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文档简介
植物组培实验室建设目 录1、功能简述11)准备室12)灭菌室13)缓冲间14)无菌操作室15)培养室22、设备及耗材清单21)试验设备清单22)常备试剂清单5MS培养基必备试剂5常备激素及辅助试剂5植物组培实验室建设1、功能简述植物组织培养实验室一般应包括准备室、洗涤灭菌室、无菌操作室、培养室、缓冲间,这也是组织培养实验所必须具备的基本条件。要培养成大田苗还要有相应的驯化室、温室。1) 准备室用途:进行一切与实验有关的准备工作。完成所使用的各种药品的贮备、称量、溶解、器皿洗涤、晾置、培养基配制与分装、培养基和培养器皿的灭菌、培养材料的预处理等。设备:准备室应具备实验台、药品柜、水池、落水架、仪器、药品、防尘橱(放置培养容器)、冰箱、天平(0.1g、0.0001g分度各一台)、高压灭菌器、蒸馏水器(可省去)、酸度计(又称pH计)、过滤灭菌器、培养皿、培养瓶、三角瓶、试管、电磁炉、水浴锅、漏斗、量筒、刻度移液管(为操作简便起见可购买移液枪1ml、5ml各一个代替)、玻璃棒、酒精灯、镊子、试管架、琼脂、纱布、棉塞、封口膜、大量元素、微量元素、蔗糖、有机物和植物激素的母液(详细内容见附表)、NaOH、盐酸、滤纸、脱脂棉、橡皮筋、牛皮纸等。2) 灭菌室用途:完成各种器具的保存、培养基的灭菌等。设备:中央实验台、高压灭菌锅、超声波清洗器、干燥灭菌器(电烘箱)70%的酒精、2%的次氯酸钠等。3) 缓冲间用途:是进入无菌室前的一个缓冲场地,减少人体从外界带入的尘埃等污染物。工作人员在此换上工作服、拖鞋,戴上口罩,才能进入无菌室和培养室。进入无菌操作室前在此更衣换鞋,以减少进出时带入接种室杂菌。 设备:1-2盏紫外灯、水槽、试验台、鞋帽架、柜子、灭菌后的工作服、拖鞋、口罩等。4) 无菌操作室用途:也叫接种室,主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、试管苗的继代、原生质体的制备以及一切需要进行无菌操作的技术程序,是植物离体培养研究或生产中最关键的一步。设备:紫外灯、空调、解剖镜、消毒器、酒精灯、接种器械(接种镊子、剪刀、解剖刀、接种针),实验台和搁架,还有超净工作台和整套灭菌接种仪器、甲醛和高锰酸钾等杀菌药品。5) 培养室用途:对接种到培养瓶等器皿中的植物离体材料进行控制条件下的培养的场所。设备:安装日光灯照明的培养架(控温控光控湿)、摇床、自动控时器、紫外灯、光照培养箱或人工气候箱、生化培养箱、除湿机、显微镜、温湿度计、空调等。要求:约需10-20平方米左右,培养室的大小可根据需要培养架的大小、数目、及其他附属设备而定,其设计以充分利用空间和节省能源为原则。基本要求是能够控制光照和温度,并保持相对的无菌环境,因此,培养室应保持清洁和适度干燥;为满足植物培养材料生长对气体的需要,还应安装排风窗和换气扇等培养室的换气装置;为节省能源和空间,应配置适宜的培养架,并安装日光灯照明。表1、组培实验室仪器配置表功能单元面积(平米)配置仪器准备室(兼储藏室功能)50药品柜、冰箱(柜)、水槽、操作台、纯水制水器、酸度计、显微镜、天平、防尘柜、常用玻璃仪器灭菌室15高压灭菌器、烘箱、缓冲室5紫外灯、鞋架、挂钩、医用白大褂接种室15紫外灯、内置空调、超净工作台、消毒器、酒精灯、接种器械培养室502培养架(控光、温、湿)温室大于300平方米喷灌设施和可移动苗床(可忽略)2、设备及耗材清单1) 试验设备清单表2、器材数量及参考价格品名规格数量单价总价实验台2m4m1高压灭菌锅100L1超净工作台双人垂直流2空调落水架防尘橱1冰箱2天平0.01g、0.0001g2干热消毒柜1净水器酸度计过滤灭菌器电磁炉不锈钢锅1培养架控温摇床1自动控时器10紫外灯10光照培养箱或人工气候箱2生化培养箱2加湿器2喷壶5温湿度计2超声波清洗器1解剖镜1鞋帽架、柜子2工作服、拖鞋、口罩药品柜2恒温水浴锅1脱脂棉1漏斗培养瓶及瓶盖250ml1000三角瓶150ml50三角瓶250ml50三角瓶500ml10试管5ml50试管15ml50试管25ml50试管盖200试管塞、试管架移液吸管1 ml6移液吸管2 ml6移液吸管5 ml6移液吸管10 ml12温度计200度6试纸5.4-730玻璃棒9量筒2000 ml3量筒1000 ml3量筒500 ml3量筒100 ml6烧杯500 ml9烧杯250 ml6不锈钢药勺不同规格10容量瓶100 ml6容量瓶250 ml6容量瓶500 ml6容量瓶1000 ml12白口小瓶1000 ml21白口小瓶250 ml9洗耳球30勺子9漏斗9移液器1-100ul3移液器100-1000ul3移液器1000-5000ul3消毒器JZ-100-B立式6酒精灯12镊子20cm12手术剪18cm12手术刀柄4#12手术刀片23#12培养皿15 cm30滤纸中速滤纸11cm3瓶盖6cm带透气膜1000白大褂大中小5线手套50个橡胶手套9包2) 常备试剂清单 MS培养基必备试剂表3、MS培养基必备试剂大量元素微量元素铁盐有机物其他KNO3H3BO3FeSO47H2O肌醇蔗糖NH4NO3MnSO4 4H2ONa2EDTA 2H2O烟酸琼脂MgSO4 7H2OZnSO4 7H2O盐酸硫胺素KH2PO4Na2MoO4 2H2O盐酸吡哆醇CaCl2 2H2O
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