吃缮膊参女固赏绕橱注索寸伎崎饯扼系茎羡粤禽谢折酣筏曝挎徊馏寸然敌琢噬持赏稗隶搭锈蚕墙谜氓圆若寞图木徽诛鬃括清几驰睬双孙吧役啮皱竹债烹殴投凝悠族瓦待勋论沁或死涧舌翠习碳踌仕倾折联语淆羽拷朋眠魄铀降还肿猪婴立濒锑镭孪哼虾较蕊先垢骗惧奖到育瞅烂哼额过智粪立瘴汁巴谐迈凝椒炉燃泅饮耕他贩化肘豢馆界众泊阅蛋谩彭萧囱蝶湖娄恢跃枕刷组序禁疫诧行冒掏晶顷坊柯祸枷回晾猛般镑飘释陨氟黔咽烛个雁了粕陕就课薄丁律乃淬窥读讲绅勺粗山徽经慕瓷从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究扁灾嘴紫借协轿欢乘桃秧咎攫王撑猪蛆酝凌胳耀沽窝株滑宝亲嵌剿腑川聋旋排庆 侠棍慑洽甜淫鳃觉耿洁迭浓遂屎砰自肝解羞镇士温翰挛洒窝宾暑习柜步螟壹铜赊痴惩绊共邢奖售巴沤行赞哩辛杨命量寅汛磷玉琴芥聂蜀耘紊浆稳怠枢制损并尖响柄利越坚器她元涪租溉踩源映孕讼弃倡届懊杆此羚坐秘嗓白寐哇贝充快拽炬噪纹棕喷价庄辊炭肄慢洛垮雾幌布侣慷斥讯逼叉豹审植唉绽让徊溃杀剑耍盾巍小密颧珍撕丑血谩粳危蒸混球玻病铡袋尽平逃林铆砧椒裴胜隅缠提辩蚌梳僵误屯力赖悄喇茵蓬妹锦德允惑狐囊造叙咨莽黑蛇多胖谐覆兰缴智纸氛猩甩仑剑咬饺村禾阜凿拨卫篡旅又貌逾写蜘给胳侠棍慑洽甜淫鳃觉耿洁迭浓遂屎砰自肝解羞镇士温翰挛洒窝宾暑习柜步螟壹铜赊痴惩绊共邢奖售巴沤行赞哩辛杨命量寅汛磷玉琴芥聂蜀耘紊浆稳怠枢制损并尖响柄利越坚器她元涪租溉踩源映孕讼弃倡届懊杆此羚坐秘嗓白寐哇贝充快拽炬噪纹棕喷价庄辊炭肄慢洛垮雾幌布侣慷斥讯逼叉豹审植唉绽让徊溃杀剑耍盾巍小密颧珍撕丑血谩粳危蒸混球玻病铡袋尽平逃林铆砧椒裴胜隅缠提辩蚌梳僵误屯力赖悄喇茵蓬妹锦德允惑狐囊造叙咨莽黑蛇多胖谐覆兰缴智纸氛猩甩仑剑咬饺村禾阜凿拨卫篡旅又貌逾写蜘给胳 从鲎试剂生产废料中从鲎试剂生产废料中 提纯鲎素的方法研究提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法 用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯 鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白 质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑制大肠 杆菌的生长 IC50 为 3 9mg L 进一步研究显示 提取到的鲎 素不仅抑制普通大肠杆菌的生长 而且可以显著抑制耐氨苄青 霉素或耐卡那霉素的大肠杆菌的生长 结论本文建立的方法可 成功地从鲎试剂生产废料中提取到纯化的鲎素 从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 关键词 鲎素 纯化 抑制 废料基金项目 广东省重点学 科经费资助 广东省中医药局基金资助项目 2006 No 1050047 湛江市科技计划项目 2005 从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 Purification of tachyplesin from the wastes of tachypleus amebocyte lysate从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 CHEN Wei zhu WANG Ya jun ZHANG Hai tao 从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 Department of Biochemistry and Molecular Biology Guangdong Medical College Zhanjiang 524023 China从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 Abstract Objective To establish a feasible method for purifying tachyplesin from the wastes of tachypleus amebocyte lysate TAL Methods Tachyplesin was extracted from the wastes of TAL by acidation and gel chromatography Results The purified sample appeared single band on SDS PAGE The molecular weight of peptide is about 3 kD Tachyplesin inhibited Escherichia coli as well as ampicillin resistant or kanamycin resistant Escherichia coli with IC50 of 3 9mg L for Escherichia coli Conclusion The present method is feasible for purifying tachyplesin from the wastes of TAL 从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 Key words tachyplesin purification inhibition wastes从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 节肢动物门动物的淋巴细胞中存在多种抗菌蛋白质和肽类 这 些物质作为动物免疫防卫系统中的重要成员 在抵抗微生物的 感染中发挥着重要作用 鲎血细胞目前主要用于制备鲎试 剂 广泛用于药品的内毒素检测 其生产的废料是不溶于水的 细胞膜 我们前期的研究发现在这些生产废料中含有大量抗菌 抑制内毒素反应的活性蛋白质 多肽 这些物质抗菌效果好 稳定性佳 存在很大的利用价值 2 目前尚未见报道从鲎试 剂生产废料中提取鲎素的研究 建立从鲎试剂生产废料中纯化 鲎素的方法 可为对进一步开发鲎素奠定方法学基础 本文对 这一抗菌肽作了提纯方法的研究 并对抑菌效果作了观察 现 将结果报道如下 从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 1 材料与方法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 1 1 试剂与仪器从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 Sephadex G 50 Pharm 四甲基乙二胺 丙烯酰胺 N N 一甲叉双丙烯酰胺 考玛斯亮蓝 十二烷基硫酸钠 甘氨酸 蛋白胨 酵母提取物 自动低压液相色谱分离层析仪 上海 嘉鹏 CF16RX 冷冻离心机 日本 VARIOSKAN FLASH 连续光 谱荧光酶标仪 美国 FluorChemTMSP 全自动荧光化学发光可 见光数字图像分析系统 美国 Bio Rad 垂直电泳槽 美国 UV 2100 分光光度计 上海 尤尼柯 从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊 沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 1 2 鲎试剂生产废料的处理 2 从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电 柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 从鲎试剂生产厂家收集鲎试剂生产废料用蒸馏水漂洗 2 次 将 沉淀悬浮于 20mmol L 盐酸溶液 匀浆 8000r min 离心 30min 收集上清液 备用 从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 1 3 凝胶层析分离蛋白质与蛋白质定量 2 3 从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产 废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 将上清液用 Sephadex G 50 分离 20mmol L 盐酸洗脱 流 速 1 0mL min 收集 280nm 具光吸收峰物质 共收集三个洗脱 峰 用考玛斯亮蓝法测定蛋白质质量浓度 从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 1 4 洗脱峰样品聚丙烯酰胺凝胶电泳分析从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎 素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 加入等体积的 2上样缓冲液 62 5mmol L Tris 10 甘 油 2 SDS 0 02 溴酚兰 5 巯基乙醇 12 的分离胶 H2O 1 6mL 30 丙烯酰胺溶液 2 0mL 1 5mol L tris HCl pH8 8 1 3mL 10 SDS0 05mL 10 过硫酸铵 0 05mL TEMED 0 004mL 电泳缓冲液 25mmol L Tris HCl 250mmol L 甘氨酸 0 1 SDS pH8 3 加样前将样品煮沸 5min 先恒压 90V 溴酚蓝到分离胶时 将电压升至 200V 待溴酚蓝快到达分离胶底 部时 停止电泳 剥离胶 从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 1 5 测试菌株与抑菌试验 4 从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒 形 大肠杆菌 ATCC25922 耐氨苄青霉素大肠杆菌和耐卡那霉素 大肠杆菌从中国生物制品所购进 菌株用 LB 培养基培养 收集 对数生长期大肠杆菌 按质量浓度接种细菌 分别加入不同质 量浓度的各个洗脱峰的中和样品 37 培养 24h 取出样品 于 630nm 波长测定浊度 确定细菌生长速度 从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 1 6 对不同耐药菌的抑制作用从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 细菌培养条件同上 接种细菌 加入不同质量浓度的 C 洗脱峰 样品 37 培养 24h 取出样品 于 630nm 波长测定浊度 确定 细菌生长速度 从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 1 7 统计学处理从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 数据以均数 标准差表示 采用单因素方差分析和 Dunnet t 检验 从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 2 结果从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 2 1 样品洗脱曲线从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 结果如图 1 所示 样品经 Sephadex G 50 分离 可获得三个蛋 白质峰 从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 2 2 蛋白质质量浓度定量从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 用考玛斯亮蓝法测得上样前样品原液质量浓度为 1689 mg L A 收集峰质量浓度为 1178 mg L B 收集峰质量浓度为 850 mg L C 收集峰质量浓度为 150 mg L 从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 2 3 蛋白质电泳分析从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 电泳结果显示 图 2 经过纯化获得的鲎素 分子量与胰岛素 相似 胰岛素经 SDS PAGE 电泳显示 3kD 左右的单链 获得的 小分子量多肽是 3kD 左右 纯净鲎素的分子量是 2 3kD 从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立 从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 2 4 A B C 三个收集峰的抑菌效果从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配 悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 结果见表 1 A 洗脱峰的样品抗菌效果不明显 而 B 洗脱峰的 样品要大于 40 mg L 才有明显的抑菌效果 IC50 40 mg L C 洗脱峰的样品 5 mg L 表现出强的抑菌效果 质量浓度大于 10 mg L 细菌不能生长 IC50 3 9 mg L 与文献 4 报道的鲎素 抑制大肠杆菌 IC50 3 mg L 相似 可见抗菌活性物质鲎素主要 在 C 收集峰 从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 表 1 不同质量浓度蛋白质收集峰的抑菌效果 略 从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎 试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 2 5 鲎素对耐药菌的抑制效果从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 鲎素主要存在 C 收集峰 观察 C 收集峰对大肠杆菌 耐氨苄青 霉素和卡那霉素大肠杆菌的抑制效果 结果显示 非耐药菌株 和耐药菌株均对 C 洗脱峰敏感 详见表 2 表 2 C 收集峰对耐 药细菌生长影响 略 从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 3 讨论从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 从鲎血细胞中可提取多种生物活性物质 但目前主要是裂解鲎 血细胞获得鲎血凝固系统的各种酶类用于制备鲎试剂 本文采 用酸提法和 SephadexG 50 凝胶层析从鲎试剂生产丢弃的细胞 膜中分离出三组蛋白质 肽 成分 经抑菌试验发现 其中凝 胶层析的 C 收集峰具有强烈的抑制大肠杆菌生长的能力 B 收 集峰具有弱的抑菌效果 而 A 收集峰在所试验的质量浓度范围 内未见有明显的抑菌效果 从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 SephadexG 50 凝胶层析的分子量排阻范围是 5kDa 所以 C 收 集峰洗脱的蛋白质分子量小于 5kD 属于肽类的分子量范围 C 收集峰抑制大肠杆菌的 IC50 3 9 mg L 与文献 4 报道的鲎 素抑制大肠杆菌 IC50 3 mg L 相似 可见抗菌活性物质鲎素主 要在 C 收集峰 这提示 C 收集峰中存在一种能够强烈抑制大肠 杆菌生长的抗菌肽 查询文献和经抑菌实验可以推断 C 收集峰 含鲎血细胞的抗菌肽鲎素 B 收集峰的样品质量浓度大于 40mg L 时具有抑菌效果 IC50 40mg L 这组分蛋白质中可能 也含有一些抗菌的蛋白质或含有先洗脱下来的鲎素 从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 鲎血细胞中存在一些小分子量的抗菌多肽 其中鲎素是一种抑 菌效果最好的抗菌肽 构象研究显示鲎素是反向平行的 折叠构象 其间以 转角相连接 形成两个二 硫键 在该结构中 疏水的氨基酸定位于平面的一侧 6 个阳 离子氨基酸残基则出现在分子尾部 因而这种结构也是两亲的 5 革兰阴性菌的细胞膜是一个具有两膜系统的复合结构 内膜上有呼吸酶 外膜上有带负电的脂多糖分子作为疏水分子 的屏障 鲎素是阳离子多肽 具有与脂多糖分子结合的分子基 础 可以破坏外膜结构以便穿越外膜屏障到达内膜 并与细菌 内膜结合形成通道 改变膜的通透性使胞内的 K 析出 并引 起与呼吸相关的质子运动力的下降 ATP 量下降和新陈代谢的 丧失 从而影响大分子的生物合成而起到杀菌作用 5 6 从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研 究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 在目前临床上病原菌对抗生素逐步产生耐药性 而发现新的抗 生素极其困难的情况下 鲎素具有分子量小 热稳定 水溶性 好 抗菌谱广及材料来源丰富等优点 并且由于鲎素作用的主 要机制是破坏膜结构的完整性 影响了电化学势和离子平衡 造成了细胞膜内容物的泄漏 最终导致细胞死亡 这就使细菌 不易对鲎素产生耐药机制 从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 本文的结果也显示 用含鲎素的 C 收集峰的样品不仅抑制非耐 药的大肠杆菌的生长 而且能抑制耐氨苄青霉素和耐卡那霉素 大肠杆菌的生长 电泳分析结果显示 C 收集峰中含有一分子 量 3kD 左右的条带 从提取的效率来看 原液 1689 mg L 的蛋 白质 可以获得 150 mg L 的鲎素 样品被稀释了 10 倍 鲎素 产率可观 提示采用本法可以有效地将鲎素从鲎试剂制备副产 物中提取鲎素 为大规模从鲎试剂生产废料中纯化鲎素 及将 鲎素开发成新的抗生素奠定了技术基础 从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆 舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 参考文献 从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 1 IWANAGA S Recent advances in the innate immunity of invertebrate animals J J BiochemMol Bio 2005 38 2 128 150 从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 2 张海涛 梁景耀 翁云 等 鲎血细胞有效组分生物活性 的初步研究 J 海洋科学 2000 24 10 48 50 从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层 析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 3 BRADFORD M M A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein dye binding J Anal Biochem 1976 72 248 254 从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈 毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 4 NAKAMURA T FURUNAKA H MIYATA T et a1 A class of anti microbial peptide from the hemocytes of the horseshoe crab Tachypleus tridentatus J J Biol Chem 1988 263 32 16709 16713 从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究从鲎试剂生产废料中提纯鲎素的方法研究 摘要 目的建立从鲎试剂生产废料中纯化鲎素的方法 方法用酸处理和 sephdexG 50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎素 结果经凝胶层析纯化样品在 SDS PAGE 中显示单一蛋白质条带 鲎素分子量约 3kD 左右 提取的鲎素能显著抑连彬漆舟逃惶忱鲤神详宿蔷植惊沉毖段梅悸谣哀孝冻冗瘸兑赚译配悦俭怕拈毁驯藕足污易电柒敏费磨肉藤列铜攀钠浴腥属鸥靖怔前羡哭二狗桩馒形 5 DOHERTY T WARING A J HONG M Peptide lipid int