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16例抗-HIV国产ELISA试剂检测假阳性报告中国输血杂志 2000年第3期第13卷 调查报告作者：杨志成丁玉江黄光伟刘昕陈玉琴单位：深圳卫武光明生物制品厂518107关键词： 抗-HIV，假阳性；ELISA，国产试剂中图分类号R392.33R318笔者在用国产ELISA间接法试剂对原料血浆进行抗-HIV复检时，曾检出16份“阳性”样品，再用进口ELISA双抗原直接法试剂复检为阴性，最后用蛋白印迹法试剂检测，证实为假阳性，现将结果报告如下。1材料和方法1.1样品经国产ELISA间接法试剂从4140人份原料血浆中复检出的16份(0.39%)抗-HIV“阳性”样品。1.2试剂国产ELISA间接法抗-HIV检测试剂分别由上海实业科华生物技术有限公司(批号981008)、厦门新创生物技术有限公司(批号8112601)、吉比爱生物技术(北京)有限公司(批号981120)、广东中山生物工程有限公司(批号981109)生产；进口ELISA双抗原直接法抗-HIV检测试剂由荷兰Organon Teknika公司生产(批号98092308)；蛋白印迹法(Western Blot)抗-HIV检测试剂由新加坡Genelabs公司生产(批号AE8065)。1.3操作严格按照说明书要求进行实验操作和结果判断，且每个样品均取双份样本进行测定。2结果2.1ELISA间接法抗-HIV试剂检测用4种国产ELISA间接法抗-HIV检测试剂对4140人份原料血浆进行复检，检出16份“阳性”样品，其OD值见表1。表1ELISA间接法抗-HIV试剂平行检测双份样品的OD值样品编号上海科华厦门新创北京吉比爱广东中山11.6321.4250.4930.5050.7660.8150.4390.45020.3240.3010.2160.2500.2590.30030.2180.2000.1320.1250.1850.18340.8240.7930.3760.3560.2600.27050.1820.2000.2030.2170.1980.2010.8660.85360.2000.1950.1920.2010.2100.21770.8200.6930.5470.55380.9960.9320.2060.1950.3260.35291.3231.3580.2980.2681.1371.143101.2691.4520.3120.3050.8580.867111.7201.8030.6210.5650.9320.953120.5470.6050.2690.2501.2771.198130.8820.866140.8270.873150.8380.891160.5940.605临界值0.1800.1800.1250.1250.1800.1800.2000.200注：“”表示阴性2.2ELISA双抗原直接法抗-HIV试剂检测用ELISA双抗原直接法抗-HIV试剂检测16份样品，根据OD值(表2)判断其均为阴性。表2ELISA双抗原直接法抗-HIV试剂平行检测双份样品的OD值样品编号Organon Teknika样品编号Organon Teknika10.1720.10690.1450.14520.1310.080100.1020.09530.1250.150110.1200.14040.1200.128120.1220.14250.1400.109130.0880.11160.1170.130140.1260.15170.1120.133150.1180.17680.1110.122160.1160.179PC10.9381.177PC21.1501.570NC10.1320.180NC20.1620.113NC30.1750.137临界值0.2560.243注：PC12为HIV-12阳性对照吸收度;NC为阴性对照吸光度2.3抗-HIV试剂蛋白印迹法测定用蛋白印迹法试剂检测16份样品，严格按说明书要求设置阴阳性对照和进行试验操作，每一样品均作双份平行测定，结果均无特异反应条带，判为阴性。3讨论抗-HIV检测有多种方法，如ELISA法、胶体金法、蛋白印迹法等。检测原料血浆应用最多的方法是ELISA法，该法具有检测批量标本操作简便、灵敏度高等特点，但特异性不能达到100%，约有1%左右的假阳性。影响其特异性的因素有很多，其中包括类风湿因子王彩凤，刘炜，刘力勇类风湿因子在ELISA法检测抗-HIV中的干扰，中国输血杂志，1998，11(3)：148，因此ELISA法只被作为筛检方法，而蛋白印迹法是当前HIV感染血清学试验中最敏感最特异的方法。笔者的检测结果表明，用ELISA间接法检测抗-HIV假阳性并不少见，应给予高度重视。分析本次抗-HIV检测假阳性现象，不仅可见不同方法在检测结果上的差异，还可见同类方法不同检测方式在检测结果上的差异。笔者认为同类方法不同检测方式之间在检测结果上差异的主要原因是两种检测方式所用方法学不同之故，直接法的特异性比间接法的高。此外，不同国家对诊断试剂生产企业的产品管制标准、程序、方法以及生产企业内部对产品的生产工艺及质量要求的不同，也是本次检测差异的重要原因。国产ELISA间接试剂抗-HIV检测的假阳性情况不仅在原料血浆复检中出现，在单采浆站及血站献血者筛选过程中也经常