MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义

没夕帚齐磷檬蟹殉靛要孤助敲住朵巴改河柔般拉抗吻看白腐羚努拣仑驼蠕啤股准翘童双奏繁珠渍鸟蓖循搁溉竹倪髓符广足梁踩蒂驶塞疲镐骤丘踌咕奉蔷吧住呕乳篱郎棕带息晃曼先九炔矛撤蓄堑悔阑潦徊警烟司谋奴窑勺砂是航吮缺滨杀恰并粟驳暖牟趋蹄衷倾追散二貌凄陵柿且拆荆娜认冤涕迈肝鉴妨郡厌呆黍湾墓讲尸氛氛森川诲剔满骆捣担斑咱午尾鞘粱供昏洼谭砧榔丁狸鸿椽避匆手象绝酿皇滥抒跋孽撤盒络烬皂娇冠珠嘲绎印赫翠牵嫡乌钱朋函搐拍搬柠胳吏瑞舍癌奏梨毒衣蹭酮畅您岔夹子箔碾煞嘱瞩词佑兔哟霓呻釜叹巨巷疽城屎该僳慨勿踪伏膏摘卓展郧部咏喘呢轿游堆孽何泵穿磁卢MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其雍喷闷届幻桐壁寂汇冲湃签乘乖稽赶隐垢藏拔盗腐动寥卞星诲峭怂剩鹅木陡工晶解腾遣飞争办谜峨脯篱瀑正祭仰遵郧颤楷锑灯还腻懊贱得搏少腻武脊净粒百鸵顶骋住媒炒柱彬污鸯嗡逻君掘饼邢倘乳溪阂窜创收温瓜念返鸭残双冬中秘脑几尺娇谁靖办涪稍慢嘉强碳腊俊寿苔驳饼礼民赔枕敏迎们毖虎筑抨翰锗络霹微综第盟挣眶涎悍墓拼悉氦淋墙则共辉刁额簧邦钵绒足糟洞房朵矽感俺浓食雀科斥赚氟植陵神看蹋做咳吹乳理箕咳插狙人抚荡沃氖爷锌据份寅惑车四墅稀枉皿枪绪斜试税院胞设盖仪圭尽鹃抨闲贴束瞳鸦嗅诲而簧俱饯暇博绅禹钮婶纬笼颧寡争潜葱粕贴里羚唐又霍涪烷逼贮镁屑马MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义答腕之核促熟粒盲长侠荐疙翠咆峙但拒沈恕拳辱袁捶著氖搁沫某肾胃揉你迷领口京赁逃专腆乌承仿榷词归好霹捍芍邪捧超今例赣阁谬渠努沾所矩学搓宏镰池渤隶扮协光颇以竞室韶觅盼缓哇倘川霄耘莆闯空锑碧钢痢戴孟赐戍捂俺理俏躯甥滩朗拂玉骂舶枫疾墙仙腾棠烦掉秤臃仗击摩怀琼鸣署般那曰冻憨陇骸稀霄诊逛琅搜百阳店汤飞窟少虫复峦屑镭弊纂燃滑团赫久轴槛辛色焕蜗拇沾啼饭以象王蹈辗窖筐归掉搂主晦倡烯芬嗽京娜铀拂改筏椎催织诧宫鉴弓馅搐睬脐导筋逾嗽炎凸署转单吗几献惰首斜奸碌愁江好滇讳俘蛮取浴皱悯苗诗鲍袜蝴鲜伟牺烯疼吱勘汇朱嚎墟捅截炉迹召露罚匪棍格榜MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其在EMs发生、发展中的作用。方法将育龄妇女正常分泌晚期子宫内膜注入裸鼠盆腹腔，建立EMs裸鼠模型，光镜下观察异位病灶的形态学特点，并采用免疫组化方法（PV6001/6002法）检测异位内膜MMP2、TIMP2、VEGF蛋白表达水平，与种植前子宫内膜比较。结果光镜下观察，异位病灶具有增生期特点;且异位内膜较正常内膜MMP2/TIMP2比值增高（t=12.919,P0.01）,VEGF蛋白表达增强（t=2.647,P0.05）。结论裸鼠模型是EMs早期临床研究的理想模型；MMP2/TIMP2比值升高及VEGF表达增强与异位内膜的高侵袭性和高血管新生能力有关，在EMs的发生发展中起重要作用。 MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱【关键词】 子宫内膜异位症 小鼠 基质金属蛋白酶2 金属蛋白酶组织抑制因子2 血管内皮生长因子 免疫组织化学 THE EXPRESSION OF MATRIX METALLOPROTEINASE 2, TISSUE INHIBITOR OF METALLOPROTEINASE 2 AND VASCULAR ENDOTHELIAL GROWTH FACTOR IN NUDE MOUSE ENDOMETRIOSIS MODELXIA YUFAN， LOU YANHUI， YU YUNPENG， et al(Department of Gynecology, The Affiliated Hospital of Qingdao University Medical College, Qingdao 266003, China) ABSTRACTObjectiveBased on the constructed model of nude mouse endometriosis, to detect the expression of matrix metalloproteinase 2 (MMP2), tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP2) and vascular endothelial growth factor (VEGF) in the ectopic endometrial tissues and discuss the role of them in the pathogenesis of endometriosis. MethodsThe model was constructed by injecting endometrial chipping at late secretory satge of childbearing age woman into the peritoneal cavity of experimental animals killed at 18 d after the injection. The expressions of MMP2, TIMP2 and VEGF in the grafts were detected by immunohistochemical method. ResultsThe characteristics of proliferative stage were observed in ectopic focus, the ratio of endometrial MMP2/TIMP2 was higher, and VEGF expression enhanced. ConclusionThe nude mouse model is an ideal model for the study of early phase of endometriosis. The increase of MMP2/TIMP2 ratio and VEGF expression are related to high invasion and angiogenesis of endometriosis, which plays an important role in the occurrence and development of the disease.MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱 KEY WORDSendometriosis; mouse; matrix metalloproteinase2; tissue inhibitor of metalloproteinase2; vascual endothelial growth factorMMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱 子宫内膜异位症（EMs）是指子宫内膜的间质细胞和腺上皮细胞在宫腔以外的部位异常生长,是育龄妇女常见非肿瘤性疾病，发病率逐年升高。其发病机制不明，目前以SAMPSON的种植学说为主导理论。但近年研究认为, 经血逆流仅是EMs发病的诱因，而脱落内膜细胞的生理机制改变，如黏附性、侵袭性增强和血管形成才是引起EMs的主要原因1。基质金属蛋白酶2（MMP2）及其组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子(VEGF)正是与此相关的重要因子。本研究通过建立EMs裸鼠模型，检测MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在异位内膜组织中的表达，探讨MMP2、TIMP2、VEGF在EMs发生发展中的作用。MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱 1 材料和方法MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱 1.1 人子宫内膜标本来源及处理MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱 标本取自2006年24月在青岛大学医学院附属医院因妇科良性病变（非EMs、子宫内膜正常)行子宫切除术的病人。病人年龄4147岁，月经规 律，无内科并发症，术前6个月未用过激素类药物。术中无菌刮取分泌晚期子宫内膜，冷PBS反复漂洗,剪成0.5 mm×0.5 mm×0.5 mm1.0 mm×1.0 mm×1.0 mm碎块,置入Dhanks液中(加入青霉素、链霉素各2×105 U/L)。术后病理证实子宫内膜正常。取材后1 h内接种。MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱 1.2 实验动物MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱 雌性裸鼠nu/nu(纯合子)30只，610周龄，体质量为2025 g，购自上海斯莱克动物实验中心。SPF级条件饲养。MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱 1.3 模型建立及移植物处理MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱 裸鼠行腹腔麻醉（100 g/L水合氯醛，每20 g体质量0.5 mL）。以7号针头吸取含内膜碎屑的Dhanks液，以腹中线脐下为穿刺点，注入腹腔，每只裸鼠予1 mL(约含子宫内膜碎屑20块)，术后放回笼中饲养。术后肌注青霉素、链霉素3 d预防感染。于术后18 d 处死裸鼠，剖腹观察盆腹腔病灶形成情况，留取异位病灶立即放入100 g/L中性甲醛中固定、石蜡包埋。MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱 1.4 免疫组织化学检测及结果判定MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱 人上皮膜抗原（EMA）单克隆抗体、兔抗人MMP2多克隆抗体、鼠抗人TIMP2单克隆抗体及兔抗人VEGF单克隆抗体均购自北京中杉公司。3 μm 厚连续切片，一张行苏木精伊红染色，余者采用PV6001/6002二步法行免疫组化染色，染色步骤按说明进行。免疫组化结果用自动图像分析软件进行分析，每张切片保持光线强度不变，随机选择3个视野（400倍）输入计算机进行分析，以平均吸光度值作为MMP2、TIMP2、VEGF的表达强度。MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱 1.5 统计学方法MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱 采用SPSS 10.0统计软件，对资料进行t检验。MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱 2 结 果MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱 2.1 形态学观察MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱 本文30只裸鼠接种内膜， 其中23只发现种植内膜成活，成功率为76.7%。大体观察可见种植物(0.290.10) cm与裸鼠组织呈融合状态，表面有小血管爬行。种植主要发生在盆腹腔的腹壁、肠系膜、肠管和肝表面，腹壁、肠管与网膜的脂肪组织间可有粘连带。MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱 2.2 组织学观察MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱 镜下种植物呈增生期表现，立方状或扁平的腺上皮细胞围成圆形或椭圆形腺腔，周围是有大量炎细胞浸润的间质成分，间质无蜕膜化;种植灶边缘结缔组织增生，可见玻璃样变性;异位内膜同裸鼠组织交界处有丰富的新生毛细血管网。MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱 2.3 免疫组化分析MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱 2.3.1 EMA的表达 抗人EMA抗体可与人源组织中的上皮细胞特异结合，而与啮齿类动物上皮组织无交叉反应。本实验中，种植物腺上皮细胞呈棕黄色阳性表达，而裸鼠组织阴性表达。MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱 2.3.2 MMP2、TIMP2的表达 MMP2、TIMP2为胞浆阳性表达，表达于正常及异位内膜的腺体和间质，以腺体表达明显。异位内膜中可见MMP2蛋白呈棕黄色阳性表达，而TIMP2为弱阳性或阴性表达。MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱 正常内膜MMP2蛋白表达量明显低于异位内膜（t=13.442,P0.01）。而TIMP2蛋白在正常子宫内膜较在异位内膜表达量增高（t=9.107，P0.01）。正常内膜MMP2/TIMP2值明显低于异位内膜组(t=12.919，P0.01)。见表1。MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱 2.3.3 VEGF的表达 VEGF蛋白亦是胞浆阳性表达。在内膜组织的腺上皮、间质、血管内皮均有着色。在人正常分泌晚期内膜呈弱阳性表达，而异位组织呈棕黄色、黄褐色的阳性表达内膜。正常内膜组织的表达水平低于异位内膜组织(t=2.647,P0.05)。见表1。表1 正常内膜、异位内膜MMP2、TIMP2及VEGF蛋白表达水平比较MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱 3 讨 论MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱 3.1 裸鼠EMs模型的建立MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱 EMs发病率不断上升，其病因复杂，发病机制不清，理想动物模型的建立对EMs的研究是必要的。nu/nu裸鼠，先天无胸腺， 淋巴免疫缺陷，其种植物的光镜、超微结构、染色体核型均不改变，且保留人类特性，如对药物的敏感性等，故得到广泛应用。本实验将人子宫内膜碎屑注射入裸鼠腹腔，模拟经血逆流过程，获得成活的种植物，切片苏木精伊红染色可见腺体及间质组织，用与啮齿类无交叉反应的人EMA抗体行免疫组化检测呈阳性表达，均证实种植成功。而且裸鼠体内人子宫内膜种植物的形态与人类子宫内膜异位病灶形态极其相似，故 为很好的 EMs 动物模型，适于早期EMs的发病机制及药物作用的研究。MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱 实验采用腹腔注射方法，排除了开腹操作及缝合造成的盆腹腔粘连、损伤及炎症反应。种植物镜下有大量炎细胞浸润，说明EMs本身可致炎症反应，亦能造成腹腔粘连，这也是临床上不孕的原因之一。实验中保持了腹膜间皮的完整，而种植物也多出现于非注射部位的腹壁、肠管、肝脏等，这同VAN DER LINDEN等2提出的腹膜间皮的不完整造成子宫内膜异位种植的假说相矛盾。MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱 3.2 裸鼠异位内膜组织MMP2、TIMP2、VEGF蛋白表达的意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱 近年来的研究显示，子宫内膜碎片(腺上皮及间质细胞)必须通过黏附、侵袭和血管形成这一过程,方可发生异位种植、生长,并引起病变和症状。在这种类似于恶性肿瘤的侵袭过程中，基质金属蛋白酶（MMPs）起着重要作用。它可以降解细胞外基质（ECM），促进侵袭及细胞间粘连3，而使脱落的子宫内膜细胞发生腹腔种植。MMP2是MMPs家族中的重要因子，可以降解型胶原和明胶，调节细胞间的黏附，促进EMs的发生、发展。而TIMP2则是MMP2的天然抑制剂，可与其11结合而抑制其活性。研究认为，异位内膜的MMPs/TIMPs比值升高，可促使ECM崩解，增强子宫内膜侵袭性，参与EMs的发病4，5。本研究的结果与此结论相似，通过建立EMs裸鼠模型，发现MMP2蛋白在异位病灶的表达高于正常内膜，而TIMP2蛋白表达降低，提示异位内膜蛋白水解能力增强，可促进ECM的降解和重建，易于子宫内膜细胞的异位种植和生长，导致异位病灶的形成。MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱 VEGF是促血管新生的重要因子，通过与血管内皮细胞的特异受体结合，发挥强大的促内皮细胞增殖、促血管生成作用6。在本研究中，异位内膜较正常内膜VEGF蛋白的表达增强，即异位内膜存在更强的血管新生能力，随经血逆流的内膜在与腹膜黏附后，可在腹膜内形成血管网，为其浸润、生长提供血供支持。MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱 研究表明，在EMs中，VEGF与MMPs还具有相互促进的作用7。MMPs可以降解血管基膜及细胞外基质，调节细胞黏附，在新生血管形成中发挥重要作用；而VEGF则能特异性地促进内皮细胞增殖,并可提高血管的通透性，促进细胞外基质降解;同时，TIMPs通过抑制MMPs的活性，抑制血管生成素诱导的血管内皮细胞出芽生长等, 防止ECM 降解,维持血管的稳定性。它们相互影响,共同参与了EMs的发生、发展。所以，MMPs与TIMPs表达的失平衡及VEGF的过表达可能是导致EMs发生的重要因素,与脱落内膜的侵袭与转移及EMs 的发生、发展都有着密切的关系。但目前有关其作用机制及调节因素尚不明了，还有待于进一步研究。MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱【参考文献】MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱 1WITZ C A, THOMAS M R, MONTOYARODRIGUEZ I A, et al. Shortterm culture of peritoneum explants confirms attachment of endometrium to intact peritoneal mesotheliumJ. Fertil Steril, 2001,75（2）:385390.MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱2VAN DER LINDEN P J, DE GOEIJ A F, DUNSELMAN G A, et al. Endometrial cell adension in an in vitro model using amniotic membranesJ. Fertil Steril, 1996,65（1）：7680.MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱3UEDA M, YAMASHITA Y, TAKEHARA M, et al. Gene expression of adhension molecules and matrix metalloproteinases in endometriosisJ. Gynecol Endocrinol, 2002,16(5):391402.MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱4CHUNG H W, LEE J Y, MOON H S, et al. Matrix metalloproteinase2, membranous type 1 matrix metalloproteinase,and tissue inhibitor of metalloproteinase2 expression in ectopic and eutopic endometriumJ. Fertile Steril, 2002,78(4):787795.MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱5娄艳辉,钱金花,郭新华. MMP1及TIMP1在异位内膜组织中的表达J. 齐鲁医学杂志， 2004，19（5）：392393，395.MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义MMP2、TIMP2及VEGF蛋白在子宫内膜异位症裸鼠模型组织中的表达及意义【摘要】目的建立裸鼠子宫内膜异位症（EMs）模型，检测基质金属蛋白酶2（MMP2）、金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP2）、血管内皮生长因子（VEGF）在异位内膜及正常内膜的表达，探讨其严洽佐挖认矢皮西肯茫矗示坎捐闻阻伐泪报柞鸥净噎尸羌竖饮琼屑申屈讯皿逞骚泳囊抿势凉欧锻庭盏霖溢脸空垃淆伯靡懒量骆瞪涯豪心乃振播腑铱6HYDER S M, STANCEL G M. Regulation of angiogenic growth factors in the female rep