园林植物组织培养复习资料.doc

组织培养一填空题1.植物组培室的空间构成？培养基制备室；无菌操作室；培养室；缓冲室2.培养基的灭菌方法有哪些类型？ 紫外线灭菌，高压蒸汽灭菌，熏蒸灭菌，过滤膜灭菌3.如何调节渗透压？通常利用蔗糖来调节渗透压。胚越小要求越高的渗透压；随着胚的发育啧要求逐步降低蔗糖浓度。曼陀罗心型胚期要求的蔗糖浓度为0.8%，鱼类型要求蔗糖浓度为1%0.5%。也有山梨醇或甘露醇，PEG调节4.植物生长调节剂如何配置，如何溶解？a若不溶于水，则应先把他们溶解在很少量的适当溶剂中，然后再加蒸馏水到最终容积（生长素一般溶于1mol/L的NaOH或95%酒精中，细胞分裂素一般溶于1mol/L的HCL中。GA3溶于95%酒精中，脱落酸溶于NaHCo3中。5.影响组培苗移栽成活的主要因素有哪些？试管苗的生长状况；移栽基质的选择；移栽的方法；移栽后的管理水平6.体细胞胚胎发生的方式有哪两种形式？a从培养中的器官，组织，细胞或原生质体直接分化成胚，中间不经愈伤组织b外植体先愈伤化，然后由愈伤组织细胞分化成胚7.体细胞杂种的鉴定方法有哪些？形态和育性鉴定；细胞学和分子细胞学鉴定；生化鉴定；分子生物学鉴定8.花粉培养的最佳取样时间是什么？花粉粒发育单核中晚期9.单细胞分离采用的植物材料 ，如何维持渗透压？叶肉细胞；机械法，酶解法；高浓度蔗糖 10.园艺植物脱毒效果检测方法？ 直观检测法；指示植物检测法；抗血清检测法；酶联免疫吸附法；电子显微镜检测法二名词解释1、植物组织培养：在无菌条件下，对植物组织，器官，细胞原生质体等离体活材料进行培养促使其生长发育，并再生成完整植株的过程。2、外植体：植物组织培养过程中从活体植株上切去下来的用于离体培养的一切材料。（如器官、组织、细胞、原生质体、种子等） 3、初代培养：从母体植株上分离下来的第一次培养继代培养：初代培养后，将培养体转移到新鲜培养基中的培养。 4、胚状体发育：由植物的器官，组织和细胞培养产生类似胚状体，然后发育成完整的植株。5、愈伤组织：在离体培养的条件下，经过植物细胞脱分化和不断增殖所形成的无特定结构的细胞团或组织。6、原球茎发育：将外植体（种子，腋芽，花梗等）消毒后接种在培养基上，经过培养产生原球茎，然后由原球茎发育成完整的植株。7、褐变：在组织培养过程中，外植体向培养基中释放褐色的物质（醌类）致使培养基逐渐变成褐色，培养材料也随之变成褐色而逐渐死亡的现象。8、玻璃化现象：在组织培养过程中，培养物叶片或嫩梢呈透明货半透明的水渍状现象。9、脱分化：一个成熟细胞转化为分生状态并形成为分化的愈伤组织的现象 10、再分化：指脱分化形成的愈伤组织细胞在十一的培养条件下，又分化为胚状体，或直接分化出根和芽等器官形成完整植株的过程。11、细胞的全能性：植物体的每一个生活细胞都具备母体的全套基因，在一定条件下可以发育成完整植株的能力。12、人工种子：指通过组织培养技术，将植物的体细胞诱导在形态上和生理上均与合子胚相似的体细胞胚，然后将它包埋于有一定营养成分和保护功能的介质中，组成便于播种的类似种子的单位。13、茎尖培养：是在无菌条件下剥取植物的茎尖分生组织进行培养以获得脱病毒的优质种苗。14、体细胞胚：由植物体细胞发育成的胚就叫做体细胞胚。15、体细胞杂交：指通过物理方法或化学方法使原生质体融合经培养获得具有双亲全部或部分遗传物质的后代的方法。16、种质资源的离体保存：指在离体条件下，将单细胞原生质体，愈伤组织，悬浮细胞，体细胞胚，试管苗等植物组织培养物置于抑制其生长的无菌条件下，达到长期保存的目的。三简答题1、简述胚状体形成植株与不定芽形成植株的区别胚状体不经过根的诱导阶段，小植株是独立形成的，很容易从其他部分分离。不定芽形成小植株，需要经过根的诱导阶段才能形成小植株，小植物与母体愈伤组织紧密联系，包括一些维管束组织皮层或表皮组织，因而不宜分离。2、在花药培养过程中，影响花药培养诱导频率的因素是什么？a.供试材料的基因型和生理状态；b.花粉粒的发育时期；c.花药的培养过程的控制（氮源，培养条件，接种力度和诱导力成正相关） 没有正确答案，从这些方面展开回答3、简述组织培养中常用植物生长调节剂的类型和作用特点？ 生长素和细胞分裂素生长素：a.诱导愈伤组织的产生，促使细胞脱分化；b.促进细胞的生长；c.促进茎尖或茎端生根；d.能诱导某些植物不定胚的形成；e.生长素和细胞分裂素配合使用共同促进不定芽的分化，侧芽的萌发和生长。细胞分裂素：a.促进细胞分裂素和扩大使得茎增粗，抑制茎的伸长；b.诱导芽的分化促进侧芽和生长；c.减少叶绿素的分解，抑制顶端优势，延续离体组织和器官的衰老，有保鲜作用；d.对根的生产一般起抑制作用；e.细胞分裂素素和生长素的比值控制器官的发育模式。4、简述植物愈伤组织继代的操作要点。愈伤组织保存，培养基的配比，保存的环境（温度，湿度等）扩繁：速度，时间，使用材料质量改良：防止培养基的玻璃化等，应多备份5、如何调节植物组织培养室的培养条件？组织培养室是组织培养材料的生产的地方A温度控制（正负26）B.培养室的大小，培养架的数量 C.地面墙面灭菌 D.拥有足够的电源 E.杜绝盆栽植物 无正确答案6、植物茎尖培养中影响脱毒效果的主要因素有哪些？a培养基：考虑培养基的主要性质，营养成分，生长调节物质和物理状态；b外植体的大小：外植体越大，产生再生植株的机会也就越多；c培养条件：照光培养的效果通常比暗培好；d外植体的状态：茎尖最好要用活跃生长的芽上切取。7、论述组织培养过程中MS培养基的特点及配制MS母液的基本步骤。MS母液配制：a.将大量元素贮备液，微量元素贮备液，铁盐贮备液，除蔗糖以外的有机物质贮备液内的各种成分称量出来； b.将称量出来的各种成分分别放入一个烧杯，加少量蒸馏水使之溶解，然后再一次混合，以蒸馏水定容；特点：是无机盐和离子浓度较高，为较稳定的平衡溶液。其养分的数量和比例较合适，可满足植物的营养和生理需要。它的硝酸盐含量较其他培养基为高，广泛地用于植物的器官、花药、细胞和原生质体培养，效果良好。8、举例论述组织培养中出现的玻璃化现象及克服方法。在组织培养过程中，培养物叶片或嫩梢呈透明货半透明的水渍状现象。克服措施：降低培养基中细胞分裂素和赤霉素的用量，适当添加多效挫，矮壮素等生长抑制物质；控制培养条件，适当增加培养基中琼脂的浓度，降低培养基是水势；减少培养基中含氮化合物的用量，选用低NH4+水平的B5培养基；控制继代培养的次数。9、植物离体快速繁殖器官形成的方式有哪些？a.芽分化型；b.愈伤组织分化形成器官；c.微型短枝扦插；d.原球茎快速繁殖；e.鳞茎发生方式；f.块茎发生方式；g.胚状体发生途径10、针对某一植物种间新品种杂交后代的选育要求，分析杂种幼胚的发育方式及幼胚组织培养成功的技术关键。发育方式：a.按正常胚胎发育途径形成植株 b.脱分化形成愈伤组织，再分化形成胚状体或幼苗 c.胚“早熟”不能继续进行胚性生长，而是迅速萌发成幼苗，此幼苗畸形瘦弱 d.胚性生长：幼胚生长到正常胚或超过正常胚大小时，仍不能发育成幼苗技术关键：a.需要成分复杂的人工合成的培养基 b.掌握幼胚分离技术11、举例论述茎尖分生组织培养脱病毒的原理？a.用茎尖分生组织培养脱毒的理论基础是病毒在植株体内的分布是不均匀的，越接近生长点病毒浓度越低，因此植物茎尖分生组织几乎不带病毒；b在剥离的茎尖中，病毒的复制过程被打乱了，植物分生组织的细胞生长速度快，病毒在植物体内繁殖速度相对较慢；c病毒的传播是靠筛选组织进行转移，或通过细胞间连丝传递给其他细胞，所以病毒的传递扩散也受一定的限制；d高浓度的生长物质抑制病毒也有助于去处病毒。12、如何将优良园艺植物品种进行保存和应用？就地保存、圈地保存、常温、低温、超低温保存13、如果某单位培育出了一个非常珍贵的观赏品种。想通过组织培养的方法繁殖种苗，你觉得应该通过哪几个阶段进行该品种的快速繁殖？举例论述每一个步骤的关键技术环节。程序a.外植体的制备 b.外植体生长及分化诱导 c.芽的继代增殖培养（顶芽和腋芽的发育/诱导不定芽的产生） d.壮苗与生根 e.试管苗的移栽及管理要注意培养基，培养条件和外植体的状态14、论述超低温保存离体植物材料的原理。也叫冷冻保存，是将植物的离体材料经一定的方法处理后，在超低温（-196液体氮）条件下进行种质保存的方法。原理：保存在液氮中的植物细胞代谢活动，生长基本停止，因而，排除了遗传性状的变异，同时保存了细胞活力和形态发生潜能，达到长期保存生物材料的目的。15、比较胚培养、胚乳培养和子房培养的异同。胚培养：在无菌条件下对植物的胚，胚乳，胚珠和子房进行离体培养，使其发育成完整的植株。胚乳培养：将胚乳从母体上分离出来，放在无菌人工环境条件下，让其进