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基于课标的深度研课省淳中生物第一轮复习教学案 编写：高新生 审核：张红明 武开芹生物“第一轮”复习教学案 第一章 无菌操作技术实践【课 题】 第一节微生物的培养和应用【课标要求】 进行微生物的培养；【考纲要求】 微生物的培养。 A【教学目标】1. 复习课本内容了解培养基概念、分类、特点；2. 复习教材内容整理培养基配制和接种技术；【教学过程】一培养基1、培养基概念： 。一般都含有 、 、 、 等最基本的生命物质。2.活动一：复习P8培养基分类,完成下表来源:学#科#网Z#X#X#K划分标准培养基种类优点缺缺缺点物理性质化学成分以化学用途例1不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不正确的是()。A氮源物质为该微生物提供必要的氮素 B碳源物质也是该微生物的能源物质C无机盐是该微生物不可缺少的营养物质 D水是该微生物的营养要素之一3、活动二：复习P9培养基消毒和灭菌的区别,完成下表条件结果常用的方法消毒灭菌例2下列对灭菌和消毒的理解不正确的是 ( )A灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子B消毒和灭菌实质上是完全相同的C接种环用灼烧法灭菌D常用灭菌方法有灼烧灭菌法、干热灭菌法、高压蒸汽灭菌法解析：消毒是使用较为温和的二细菌培养基的配制活动三：复习细菌培养基配制,完成以下内容1 是常用的细菌基础培养基。2细菌培养基的配制操作（1）配制培养液：在200ml烧杯中加入100ml蒸馏水，再加入0.5g 、 1g 、0.5g NaCl、1g 琼脂，边加水边 ，配制成培养基。（2） ：应调至 。（3） ：分装时约为试管高度的 。且不污染，用 塞紧试管口中。（4） ； 为一扎，外包一层牛皮纸或多层报纸，用线扎好，注明培养基名称、组别、日期等。（5） ： 是常用的灭菌方法。温度为 ，气压为 ，灭菌 分钟。（6）搁置斜面：一般待温度冷却到 ，将试管口枕在 cm的木条上，自然倾斜，斜面长度不超过试管总长的 。培养基配制后如何检测其是否没有被污染？ 例3下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，错误的是()。A操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯C待培养基冷却至50 左右时进行倒平板D待平板冷却凝固约510 min后将平板倒过来放置 例4用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是 ( ) A未接种的选择培养基 B未接种的牛肉膏蛋白胨培养基C接种了的牛肉膏蛋白胨培养基 D接种了的选择培养基三斜面接种和培养大肠杆菌保存菌种斜面接种大肠杆菌的主要目的有菌种转移、 、 等。其步骤是：1.点燃酒精灯后取两支有培养基的试管，一支有菌种，另一支为无菌斜面培养基，斜面朝上。2.接种环灭菌：将接种环的 和 放在酒精灯火焰上来回灼烧多次，彻底灭菌。3.开培养基试管口：握 手的小指、无名指和掌心拔去两试管塞，迅速将两试管口通过酒精灯火焰 次。4.挑取菌种：先将已灭菌的接种环环部接触 顶端或 进行冷却，拉回时轻轻挑取少量菌种，注意其带菌部位不要接触 或通过 。5.接种：将接种环伸入无菌培养基试管顶部，由底向上呈“S”型划线，注意接种时不要将培养基表面 。6.加塞，培养：试管口、塞同上在火焰上同样处理，塞紧，接种环需在火焰上来回多次灼烧（？）后放回原处。37恒温箱培养24h。7.菌种保存： 冰箱内保存， 月后需要再接种保存，其原因是 。四平板划线和培养大肠杆菌培养分离微生物1.牛肉膏蛋白胨固体培养基的平板制作 将配制好的牛肉膏蛋白胨固体培养基装入锥形瓶加棉花塞，包扎，高压灭菌，冷却到50左右，在酒精灯火焰旁开塞，转动瓶口在火焰上通过 次，用拇指与食指在火焰旁打开无菌培养皿一条稍大于锥形瓶口的缝隙，倒入培养基（1020mL），冷却，将平板 置，备用。2.平板分离与培养大肠杆菌 平板划线是指用带有 的接种环在平板培养基表面通过 划线而达到微生物的一种方法。请在下面空白处画出常见几种划线方式。例5下列有关平板划线操作正确的是()。A使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌B打开含菌种的试管需通过火焰上方灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞C把皿盖打开，将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可D最后将平板倒置，放入培养箱中培养【反馈练习】1 质粒是细菌中的一种特殊结构，它属于细菌的 A 、染色体 B 、核糖体 C 、细胞器 D 、环形 DNA 分子2下列生物中不属于原核生物的是A乳酸菌B酵母菌C大肠杆菌D放线菌3.研究认为，用固定化酶技术处理污染物是很有前途的。如将从大肠杆菌得到的磷酸三酯酶固定到尼龙膜上制成制剂，可用于降解残留在土壤中的有机磷农药，与用微生物降解相比，其作用不需要适宜的A温度 BPH值 C水分 D营养4通常用来作为菌种鉴定的重要依据是A菌落 B细菌形态 C细菌体积 D细菌结构5在噬菌体的增殖过程中，子代噬菌体的蛋白质外壳是A在细菌DNA的指导下，用细菌的物质合成的B在噬菌体DNA的指导下，用噬菌体的物质合成的C在细菌DNA的指导下，用噬菌体的物质合成的D在噬菌体DNA的指导下，用细菌的物质合成的6细菌、放线菌属于原核生物的主要依据是A单细胞 B无核膜 C二分裂生殖 D对抗生素敏感7细菌抗药性基因存在于A核区的DNA B RNA C质粒 D小的直线型DNA8乳酸菌与酵母菌相比，前者最显著的特点是A无各种细胞器 B无成形的细胞核 C无DNA D不能进行无氧呼吸9下列与微生物的代谢活动异常旺盛无关的原因是A表面积与体积比大 B相对表面积大C对物质的转化利用快 D数量多10、.外科手术器械和罐装食品的消毒，都要以能杀死（ ）为标准 A球菌 B杆菌 C螺旋菌 D芽孢11、下列哪项表明病毒属于生物 A具有细胞结构 B由有机物构成 C能独立完成新陈代射 D能在寄主体内繁殖12谷氨酸棒状杆菌异化作用方式是需氧型，它的有氧呼吸的酶主要存在于线粒体细胞质基质细胞膜内质网13细菌繁殖过程中不可能发生的是A有氧呼吸 B染色体复制 C细胞壁形成 D蛋白质合成14下列对 HIV 的描述错误的是 A 专性寄生 B 衣壳粒上具有抗原特异性 C 主要在人的T细胞中增殖 D攻击人体后会引起自身免疫反应15.斜面培养基形成的斜面的长度不超过试管总长的 A.1s B.23 C.14 D.1216为了保持菌种的纯净，需要进行菌种的保藏，下列有关叙述不正确的是()。A对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法B临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上C临时保藏的菌种容易被污染或产生变异D对于需要长期保存的菌种，可以采用低温4 保藏的方法生物“第一轮”复习教学案 第一章 无菌操作技术实践【课 题】 第二节分离特定的微生物并测定其数量【课标要求】 进行微生物的分离和培养；测定某种微生物的数量。【考纲要求】 微生物的分离。 A【教学目标】结合教学案活动整理常见几类微生物分类的依据与方法。【教学过程】一微生物分离的方法： 利用 培养基筛选和分离某种微生物，然后在高度 的条件下，在培养基上培养该微生物形成 。即为纯培养物，可以计数，分离特定的微生物并测定其数量需要掌握 和 。1.分离、培养微生物最常用的是 培养基;平板培养基制好后应 放置在恒温箱内，其目的是防止 。2.平板分离法活动一：复习课本内容试说明涂抹（布）平板法和混合平板法的操作（1）涂抹（布）平板法（2）混合平板法二微生物分离、培养与数量测定原理：根据不同微生物对 营养物质的需求或对 有不同敏感性。所以在分离微生物时可根据微生物对营养、生理、生长条件的差异进行分离，如加酚可得 ，加 可得抗抗生素菌种，用无机碳源或不加碳源可得 ，不加氮源可得 等。【例1】通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出（多选）A大肠杆菌 B霉菌 C放线菌 D固氮细菌【例2】下列可以作为自养微生物氮源的是 ( )A N2、尿素 B牛肉膏、蛋白胨C尿素、酵母粉 D铵盐、硝酸盐（一）壤中分解尿素的细菌的分离与计数1、分离的原理（1）土壤中的细菌之所以能够分解尿素，是因为它们体内能合成脲酶。这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起催化作用。（2）实验室中微生物的筛选应用的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。2、统计菌落数目的方法：稀释涂布平板法和显微镜直接计数。3、细菌分离与计数的实验流程土壤取样 细菌计数活动二：根据上述实验思考1.培养温度是 ，时间为 ，计算时选取菌落数为 的一组为样本；2.每次取样时都必须将土壤悬液摇匀，其目的是什么？3.取样涂抹平板时为什么只取稀释浓度较小的悬液进行实验，且每悬液做多个重复实验？4.若要将某菌落进一步纯化，如何操作？土壤取样样品稀释取样涂布微生物培养观察并记录结果细菌计数（二）分解纤维素的微生物的分离1、纤维素酶纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。纤维素最终被水解成葡萄糖，为微生物的生长提供营养。2、纤维素分解菌的筛选方法及原理（1）方法：培养基中只含 作为唯一碳源，或刚果红染色法。能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选。（2）原理：刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。纤维素被纤维素酶分解后，刚果红纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。这样，我们就可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。3、土壤中纤维素分解菌的筛选土壤取样选择培养（此步是否需要，应根据样品中目的菌株数量的多少来确定）梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上挑选产生透明圈的菌落活动三：关于土壤分解纤维素的微生物实验的思考1.该实验中分离得到的土壤分解纤维素的微生物是一种微生物吗？2.该方法得到的微生物在生产上有何应用？【例3】（2010全国1高考）下列是与微生物培养有关的问题，请回答：（1）某细菌固体培养基的组成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水，其中凝固剂是 ，碳源是 ，氮源是 。已知只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，故该培养基属于 培养基。按照化学成分分类，该培养基属于 培养基。从同化作用类型上看，用该培养基培养的细菌属于 。【变式题】如下所示为培养某种微生物的培养基的配方，请回答：成分含量NaNO3K2HPO4KClMgSO47H2OFeSO4(CH2O)H2O青霉素3 g1 g05 g05 g001 g30 g1 000 mL01万单位(1)依物理状态，该培养基属于_培养基；依用途划分，则属于_培养基。(2)根据培养基的配方可判断出，该培养基所培养微生物的同化作用的类型是_，培养的微生物可能是_。(3)该培养基中的碳源是_。不论何种培养基，在各成分都溶化后分装前，要进行的是_和_；倒平板时，一般需冷却至_左右，并且要在_附近操作。(4)若用该培养液培养纤维素分解菌，应除去的物质是_，至少应加入的物质是_，为检测纤维素分解菌的存在与否还应加入_，形成_色复合物，若产生_，则证明有纤维素分解菌存在。【例4】微生物的分离和培养是现代生物工程应用中的重要环节。下图甲、乙、丙是大肠杆菌分离和培养过程中部分操作和实验结果示意图，请据图回答有关问题：(1)上图甲所示的是制备固体培养基时的实验操作步骤之一，它称为 ，若用该培养基培养大肠杆菌，除考虑营养条件外，还要考虑 、 和渗透压等条件。(2)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是 。(3)上图乙是平板划线法接种操作示意图，正确的操作顺序是AB (用字母和箭头表示)；找出图乙中两处错误的操作(用字母表示) 、 。(4)上图丙是某同学用平板划线法接种后的培养基培养12h后的实验结果，如果培养基上 ，则说明无菌操作基本符合要求。【例6】某种细菌体内某氨基酸()的生物合成途径如图：这种细菌的野生型能在基本培养基（满足野生型细菌生长 的简单培养基）上生长，而由该种细菌野生型得到的两种突变型（甲、乙）都不能在基本培养基上生长；在基本培养基上若添加中间产物2，则甲、乙都能生长；若添加中间产物1，则乙能生长而甲不能生长。在基本培养基上添加少量的，甲能积累中间产物1, 而乙不能积累。请回答：（1）根据上述资料可推论：甲中酶 的功能丧失；乙中酶 的功能丧失，甲和乙中酶 的功能都正常。由野生型产生甲、乙这两种突变型的原因是野生型的 （同一、不同）菌体中的不同 发生了突变，从而导致不同酶的功能丧失。如果想在基本培养基上添加少量的来生产中间产物1，则应选用 （野生型、甲、乙）。（2）将甲、乙混合接种于基本培养基上能长出少量菌落，再将这些菌落单个挑出分别接种在基本培养基上都不能生长。上述混合培养时乙首先形成菌落，其原因是 。（3）在发酵过程中，菌体中含量过高时，其合成速率下降。若要保持其合成速率，可采取的措施是改变菌体细胞膜的 ，使排出菌体外。来源:学|科|网巩固练习 单项选择题1用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时 ( )可以用相同的培养基 都需要使用接种针进行接种 都需要在火焰旁进行接种 都可以用来计数活菌A B C D2下列有关微生物培养与应用的说法正确的是 ( )A天然培养基是指直接取自自然界不需加工的培养基B接种前需对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理C大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段D分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的氮源和碳源3.用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时 （ ）可以用相同的培养基都需要使用接种针进行接种都需要在火焰旁进行接种 都可以用来计数活菌ABCD4.在自然环境中常常是多种微生物混杂在一起，要对其中的某种微生物进行研究，就必需获得其纯培养物，以排除其他微生物的干扰。下列关于微生物纯培养的叙述中，不正确的是 （ ） A分离和纯培养微生物最常用的培养基是琼脂固体培养基B分离和纯培养微生物最常用的手段是平板分离微生物C涂布平板法和稀释平板法是平板分离法常用的两种方法D平板分离法可以采取连续划线的方法使微生物均匀分布5.（多选）在涂布平板操作时正确的是 （ ）A将涂布器在酒精灯火焰上灼烧，直到烧红 B取少量菌液滴加在培养基表面C将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，将酒精燃尽后，冷却810s再用D涂布时可转动培养皿，使涂布均匀6.在农田土壤的表层自生固氮菌较多。将用表层土制成的稀泥浆接种到特制的培养基上培养，可将自生固氮菌与其他细菌分开，对培养基的要求是 （ ）加抗生素 不加抗生素 加氮素 不加氮素 加葡萄糖 不加葡萄糖 37恒温箱中培养 2830温度下培养A B C D7.下列关于菌落的叙述中，不正确的是 （ ）A每个菌落由多种细菌组成，相当于生物群落B菌落菌落在一定液体培养基才能形成，相当于种群C菌落特征是鉴定细菌种类的重要依据 D球菌菌落比杆菌菌落大，边缘不整齐8.下列依次表示倒平板、接种的位置，以及划线法接种的路径示意图，其中错误的是：（D ）9.为验证某同学的培养基是否被污染，可设计两组实验，甲组用严格消毒的培养基并稀释涂布培养，乙组直接用该同学的培养基进行培养，此实验中乙组为 （ ）A、空白对照 B、自身对照 C、条件对照 D、标准对照10.下列说法不正确的是 ( )A科学家从7080热泉中分离得到耐高温的TaqDNA聚合酶B统计某一稀释度的5个平板的菌落数依次为M1、M2、M3、M4、M5，以M3作为该样品菌落数估计值C设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度D同其他生物环境相比，土壤中的微生物数量最大，种类