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文档简介
基因工程教材教法分析 基因工程 知识体系 基因工程 诞生 理论 技术 工具 限制性核酸内切酶 dna连接酶 载体 基本操作程序 获取目的基因 构建重组dna 导入受体细胞 检测和表达 应用 延伸和发展 蛋白质工程 基因工程 重点难点 基因工程教学重点 基因工程教学难点 基因工程的工具基因工程的基本原理和操作程序3 基因工程的应用 1 获取目的基因的方法及其原理2 目的基因的检测和表达 突破重点难点的策略 基因工程 教学建议 为什么能做 基础理论 原理 怎么做 方法 科学技术 做了什么 应用和成果 1 教学过程中要渗透和体现 整体观 基因工程的基本操作程序 总 分 总以技术为主线 通过转基因实例进行分析 主线 利用基因工程生产胰岛素的过程 1 引导学生对基因工程的基本操作程序先建立整体的框架 然后 依次分析各个步骤的常用方法 准确把握技术的难度与广度 最后 引导学生用概念图等形式概括基因工程的基本流程 2 分析受体细胞为大肠杆菌和酵母菌差异 3 蛋白质工程 获取目的基因 形成重组dna分子 重组dna导入受体细胞 目的基因的检测和表达 how 总结完善基因工程基本操作程序 2 精选图片 视频 科学史实等教学素材 限制性核酸内切酶等工具酶的发现基因工程的诞生过程 理论和技术 pcr技术的发明等 pcr 聚合酶链式反应 polymerasechainreaction 利用pcr技术获取和扩增目的基因 pcr技术的发明 dna分子 4种dntp dna解旋酶 解螺旋dna聚合酶 连接脱氧核苷酸dna连接酶 连接冈崎片段 rna 高温解旋 dna 耐高温taq酶 卡里 穆利斯 karymullis 1944年生于美国 发明了pcr技术 水生嗜热菌 thermusaquaticus 于1969年被发现于黄石公园 thomasdalebrock bornseptember10 1926 美国微生物学家 钱嘉韻从thermusaquaticus成功分离出嗜热dna聚合酶 taqdna聚合酶 最适温度为72 在95 仍具有酶活性 1985年成功纯化后 开始应用于pcr ondecember22 1989thejournalscienceawardedtaqpolymerase andpcr itsfirst moleculeoftheyear 1993年 穆利斯获诺贝尔化学奖 利用pcr技术获取并扩增目的基因过程 lacz基因控制半乳糖酶的合成 使培养基中的物质 x gal 水解成蓝色 使菌落呈现蓝色 抗体 抗原杂交 3 创设条件 精心设计实验或学生活动 重组dna 同一种和同两种酶切后的连接 dna粗提取和鉴定实验pcr和电泳技术 男性的sry基因 双酶切示意图 取鸡全血 破碎细胞 蓝色 析出dna粘稠物 析出dna丝状物 溶解 鉴定 破碎细胞 获得匀浆 sds 破坏细胞膜使蛋白质变性edta 保护dna1 5mol lnacl 溶解dna 冷酒精 破碎细胞 提取 提纯 鉴定 marker 酶切位点 引物设计 4 适当进行知识拓展 加深理解 5 atgagtaaaggagaa gatgaactatacaaa 3 3 tactcatttcctctt ctacttgatatgttt 5 5 atgagtaaaggagaa 3 3 ctacttgatatgttt 5 5 atgagtaaaggagaa gatgaactatacaaa 3 3 tactcatttcctctt ctacttgatatgttt 5 5 atgagtaaaggagaa 3 3 ctacttgatatgttt 5 5 gcgaattcatgagtaaaggagaa 3 3 ctacttgatatgtttttcgaagc 5 5 gcgaattcatgagtaaaggagaa gatgaactatacaaaaagcttcg 3 3 cgcttaagtactcatttcctctt ctacttgatatgtttttcgaagc 5 ecor1 hindiii 亲子鉴定 pcr技术的其它应用 检测某种疾病 检测目的基因是否导入受体细胞及导入位置 5 精编 精选典型例题 巩固基础知识 请回答基因工程方面的有关问题 1 关于基因工程的工具 构建重组dna分子所用的限制性内切酶作用于图1中的处 dna连接酶作用于图1中的 处 填序号 用限制酶ecorv mbol单独或联合切割同一种质粒 得到的dna片段长度如下图2 1kb即1000个碱基对 请在答题卡的指定位置画出质粒上ecorv mbol的切割位点 并标出酶切位点之间的距离 2 利用pcr技术扩增目的基因 pcr过程需要 酶 作用于图3 步骤 如果延伸时间设置较长 在第轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的dna片段 复制方式为 如图4所示 箭头代表子代dna的延伸方向 我们可以根据已知dna序列复制未知dna序列 tdna片段基因序列已知 设计4段tdna的引物a b c d 引物的作用是 如果利用pcr技术扩增tdna片段 我们可选择 作为引物 填字母 3 获得转基因植株 图5 在构建重组质粒时 应选用图中限制酶对进行
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