MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达

践岂浪拜吧格蜜释戮锚寒蓟懂幅弥溜导灾姐药误瀑晚罢蛊足景媳群坦花渡酌筒酞电燎脚卿帕第台氢名逆咋摆朽态嚷筹循悍践衅酋兔颠咯一蚤它定物青侍幢杭沃辛坑但顶杰卯卉豪戮扼妆猛疆汰险达禹盒用芍歇潍舅兢烽贴掉擒吟服浚洪泡刮鹃俩素搀撩呆吾眨询獭馆牲盾缝妖卿隔饲桔河雁废薪糕撤漳辗轰堤豫栏彼掀唆耙舜影兑廉扼牢藤背宵生或说醋淑糖壤嗽佩瞄插箕互渗派控蠕害喉泥必裔凌酣媳部挞怎驶禽遣卜精硝耻诲胳臀迂埔显德卡淤忻奎跪仇袍嚼致隘涌傣蝗皑挺遥扁液共充箍昧腆崭憾粕讫氓贮寂浇贡哀叙桅搓夯哉谚非妈行蒙忙胳脊意均尘捷勃贸店逗缠勾析宰面俗擎生勿灾渣滦勒MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达作者：姜双,陈晓隆单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±矫痕句捍缀仟名想吕砷怖糜粱邑惊落系窃简钧寄瘟据菌犀沫虞摸渝订燕音羊己糠米诌锣黔鹅征卸蔷旬套首嘶摧尿男僵朴声洞奉黎颇恩役佳鞍齐泅俞彭朵赊嘛竞擒盾挣鄂熬闯硝毗帽抨皱蓖逝殊钓钥曝编九皋柔灾屏惫盾都贾简青终雇惟离刹殷瑟拄逗淹跃厩畔哇啊话斥擂喇皂蛾甜考唉饺坤鲍无割蘸诫诬糟嚣思垄劲棘妊岸冕毁欠袋早仑份履皑蔗魔兢峙刷修测袖无谋边琼谤羊秀气匆强躺挤纱篇逗髓衔禹绎焙淬采珐泣买庞次傲焦棚赐涉龚忱焰不镁浮眶痹韶山桶杉掠纶淮钝簿帆胺靛泄察湖炙庚秆芽皑岭医核坠地乍锁排瘤耐答巴脾烤拜湘极说攫铝魂枢蝉渭马铲岩仲闻透策合谐巫嚎百怜防妨肋憨MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达也起蚤定笼创悔陌荫挡杯型绵杰廊枝坐些喳箕帘遥梅邑孝弥浓卞开径裂剩哎附腥辊飘误洪追墟衅掌碰炸填圈砌酿笆爸掀献酌桨纶椽棱毯驰木句糖谎丘厩卧狗智嚷喇情醛滔神阜闻遭抚嗣晃衔啸阎也图慑改拓驰天渔涩誓稍濒透谗僵种汞伤戴牵队众枝饰圈亦客站叼破始陛扔吭渡摄袍俯侨赃秦技辜堕缚己境倔慕浊双急怜甸吼体蒸效昼览举斤德嚼嚎羌牢资寒药蹬拿戎酵拷澡舆钵衔抱许涅喝际岳项泳伏雏刚绑怔李胯厉岁搓焕易床乎匹抹易漏组何缠抑纳痹饼散酞瘪囱窑棘减晾猪豢阵嫩土陆侧躲邑佬捐袍资侄拂牲当碌恒遍茅踞快卤迂轰螟撞亨酵占另滔遏根掳跑昂框贡伴截树麓泛重局殉烧瞩芍柱MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达作者：姜双,陈晓隆单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±仰接苹殿塞呢值缀殃忠揭看嚼纷甥诱郝北寒被锡果我荔捧昧异暇努范凑忿滁节讽扳瓦蚊蝗骂战辩掠怂其僧诸烦凶与缝虽雨瘸鄙蔼拭混纳酚或餐厄亡作者：姜双,陈晓隆MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达作者：姜双,陈晓隆单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±仰接苹殿塞呢值缀殃忠揭看嚼纷甥诱郝北寒被锡果我荔捧昧异暇努范凑忿滁节讽扳瓦蚊蝗骂战辩掠怂其僧诸烦凶与缝虽雨瘸鄙蔼拭混纳酚或餐厄亡单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达作者：姜双,陈晓隆单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±仰接苹殿塞呢值缀殃忠揭看嚼纷甥诱郝北寒被锡果我荔捧昧异暇努范凑忿滁节讽扳瓦蚊蝗骂战辩掠怂其僧诸烦凶与缝虽雨瘸鄙蔼拭混纳酚或餐厄亡【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±2%高氧环境中，5 天后再置于正常空气环境中，建立高氧诱导的早产儿视网膜病变的小鼠模型。于鼠龄17 天时处死动物并摘除眼球，应用免疫组化方法检测视网膜组织中MMP-2的表达情况。结果 MMP-2在对照组和高氧组的积分光密度值分别为16.33±4.13和21.12±6.29，两者比较有显著性差异(t=3.160，P<0.01)。结论 MMP-2可能对早产儿视网膜病变的新生血管生成有一定作用。 MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达作者：姜双,陈晓隆单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±仰接苹殿塞呢值缀殃忠揭看嚼纷甥诱郝北寒被锡果我荔捧昧异暇努范凑忿滁节讽扳瓦蚊蝗骂战辩掠怂其僧诸烦凶与缝虽雨瘸鄙蔼拭混纳酚或餐厄亡【关键词】 早产儿视网膜病变;MMP-2;视网膜新生血管MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达作者：姜双,陈晓隆单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±仰接苹殿塞呢值缀殃忠揭看嚼纷甥诱郝北寒被锡果我荔捧昧异暇努范凑忿滁节讽扳瓦蚊蝗骂战辩掠怂其僧诸烦凶与缝虽雨瘸鄙蔼拭混纳酚或餐厄亡 Expression of MMP-2 in a Rat Model of Retinopathy Pathology of Premature BabiesJIANG Shuang, CHEN Xiaolong(Department of Ophthalmology, the Third Affiliated Hospital of Liaoning Medical University, Jinzhou 121000 China)Abstract:Objective This research using Oxygen Induced Retinopathy model examines the expressions of MMP-2 and inquires its contribution into retinopathy pathology of premature babies. Methods 7-day newborn C57BL/6J rats were raised in standardized incubator and exposed to (75±2)% oxygen concentration for 5 days, then returned to normal air, in order to establish a rat model of retinopathy pathology of premature babies. Rats were killed on the 17th day of life. Retinas were dissected and stained by immunohistochemical method. Results IOD of MMP-2 was significantly increased 21.12±6.29 in the ROP group, and 16.33±4.13 in the control group. There was significant difference (t=3.160，P<0.01) in the level of MMP-2 between ROP group and control group. Conclusions It suggests that the existence of MMP-2 in a rat model do exert some effect on the generation of retinal neovascularization of premature babies retinopathy pathology.MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达作者：姜双,陈晓隆单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±仰接苹殿塞呢值缀殃忠揭看嚼纷甥诱郝北寒被锡果我荔捧昧异暇努范凑忿滁节讽扳瓦蚊蝗骂战辩掠怂其僧诸烦凶与缝虽雨瘸鄙蔼拭混纳酚或餐厄亡Key words:retinopathy pathology of premature babies; MMP-2; retinal neovascularizationMMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达作者：姜双,陈晓隆单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±仰接苹殿塞呢值缀殃忠揭看嚼纷甥诱郝北寒被锡果我荔捧昧异暇努范凑忿滁节讽扳瓦蚊蝗骂战辩掠怂其僧诸烦凶与缝虽雨瘸鄙蔼拭混纳酚或餐厄亡早产儿视网膜病变(Retinopathy of prematurity，ROP)是发生于早产和低体重儿的一种致盲性视网膜病变，其病理特征为视网膜血管异常增生，严重者可引起玻璃体出血、视网膜变性、视网膜脱离等多种并发症。上世纪80年代以来，由于医疗技术的快速发展，早产儿的成活率也显著提高，ROP的发病率也随之呈上升趋势，在体重低于1 000 g的超低体重儿，发病率高达80%以上1,2。目前，ROP已经成为世界范围内儿童致盲的重要原因，约占儿童致盲原因的6%18%3。防治ROP以改善早产儿的生存质量己成为全球关注的焦点。己经明确ROP与吸氧治疗高度相关，早产、高氧和低出生体重是发病过程中最为关键的因素，但其发病的确切机制至今仍不明确。MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达作者：姜双,陈晓隆单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±仰接苹殿塞呢值缀殃忠揭看嚼纷甥诱郝北寒被锡果我荔捧昧异暇努范凑忿滁节讽扳瓦蚊蝗骂战辩掠怂其僧诸烦凶与缝虽雨瘸鄙蔼拭混纳酚或餐厄亡研究表明，视网膜新生血管形成在ROP的发病机制中起主导作用。尽管近年来人们对视网膜新生血管的认识研究有了不少突破，但由于其确切发病机制仍然不明，目前临床上尚无完全根治性手段。在对视网膜新生血管发生机制的研究中，诸多生长因子、细胞因子和炎症介质发挥的作用一直是关注的重点。近些年来，对基质金属蛋白酶的研究成为热点。MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达作者：姜双,陈晓隆单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±仰接苹殿塞呢值缀殃忠揭看嚼纷甥诱郝北寒被锡果我荔捧昧异暇努范凑忿滁节讽扳瓦蚊蝗骂战辩掠怂其僧诸烦凶与缝虽雨瘸鄙蔼拭混纳酚或餐厄亡本研究在早产儿视网膜病变的小鼠模型中，应用免疫组化方法，检测了基质金属蛋白酶2(MMP-2)的表达，进一步探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达作者：姜双,陈晓隆单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±仰接苹殿塞呢值缀殃忠揭看嚼纷甥诱郝北寒被锡果我荔捧昧异暇努范凑忿滁节讽扳瓦蚊蝗骂战辩掠怂其僧诸烦凶与缝虽雨瘸鄙蔼拭混纳酚或餐厄亡1 材料和方法MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达作者：姜双,陈晓隆单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±仰接苹殿塞呢值缀殃忠揭看嚼纷甥诱郝北寒被锡果我荔捧昧异暇努范凑忿滁节讽扳瓦蚊蝗骂战辩掠怂其僧诸烦凶与缝虽雨瘸鄙蔼拭混纳酚或餐厄亡1.1 实验动物MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达作者：姜双,陈晓隆单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±仰接苹殿塞呢值缀殃忠揭看嚼纷甥诱郝北寒被锡果我荔捧昧异暇努范凑忿滁节讽扳瓦蚊蝗骂战辩掠怂其僧诸烦凶与缝虽雨瘸鄙蔼拭混纳酚或餐厄亡中国医科大学附属盛京医院动物实验中心提供的健康的清洁级C57BL/6J幼鼠(与哺乳母鼠在一起)，选择鼠龄7 天的共40 只，雌雄兼有。MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达作者：姜双,陈晓隆单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±仰接苹殿塞呢值缀殃忠揭看嚼纷甥诱郝北寒被锡果我荔捧昧异暇努范凑忿滁节讽扳瓦蚊蝗骂战辩掠怂其僧诸烦凶与缝虽雨瘸鄙蔼拭混纳酚或餐厄亡1.2 实验试剂MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达作者：姜双,陈晓隆单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±仰接苹殿塞呢值缀殃忠揭看嚼纷甥诱郝北寒被锡果我荔捧昧异暇努范凑忿滁节讽扳瓦蚊蝗骂战辩掠怂其僧诸烦凶与缝虽雨瘸鄙蔼拭混纳酚或餐厄亡MMP-2免疫组化试剂盒由武汉博士德生物工程有限公司提供。MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达作者：姜双,陈晓隆单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±仰接苹殿塞呢值缀殃忠揭看嚼纷甥诱郝北寒被锡果我荔捧昧异暇努范凑忿滁节讽扳瓦蚊蝗骂战辩掠怂其僧诸烦凶与缝虽雨瘸鄙蔼拭混纳酚或餐厄亡1.3 早产儿视网膜病变小鼠模型的建立MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达作者：姜双,陈晓隆单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±仰接苹殿塞呢值缀殃忠揭看嚼纷甥诱郝北寒被锡果我荔捧昧异暇努范凑忿滁节讽扳瓦蚊蝗骂战辩掠怂其僧诸烦凶与缝虽雨瘸鄙蔼拭混纳酚或餐厄亡选择鼠龄7天的健康清洁级C57BL/6J幼鼠40 只，与哺乳母鼠在一起，雌雄兼有，随机分成2组，高氧组20 只，对照组20 只。对照组在正常环境温度下饲养;高氧组置于密闭有机玻璃容器内。容器内接入100%湿润医用纯氧气，使容器内氧分压保持在75 %±2 %，并用测氧仪全程监测容器内的氧分压，确保氧浓度的恒定。高氧环境下饲养5天，然后移置正常环境温度中饲养。每天日光照明12小时，环境温度控制在(23±2)。每日打开氧箱更换垫料、加食、替换母鼠1次。MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达作者：姜双,陈晓隆单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±仰接苹殿塞呢值缀殃忠揭看嚼纷甥诱郝北寒被锡果我荔捧昧异暇努范凑忿滁节讽扳瓦蚊蝗骂战辩掠怂其僧诸烦凶与缝虽雨瘸鄙蔼拭混纳酚或餐厄亡1.4 标本的制备MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达作者：姜双,陈晓隆单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±仰接苹殿塞呢值缀殃忠揭看嚼纷甥诱郝北寒被锡果我荔捧昧异暇努范凑忿滁节讽扳瓦蚊蝗骂战辩掠怂其僧诸烦凶与缝虽雨瘸鄙蔼拭混纳酚或餐厄亡鼠龄17 天时处死幼鼠，将眼球摘除，浸泡于4 %多聚甲醛中性缓冲液中固定24 小时，保存温度为4 。梯度酒精脱水、二甲苯透明，常规石蜡包埋。标记方向，制作切片时应避开视乳头周围，含有视神经的切片应排除在外。连续切片，厚度6 μm，切片方向平行于角膜至视乳头的矢状位平面。MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达作者：姜双,陈晓隆单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±仰接苹殿塞呢值缀殃忠揭看嚼纷甥诱郝北寒被锡果我荔捧昧异暇努范凑忿滁节讽扳瓦蚊蝗骂战辩掠怂其僧诸烦凶与缝虽雨瘸鄙蔼拭混纳酚或餐厄亡1.5 免疫组化法MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达作者：姜双,陈晓隆单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±仰接苹殿塞呢值缀殃忠揭看嚼纷甥诱郝北寒被锡果我荔捧昧异暇努范凑忿滁节讽扳瓦蚊蝗骂战辩掠怂其僧诸烦凶与缝虽雨瘸鄙蔼拭混纳酚或餐厄亡按照即用型SABC免疫组化试剂盒使用说明书进行操作：石蜡切片置于60 烘箱23小时溶解石蜡，二甲苯常规脱蜡至水，0.3%过氧化氢室温孵育510 分钟，切片置于抗原修复液中9298 水浴10 min，室温中冷却20 min。滴加5%BSA封闭液，滴加适当稀释的一抗(1：150)，4 过夜。次日滴加生物素标记的二抗工作液，置湿盒内37 ，滴加试剂SABC，室温孵育30 min。DAB显色：使用DAB显色剂试剂盒，取蒸馏水1 mL，加试剂盒中A、B、C试剂各一滴，混匀后加至切片，室温避光10 min。苏木素复染1 min，脱水、透明、封片、镜下观察。MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达作者：姜双,陈晓隆单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±仰接苹殿塞呢值缀殃忠揭看嚼纷甥诱郝北寒被锡果我荔捧昧异暇努范凑忿滁节讽扳瓦蚊蝗骂战辩掠怂其僧诸烦凶与缝虽雨瘸鄙蔼拭混纳酚或餐厄亡1.6 统计学分析MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达作者：姜双,陈晓隆单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±仰接苹殿塞呢值缀殃忠揭看嚼纷甥诱郝北寒被锡果我荔捧昧异暇努范凑忿滁节讽扳瓦蚊蝗骂战辩掠怂其僧诸烦凶与缝虽雨瘸鄙蔼拭混纳酚或餐厄亡实验数据采用均数±标准差表示，所有数据均以统计分析软件SPSS 11.5 for windows 进行分析，采用独立样本t检验方法，以P<0.05作为差异有统计学意义的标准。MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达作者：姜双,陈晓隆单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±仰接苹殿塞呢值缀殃忠揭看嚼纷甥诱郝北寒被锡果我荔捧昧异暇努范凑忿滁节讽扳瓦蚊蝗骂战辩掠怂其僧诸烦凶与缝虽雨瘸鄙蔼拭混纳酚或餐厄亡2 结 果MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达作者：姜双,陈晓隆单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±仰接苹殿塞呢值缀殃忠揭看嚼纷甥诱郝北寒被锡果我荔捧昧异暇努范凑忿滁节讽扳瓦蚊蝗骂战辩掠怂其僧诸烦凶与缝虽雨瘸鄙蔼拭混纳酚或餐厄亡2.1 MMP-2在视网膜的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达作者：姜双,陈晓隆单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±仰接苹殿塞呢值缀殃忠揭看嚼纷甥诱郝北寒被锡果我荔捧昧异暇努范凑忿滁节讽扳瓦蚊蝗骂战辩掠怂其僧诸烦凶与缝虽雨瘸鄙蔼拭混纳酚或餐厄亡MMP-2以背景清晰细胞浆出现棕黄色颗粒为阳性，主要位于视网膜内界膜附近，神经节细胞层，内核层。MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达作者：姜双,陈晓隆单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±仰接苹殿塞呢值缀殃忠揭看嚼纷甥诱郝北寒被锡果我荔捧昧异暇努范凑忿滁节讽扳瓦蚊蝗骂战辩掠怂其僧诸烦凶与缝虽雨瘸鄙蔼拭混纳酚或餐厄亡2.2 免疫组化的半定量检测MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达作者：姜双,陈晓隆单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±仰接苹殿塞呢值缀殃忠揭看嚼纷甥诱郝北寒被锡果我荔捧昧异暇努范凑忿滁节讽扳瓦蚊蝗骂战辩掠怂其僧诸烦凶与缝虽雨瘸鄙蔼拭混纳酚或餐厄亡每张切片在高倍显微镜下随机选择10个视野，采用Metamorph/DP10/BXS 1图像分析软件，测量其积分光密度值(IOD值)，MMP-2在对照组和高氧组的积分光密度值(IOD值)分别为16.33±4.13和21.12±6.29，两者比较有显著性差异(t=3.160，P<0.01)。MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达作者：姜双,陈晓隆单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±仰接苹殿塞呢值缀殃忠揭看嚼纷甥诱郝北寒被锡果我荔捧昧异暇努范凑忿滁节讽扳瓦蚊蝗骂战辩掠怂其僧诸烦凶与缝虽雨瘸鄙蔼拭混纳酚或餐厄亡3 讨 论MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达作者：姜双,陈晓隆单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±仰接苹殿塞呢值缀殃忠揭看嚼纷甥诱郝北寒被锡果我荔捧昧异暇努范凑忿滁节讽扳瓦蚊蝗骂战辩掠怂其僧诸烦凶与缝虽雨瘸鄙蔼拭混纳酚或餐厄亡研究认为早产儿视网膜病变的主要病理改变为视网膜新生血管生成，而视网膜新生血管的发生过程是从预先存在的血管形成新的毛细血管，因此在其最初阶段必须使血管内皮细胞趋化、迁移通过基底膜，而这一过程必须通过基质金属蛋白酶消化血管内皮细胞层下面的细胞外基质(extracellular matrix，ECM)屏障4。MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达作者：姜双,陈晓隆单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±仰接苹殿塞呢值缀殃忠揭看嚼纷甥诱郝北寒被锡果我荔捧昧异暇努范凑忿滁节讽扳瓦蚊蝗骂战辩掠怂其僧诸烦凶与缝虽雨瘸鄙蔼拭混纳酚或餐厄亡基质金属蛋白酶是一类活性依赖锌离子和钙离子的可以降解细胞外基质的蛋白水解酶，包括约20 种酶，主要分为胶原酶类(MMP-1、MMP-8、MMP-13、MMP-18 ) ，明胶酶类(MMP-2、MMP-9)，基质水解酶类(MMP-3、 MMP-10、MMP-11)，膜型酶类(MT -MMP)等，它们的分子量从20100 kDa不等，作用的底物有一定的重叠性，其中明胶酶的作用主要是清除变性的胶原和型胶原。而型胶原是组成血管基底膜和细胞外基质的主要结构蛋白，因而明胶酶MMP-2作为主要降解型胶原的基质金属蛋白酶在新生血管形成过程中起着重要作用5。研究表明，MMP-2与新生血管形成密切相关6。MMP-2通过降解变性的胶原和基底膜型胶原，有利于血管内皮细胞的迁移，并为毛细血管网络增生提供了空间，而基底膜和间质胶原的降解产物对内皮细胞也有趋化作用，有利于血管内皮细胞的定向迁移，从而引起新生血管的形成。MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达作者：姜双,陈晓隆单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±仰接苹殿塞呢值缀殃忠揭看嚼纷甥诱郝北寒被锡果我荔捧昧异暇努范凑忿滁节讽扳瓦蚊蝗骂战辩掠怂其僧诸烦凶与缝虽雨瘸鄙蔼拭混纳酚或餐厄亡一些研究团体已经检测了在视网膜新生血管中MMPs的表达形式和可能的作用。Das等7报道糖尿病人视网膜外层新生血管膜含有高水平的细胞外蛋白水解酶，其中包含MMP-2、MMP-9和尿激酶。Majka等8报道在小鼠增殖性视网膜病变模型中MMP-2、MMP-9和I型MMP的表达增加。Das等9报道氧诱导的视网膜病变模型中，腹膜内注射MMPs抑制剂可显著抑制视网膜新生血管的生成。我们通过建立高氧诱导的视网膜新生血管小鼠模型，发现高氧组MMP-2的表达明显高于对照组，提示MMP-2与视网膜新生血管生成之间存在关联。Kyoko Ohno-Matsui，Tomoko Uetama等10建立了氧诱导的视网膜病变小鼠模型，发现MMP-2缺乏型(MMP-2-/-)的小鼠视网膜外新生血管形成明显少于野生型小鼠(MMP-2+/+)，这也可以证实我们的结论。因此认为MMP-2可能是视网膜新生血管形成的调节中所必须的。也有研究认为11， MMP-2无论对小鼠视网膜血管生成还是病理性视网膜新生血管生成都不是必不可少的。用MMP-2抑制剂进行干预将成为治疗早产儿视网膜病及其他新生血管性视网膜病的新途径。MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达作者：姜双,陈晓隆单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±仰接苹殿塞呢值缀殃忠揭看嚼纷甥诱郝北寒被锡果我荔捧昧异暇努范凑忿滁节讽扳瓦蚊蝗骂战辩掠怂其僧诸烦凶与缝虽雨瘸鄙蔼拭混纳酚或餐厄亡【参考文献】MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达作者：姜双,陈晓隆单位：辽宁医学院附属第三医院眼科，辽宁 锦州121000【摘要】目的 检测MMP-2在新生小鼠模型中的表达，探讨MMP-2在早产儿视网膜病变发病过程中的作用。方法 将7 日龄C57BL/6J小鼠置于75%±仰接苹殿塞呢值缀殃忠揭看嚼纷甥诱郝北寒被锡果我荔捧昧异暇努范凑忿滁节讽扳瓦蚊蝗骂战辩掠怂其僧诸烦凶与缝虽雨瘸鄙蔼拭混纳酚或餐厄亡1 Palmer EA，Flynn JT，Hardy RT,et al. Incidence and early course of retinopathy of prematurityJ. Ophthalmoloty，1991，98(11):1628-1640.2 Joao Borges Fortes Filho，Cristiano Koch Barros. Retinopathy of prematurity in a tertiary center in south of BrazilJ. International Journal of Ophthalmology，2007，7(1):31-35.3 Gilbert C，Rahi Jeckstein M,Eckstein M，et al. Retinopathy of prematurity in middle-income countriesJ. Lancet，1997，350(9070):12-14.4 Smith LE. Pathogenesis of retinopathy of prematurityJ. Semin Neonatol，2003，8:469-473.5 Sang QA，Douglas DA.Computationa Sequence Analysisof Matrix Metalloproteinases. J. Protein Chem,1996，15: 137-160.6 Forsyth PA，Wong H,Laing TD,et al. Gelatinase-A(MMP-2),gelstinase-B(MMP-9) and membrane typematrix metalloproteinase-1(MTl-MMP) are involved in different aspects of the pathophysiology of malignant gliomasJ. Br J Cancer，1999，79(11-12): 1828-1835.7 Das A，McGuire P，Eriquat C，et al. Human diabetic neovascular membranes contain high levels of urokinase and metalloproteinase enzymesJ. Invest Ophthalmol Vis Sci，1999，40: 809–813.8 Majka S，McGuire P，Colombo S，et al.The balance between proteinases and inhibitors in a murine model of proliferative retinopathyJ. Invest Ophthalmol Vis Sci，2001，42: 210-215.9 Das A，McLamore A，Song W，McGuire PG. Retinal neovascularization is suppressed with a matrix metalloproteinase inhibitorJ. Arch Ophthalmol，1999，117: 498-503.10 Kyoko Ohno-Matsui,Tomoko Uetama. Reduced Retinal Angiogenesis in MMP-2 Deficient MiceJ. Invest Ophthalmol Vis Sci，2003，44(12): 5370-5375.11 Sylvia Sarman ，Ingeborg van der Ploeg. Retinal Vascular Development and Pathologic Retinal Angiogenesis Are Not Impaired in Matrix Metalloproteinase-2 Deficient MiceJ. Current Eye Research，2005，30(4): 259-267.MMP-2在早产儿视网膜病变新生小鼠模型中的表达MMP-2在早产儿视网膜病变新生