检验室作业指导书.doc

食 品 有 限 公 司 b4397d1d1930f48ffbf685c3aa0af17f.pdf页码/页数79 / 79文件编号GY/QC文件版本01目 录目录1/3第一节检验室职责411检验室职能4/412检验组长职责4/413检验员职责4/514检验工作要求5/6第二节基本操作技术要求711无菌操作要求7/712无菌室使用要求7/813消毒灭菌要求8/1014有毒有害污物处理要求10/1015培养基制备要求10/1116样品采集及处理要求11/1217玻璃器皿的清洗要求12/1218设备使用原则12/1319样品检验、记录和报告的要求13/13110革兰氏染色13/14111安全操作规程14/16第三节仪器设备操作规程1711酶标仪操作规程17/1712电热蒸馏水器操作规程17/1813超净工作台操作规程18/1914高压灭菌器操作规程19/2015水分快速测定仪操作规程20/2116分析天平操作规程21/2117双目显微镜操作规程22/2418隔水式电热恒温培养箱操作规程24/2419电热恒温鼓风干燥箱操作规程25/25110低速台式离心机使用操作规程25/26111PH计使用操作规程26/27112电冰箱使用操作规程27/28113电热恒温水槽使用操作规程28/29114玻璃器皿使用操作规程229/31第四节检验项目清单32/33第五节检验流程3411菌落总数、大肠菌群34/3412大肠杆菌335/3513金黄色葡萄球菌36/3614沙门氏菌37/3715副溶血性弧菌38/3816霍乱弧菌339/3917李斯特菌40/4018空气中微生物的检验41/4119生产用水及生产用冰的检验42/43110食品接触面的微生物检验44/45111挥发性盐基氮（半微量定氮法）46/47112亚硫酸盐测定(盐酸副玫瑰苯胺法)47/48113组胺48/49114呋喃唑酮代谢物（AOZ）（深圳绿诗园）49/51115呋喃妥因代谢物（AHD）（深圳绿诗园）51/53116呋喃它酮代谢物（AMOZ）（深圳绿诗园）53/55117呋喃西林代谢物（SEM）（深圳绿诗园）56/58118喹诺酮类药物（QNS）（深圳绿诗园）58/60119氯霉素（Chloramphenicol）（深圳绿诗园）60/62120孔雀石绿（Malachite green）（深圳绿诗园）62/64第六节产品标准6511单冻养殖鱼片产品标准65/6612整条冷冻养殖鱼产品标准66/6713冻养殖虾仁产品标准68/6914冻海虾仁产品标准69/70第七节检验仪器设备清单71第八节记录控制程序72/75第九节检验设备仪器内校作业规范76/77第一节 检验室职责1检验室职能11负责按照相应的程序，对原料辅料半成品成品及生产用水的卫生指标进行检验分析，定期对生产设备及工器具的清洁卫生状况进行抽验，并通过抽检原料半成品和成品的卫生指标，协助HACCP计划验证。12负责原料、辅料、包装材料及化学品的验收，对原辅料的接收成品的放行拥有质量否决权。13负责有关量规仪器、环境监测仪精度的校正管理，对全厂检验计量仪器设备的维护保养及定期校准。14协助对各部门进行质量审核并验证其整改效果15 负责对不合格品的控制及采取的纠正措施的验证。16负责数据分析管理工作，确保统计技术的有效性。2检验组长职责21牢固树立“质量第一”的思想，积极学习全面质量管理和检验工作业务知识，不断提高对产品质量的分析判断能力，并对产品质量负有监督责任。22要有强烈的责任心，坚持原则，实事求是，严格把好质量关，本人工作失误或失职造成的质量事故负责。23熟悉检验的技术文件和质量管理文件，熟悉掌握有关仪器、量具和检验方法，认真执行检验规程，严格执行质量检验制度及有关制度，认真做好原始记录。24督促生产人员严格执行工艺纪律和质量检验制度，认真进行工序质量管理点验证，对生产中发现问题及时向有关部门和人员反映。25负责检验室检验工作的全面开展，制订检验室检验项目及周期。26组织实施对原辅料、半成品、成品的监视和测量、分类、标识：对产品的监视和测量进行控制、管理检验印章。27监督检验室各项工作的执行情况，及时发现、纠正存在的问题，并向品质管理部主任汇报。28对检验室因缺少药品、用具等供应方面存在的问题和环境卫生负主要责任。29组织对检验人员进行培训和资格考核。3检验员职责31牢固树立“质量第一”的思想，积极学习全面质量管理和检验工作业务知识，不断提高对产品质量的分析判断能力，并对产品质量负有监督责任。32要有强烈的责任心，坚持原则，实事求是，严格把好质量关，本人工作失误或失职造成的质量事故负责。33熟悉检验的技术文件和质量管理文件，熟悉掌握有关仪器、量具和检验方法，认真执行检验规程，严格执行质量检验制度及有关制度，认真做好原始记录。34督促生产人员严格执行工艺纪律和质量检验制度，认真进行工序质量管理点验证，对生产中发现问题及时向有关部门和人员反映。35熟悉本实验室有关仪器设备的原理、性能，做好仪器设备的经常性保养、维护、检修及调试工作。爱护各种检测仪器，保证工作质量，保证检验的准确、及时。36负责对产品，半成品，原料，辅料的检验，包装材料及化学物品验收，确保不合格的产品不投入使用或生产加工。37定期对对生产所用的工器具、案面、工人所用的围裙、套袖、生产车间的空气、更衣室的空气、内包装物进行严格的检测，以免这些表面对产品造成污染。38每天对成品和半成品进行严格的检测，做好检验记录，认真填写检验结果报告，对检验工作中发现铁问题及时向有关领导或负责人汇报，以便指导生产。39科学客观，实事求是开展检验工作，真实反映检验结果。整理保存化验室的各种检测记录，保证其完整性、正确性及可追溯性。310负责检验、检测、实验设备的校准，维护和控制，严格控制、保证各项测试数据的正确、可靠、可信。311负责对产品，半成品，原料，辅料的质量指标进行检验分析，做灭菌效果检验记录，协助生产制订一套合理的消毒灭菌方案，确保生产卫生。312做好水质余氯、水质微生物的检测，以免不洁净的水污染食品。313贯彻国家、企业、行业标准，收集检验资料，完善检验工艺，与时具进,提高产品的技术检测水平。314接受上级部门的业务指导和培训，提高产品的技术检测水平。315整理保存化验室的各种检测记录，保证其完整性、正确性及可追溯性。4检验工作要求41检验员资格411食品专业，具备检验员资格证书或与食品相关专业，具备一定食品检验工作经验，可独立完成检验工作。412有健康证，无防碍检验工作的疾病，无防碍检验判定的生理缺陷。42检验标准421按国家标准或行业检验标准实施产品检验。422客户有检验标准要求的，按客户要求的标准进行产品检验工作。423检验员日常收集各检验标准，不断完善检验流程。43检验工作431按检验标准建立检验操作流程图，编写检验作业指导书，规范检验工作。432科学认真准备，开展检验，实事求是反映检验结果。433严格按检验标准的检验操作流程实施检验。434按规定保管，使用仪器设备，药品试剂，确保检验正常开展，预防安全事故发生。435微生物学检验遵循无菌操作，防止检验产品受污染或检验产品污染检验环境及检验人员。436严格实施无害化处理微生物检验物品，防止交叉污染。437保持检验室环境卫生清洁，设备仪器摆放整齐，防止环境因素造成检验结果出现偏差。438严禁在检验室做与检验工作无关的事。439认真做好水，电，气等检查安全工作，预防事故发生。45检验记录451按规定如实填写各种检验记录。检验记录的填写要按指定格式和栏目，用圆珠笔填写，字迹要清晰，不能随意涂改，不需填写的栏目一律用“/”填满，对记录内容真实性和准确性负责。需要修改的记录，应在原记录上画“”，保证原记录可以辩认，在原记录的右上角写上正确记录，并在记录的备注栏说明划改情况。452当天记录当天完成，及时交上级审核。453每月整理当月记录表，归档保存。 第二节 基本操作技术要求1.无菌操作要求微生物检验室工作人员，必须有严格的无菌观念，许多试验要求在无菌条件下进行，主要原因：一是防止试验操作中人为污染样品，二是保证工作人员安全，防止检出的致病菌由于操作不当造成个人污染。要求如下：121进行接种操作时，必须穿专用的工作服、帽及拖鞋，应放在无菌室缓冲间，工作前经紫外线消毒后使用。122接种操作时，应在进无菌室前用肥皂洗手，然后用75酒精棉球将手擦干净。123进行接种所用的吸管，平皿及培养基等必须经消毒灭菌，打开包装未使用完的器皿，不能放置后再使用，金属用具应高压灭菌或用95%酒精点燃烧灼三次后使用。124从包装中取出吸管时，吸管尖部不能触及外露部位，使用吸管接种于试管或平皿时，吸管尖不得触及试管或平皿边。125接种样品、转种细菌必须在酒精灯前操作，接种细菌或样品时，吸管从包装中取出后及打开试管塞都要通过火焰消毒。126接种环和针在接种细菌前应经火焰烧灼全部金属丝，必要时还要烧到环和针与杆的连接处，接种结核菌和烈性菌的接种环应在沸水中煮沸5min，再经火焰烧灼。127吸管吸取菌液或样品时，应用相应的橡皮头吸取，不得直接用口吸。2无菌室使用要求21无菌室为检验室完成无菌试验、卫生学检查之场所，非本室工作人员不得随意入内开展其他工作。22检验员严格执行无菌操作法要求，洗手、更衣、换鞋、戴口罩后方可入内。工作服、工作鞋不得穿到无菌室之外其他地方。23无菌室通向外面的窗户应为双层玻璃，并要密封，不得随意打开，并设有与无菌室大小相应的缓冲间及推拉门，另设有0.5-0.7m2的小窗，以备进入无菌室后传递物品。24无菌室必须按规定保持温度、湿度、菌落计数、尘埃粒子计数在合格范围内。每星期彻底清扫及熏蒸房间一次，使用前用紫外线杀菌30min，如采用室内悬吊紫外灯消毒时，需30W紫外灯，距离在1.0m处，使用紫外灯，应注意不得直接在紫外线下操作，以免引起皮肤损伤，灯管每隔两周需用酒精棉球轻轻擦拭，除去上面灰尘和油垢，以减少紫外线穿透的影响。并做好无菌室消毒，使用记录。25无菌室使用前后应将门关紧，处理和接种食品标本时，进入无菌室操作，不得随意出入，如需要传递物品，可通过小窗传递。24无菌室内应保持清洁，工作后用2%-3%煤酚皂溶液消毒，擦拭工作台面，不得存放与实验无关的物品。25在无菌室内如需要安装空调时，则应有过滤装置。26操作完毕，应彻底清洁洁净工作台、无菌室，并用紫外线照射30min。3消毒灭菌要求微生物检测用的玻璃器皿、金属用具及培养基、被污染和接种的培养物等，必须经灭菌后方能使用。31灭菌前准备311所有需要灭菌的物品首先应清洗晾干，玻璃器皿如吸管、平皿用纸包装严密，如用金属筒应将上面通气孔打开。312装培养基的三角瓶用硅胶塞塞紧，用纸包好，试管硅胶塞塞紧，注射器须将管芯抽出，用纱布包好。32装放放置灭菌物品分别包扎好，物品之间不能过挤，且不能接触箱的四壁。33设备检查331检查门的开关是否灵活，橡皮圈有无损坏，是否平整。332压力表蒸气排尽时是否停留在零位，关好门和盖，通蒸气或加热后，观察是否漏气，压力表与温度计所标示的状况是否吻合，管道有无堵塞。333对有自动电子程序控制装置的灭菌器，使用前应检查规定的程序，是否符合于进行灭菌处理的要求。34灭菌处理341干热灭菌法：此法适应于在干热情况下，不损坏、不变质、不蒸发的物品、较常用于玻璃器皿、金属制品、陶瓷制品等的灭菌。3411器械器皿应清洗后再干烤，以防附着在表面的污物炭化。3412灭菌时安放物品不能过挤，不要直接接触底和箱壁，物品之间留有空隙。3413灭菌时将箱门关紧，接上电源，先将排气孔打开约30min，排除灭菌器中的冷空气，温度升至160调节指示灯，维持1.5 2h。3414灭菌完毕后或温度升温过程中，须在60以下才能打开箱门。342手提式高压锅或立式压力蒸气灭菌器的使用应按下列步骤进行：a. 手提式高压锅在主体内加入3L清水，立式高压锅加水16L（重复使用时应将水量补足，水变混浊需更换）。b. 手提式压力锅将顶盖上的排气管插入消毒桶内壁的方管中（无软管或软管锈蚀破裂的灭菌器不得使用）。c. 盖好顶盖拧紧，勿使漏气；置灭菌器于火源上加热，立式压力锅通上电源，并打开顶盖上的排气阀放了冷气（水沸腾后排气10-15min）。d. 关闭排气阀，使蒸气压上升到规定要求，并维持规定时间（按灭菌物品性质与有关情况而定）。e. 达到规定时间后，对需干燥的物品，立即打开排气阀排出蒸气，待压力恢复到零时，自然冷却至60后开盖取物，如为液体物品，不要打开排气阀，而应立即将锅去除热源，待自然冷却，压力恢复至零，温度降到60以下再开盖取物，以防突然减压液体剧烈沸腾或容器爆破。343卧式压力锅蒸气灭菌器的使用按下列步骤进行：a. 关紧锅门，打开进气阀，将蒸气引入夹层进行预热，夹层内冷空气经阻气器自动排出。b. 夹层达到预定温度后，打开锅室进气阀，将蒸气引入锅室，锅室内冷空气经锅室阻气器自动排出。c. 待锅室达到规定的压力与温度时，调节进气阀，使保持恒定至规定时间。d. 自然或人工降温至60再开门取物，不得使用快速排出蒸气法，以防突然降压，液体剧烈沸腾或容器爆破。e.使用自动程序控制式压力蒸气灭菌器，在放好物品关紧门后，应根据物品类别按动相应开关，以便按要求程序自动进行灭菌，灭菌时必须利用附设仪表记录温度与时间以备查，操作要求应严格按照厂家说明书进行。35灭菌温度与时间351 干热灭菌器灭菌温度160，1.5-2h。352 压力蒸气灭菌锅灭菌温度与时间见表34-1。表34-1物品灭菌时间，min115121不含糖等耐热物质培养基含糖类等不耐热培养基染菌培养物器械器皿15-20303036灭菌处理:灭菌后物品,按正常情况已属无菌,从灭菌器中取出应仔细检查放置,以免再度污染.361 物品取出,随即检查包装的完整性,若有破坏或棉塞脱掉,不可作为无菌物品使用.362 取出的物品,如为包装有明显的水浸者,不可作为无菌物品使用.363 培养基或试剂等,应检查是否符合达到灭菌后的色泽或状态,未达到者应废弃.364启闭式容器,在取出时应将筛孔关闭.365取出的物品掉落在地或误放不洁这处,或沾有水液,均视为受到污染,不可作为无菌物品使用.366 取出的合格灭菌物品,应存放于贮藏室或防尘柜内,严禁与未灭菌物品混放.367凡属合格物品,应标有灭菌日期及有效期限.368每批灭菌处理完成后,记录灭菌品名、数量、温度、时间、操作者。4有毒有菌污物处理要求41微生物实验所用实验器材、培养物等未经消毒处理，一律不得带出检验室。42经培养的污染材料及废弃物应放在严密的容器或铁丝筐内，并隼中存放在指定地点，待统一进行高压灭菌。43 经微生物污染的培养物，必须经12130 min高压灭菌。44染菌后的吸管，使用后放入5煤酚皂溶液或石炭酸液中，最少浸泡24h（消毒液体不得低于浸泡的高度）再经12130 min高压灭菌。45 涂片染色冲洗片的液体，一般可直接冲入下水道，烈性菌的冲洗液必须冲在烧杯中，经高压灭菌后方可倒入下水道，染色的玻片放入5煤酚皂溶液中浸泡24 h后，煮沸洗涤。做凝隼试验用的玻片或平皿，必须高压灭菌后洗涤。46打碎的培养物，立即用5煤酚皂溶液或石炭酸液喷洒和浸泡被污染部位，浸泡半小时后再擦拭干净。47污染的工作服或进行烈性试验所穿的工作服、帽、口罩等，应放入专用消毒袋内，经高压灭菌后方能洗涤。5培养基制备要求培养基制备的质量将直接影响微生物生长。因为各种微生物对其营养要求不完全相同，培养目的的不同，各种培养基制备要求如下：51 根据培养基配方的成分按量称取，然后溶于蒸馏水中，在使用前对应用的试剂药品应进行质量检验。52 PH测定及调节：PH测定要在培养基冷至室温时进行，因在热或冷的情况下，其PH有一定差异，当测定好时，按计算量加入碱或酸混匀后，应再测试一次。培养基PH值一定要准确，否则会影响微生物的生长或影响结果的观察。但需注意因高压灭菌可影响一些培养基的PH降低或升高，故不宜灭菌压力过高或次数太多，以免影响培养基的质量，指示剂、去氧胆酸钠、琼脂等一般在调完PH后再加入。53培养基需保持澄清，便于观察细菌的生长情况，培养基加热煮沸后，可用脱脂棉花或绒布过滤，以除去沉淀物，必要时可用鸡蛋白澄清处理，所用琼脂条要预先洗净凉干后使用，避免因琼脂含杂质而影响透明度。54盛装培养基不宜用铁、铜等容器，使用洗净的中性硬质玻璃容器为好。55培养基的灭菌既要达到完全灭菌目的，又要注意不因加热而降低其营养价值，一般12115min即可，如为含有不耐高热物质的培养基如糖类、血清、明胶等，则应采用低温灭菌或间歇法灭菌，一些不能加热的试剂如亚碲酸钾、卵黄、TTC、抗菌素等，待基础琼脂高压灭菌后凉至50左右再加入。56每批培养基制备好后，应做无菌生长试验及所检菌株生长试验。如果是生化培养基，使用标准菌株接种培养，观察生化反应结果，应呈正常反应，培养基不应贮存过久，必要时可置4冰箱存放。57 目前各种干燥培养基较多，每批需用标准菌株进行生长试验或生化反应观察，各种培养基用相应菌株生长试验良好后方可应用，新购进的或存放过久的干燥培养基，在配制时也应测PH，使用时需根据产品说明书用量和方法进行。58每批制备的培养基所用化学试剂、灭菌情况及菌株生长试验结果、制作人员等应做好记录，以备查询。6样品采集及处理要求61 所采集的检验样品一定要具有代表性，采样时应首先对该批原料、加工、运输、贮藏方法条件、周围环境卫生状况等进行详细调查，检查是否有污染源存在。62 根据样品的种类及数量，采样数量及方法应按标准检验方法的要求进行。63 采样应注意无菌操作，容器必须灭菌，避免环境中微生物污染，容器不得使用煤酚皂溶液，用新洁尔灭、酒精等消毒药物灭菌，更不能含有此类消毒药物或抗生素类药物，以避免杀死样品中的微生物，所用剪、刀、匙用具也需灭菌方可应用。64 样品采集后应立即送往检验室进行检验，送检过程中一般不超过3h，如路程较远，可保存在15环境中，如需冷冻者，则在冻存状态下送检。65 检验室收到样品后，进行登记（样品名称、送检单位、数量、日期、编号等），观察样品的外观，如果发现有下列情况之一者，可拒绝检验。651 样品经过特殊高压、煮沸或其他方法杀菌者，失去代表原品检验意义者。652 瓶、袋装食品已启开者，熟肉及其制品、熟禽等食品已折碎不完整者，即失去原食品形状者（食物中毒样品除外）。653 按规定采样数量不足者。66对送检符合要求的样品，检验室收到后，应立即进行检验，如果条件不具备，应置4冰箱存放，及时准备创造条件，然后进行检验。67 样品检验时，根据其不同性状，进行适当处理。671 液体样品接种时，应充分混合均匀，按量吸取进行接种。672 固体样品，用灭菌刀、剪取其不同部位共25g，置于225ml灭菌生理盐水或其他溶液中，用均质器搅碎混匀后，按量吸取接种。673 瓶、袋装食品应用灭菌操作启开，根据性状选择上述方法处理后接种。7玻璃器皿的清洗要求71任何洗涤方法，都不应对玻璃器皿有所损伤，不能用有腐蚀作用的化学药剂，也不能使用比玻璃器皿硬度大的物品来擦拭玻璃器皿。72一般新的玻璃器皿用2%的盐酸液浸泡数小时，后用水冲洗干净。73 用过的器皿应立即洗涤，放置太久会增加洗涤困难。74强酸、强碱及其它氧化物和有挥发性的有毒物品，都不能倒在洗涤槽内，以免污染环境水质，必须倒在废水缸中。75含有对人体有传染性病菌的器具，应先煮沸灭菌后再进行洗涤。76难洗涤的器皿不要与易洗涤的器皿放在一起，以免增加洗涤的麻烦。有油的器皿不要与无油的器皿混在一起，否则使本来无油的器皿沾上了油垢，浪费药剂和时间。78含有琼脂培养基的玻璃器皿的洗涤方法：事先应将器皿中的琼脂刮去，然后用清水洗涤，并用试管刷刷其瓶壁，以除去粘污在壁上的灰尘和油垢。用洗衣粉水洗去油污，然后用自来水冲洗。洗好后的器皿应倒置晾干或置于干燥箱中干燥至无水滴。79载玻片及盖玻片的洗涤法：新载玻片及盖玻片先在20%的盐酸溶液中浸一小时，然后用自来水冲洗2-3次，最后用蒸馏水换洗2-3次。用过的载玻片及盖玻片，应用纸擦去油垢，再放在5%的洗衣粉水中煮30分钟后立即用自来水冲洗，然后放在稀的洗液中浸泡2小时，再用自来水冲洗至中性。710移液管、倒管的洗涤方法：新的移液管及倒管先在的5盐酸溶液中浸一小时，然后用自来水冲洗几次，最后用蒸馏水换洗几次。用过的移液管、倒管先用自来水洗去表面的残液，再放在洗衣粉水中浸泡一小时以上，再用自来水冲洗至管内壁无残渣，最后用蒸馏水换洗次，晾干后入恒温干燥箱中烘干。8设备使用原则 81检验设备的使用由检验员严格按照操作说明书进行，其他人员不得随意操作。 82检验设备的日常维护保养由实验员根据设备操作说明书进行，出现不可排除的故障时，经部门经理批准，申请专业人员维修。 83检验设备应定期进行计量检测，确保仪器的准确性。 84检验员应爱护仪器设备，使用前应检查，使用后应及时清理清洁，并定期维护保养，下班前应检查设备电源是否关闭。9样品检验、记录和报告的要求91检验室收到样品后，首先进行外观检验，及时按照国家标准检验方法进行检验，检验过程中要认真、负责、严格进行无菌操作，避免环境中微生物污染。92样品检验过程中所用方法、出现的现象和结果等均要用文字写出试验纪录，以作为 对结果分析、判定的依据，记录要求详细、清楚、真实、客观、不得涂改和伪造。10革兰氏染色101原理革兰氏染色法是细菌学中重要的鉴别染色法，通过此法染色，可将细菌鉴别为革兰氏阳性菌和阴性菌两大类。其过程是：草酸铵结晶紫初染路哥尔氏碘液媒染95%乙醇脱色蕃红花红复染。若细胞能保持结晶紫与碘所形成的复合物而不被乙醇脱色，则细菌呈紫色，称革兰氏阳性菌，若被乙醇脱色而被蕃红复染成红色，则称革兰氏阴性菌。102药品与材料革兰氏染色液（草酸铵结晶紫液路哥尔氏碘液95%乙醇蕃红花红）、蒸馏水、菌落培养物（培养18-24小时）、二甲苯、香柏油103器具载玻片、盖玻片、酒精灯、废液缸、洗瓶、吸水纸、接种环、显微镜、镊子104操作程序涂片干燥固定草酸铵结晶紫初染水洗碘液媒染95%酒精脱色20-30秒水洗蕃红花红液复染水洗干燥镜检1041涂片：先滴一小滴蒸馏水于载玻片中央，然后用接种环取少量菌体轻轻混入水中，涂成一薄层并使细胞均匀分散。1042干燥：在空气中令其自然干燥或在酒精灯火焰上端高处微微加温但勿靠近火焰。1043固定：把涂有细菌的面朝上，在酒精灯火焰上通过三次，目的是杀死菌体细胞以及改变对染色剂的通透性，同时使涂片的菌体紧贴载玻片而不易被水冲洗脱落。1044初染：用草酸铵结晶紫液初染1分钟，水洗、吸干。1045媒染：加一滴路哥尔氏碘液媒染1分钟、水洗。（此时结晶紫与碘液成复合物）1046脱色：斜置载玻片，用95%酒精冲洗约2030秒种，立即水洗，吸干。1047复染：用蕃红花红液复染12分种，水洗晾干或用吸水纸吸干。1048镜检：在显微镜油浸镜下检查革兰氏阳性菌和阴性菌染色的差异，并观察菌体形态。105革兰氏染色成败的控制点1051涂片厚度：涂片过厚，细胞重叠，无法较好地观察单个细菌细胞形态，涂片过薄，细胞数量少，不利于观察。1052染色时间：染色时间过长,结晶紫与细胞结合，脱色不易，染色不够，结晶紫尚未与细胞结合。染色控制不好，易引起误判。1053乙醇脱色的程度：如脱色过度，则阳性菌被误染为阴性菌；若脱色不够，则阴性菌被误染为阳性菌。11安全操作规程111防火：1111平时要注意偶然着火的可能性，应备有灭火器。1112对易燃、易暴、自燃、强氧化剂等类药品，一定要妥善保存。1113开启易挥发性药品时，不要将瓶口对着自己或他人，在夏天气温较高时，开启前应事先设法冷却。1114身上或手上粘有易燃物或氧化剂液漏时，不得靠近火源，要立即清洗干净。1115使用易挥发可燃性试剂时，要尽量防止其挥发，要保持室内通风良好，绝对不可靠近明火。1116要定期检查电器设备，电源线路是否正常，要遵守安全用电规程，防止用电火花、短路、超负荷引起线路着火。1117室内严禁吸烟。1118严禁氧化剂、可燃物一起研磨。在工作中不要使用不知其成份的物质。1119避免浓硫酸与松节油、乙醇等相遇，以防止引起易燃。112灭火：1121发现起火，要立即切断电源，扑灭着火源，移走可燃物。1122针对着火源的性质，采取相应的灭火措施：1123普通可燃物，如、纸、木等着火时，可用沙子、湿布、石棉布等灭火。1124衣服着火时，应立即离开化验室，也可用厚衣物、湿布包裹压灭或躺到滚灭，或用水浇灭。1125有机物在敞口容器中燃烧时，可用石棉布盖灭，但绝不能用水。1126有机溶剂洒在桌面、地面上遇火引燃时，可用石棉布、沙子泡沫灭火器或干粉灭火器等灭火，绝不能用水。1127电线或精密仪器着火时，应用四氯化碳灭火器灭火，不能用水和泡沫灭火器。113防爆：1131有些药品虽然单独存放或使用时比较稳定 ，但若与其它药品混合就会变成易爆品，如高锰酸钾与硫酸、甘油或有机物；过硫酸铵与铝粉遇水；硝酸钾与醋酸钠；硝酸铵与锌粉遇少量水；苯、甲醇、乙醇、丙醇、乙醚与空气等等。因此，在工作中应尽量避免因以上药品混合而生产的爆炸物。1132干燥爆炸性药品时，绝对禁止关闭烘箱门。1133在测定瓶装啤酒二氧化碳或对瓶装啤酒水浴加热时，要防止酒瓶爆炸，摇动或加热升温时不可面对酒瓶。加热酒温不能大于30度。1134在蒸馏操作中，要保证蒸馏气（液）体畅通，以防止由于器皿内和大气间压力差逐渐加大，而产生爆炸。11 4防毒：1141剧毒药品应由专人进行保管，使用者应严格执行领用登记手续。1142毒性药品散落时，应立即全部收拾起来，并把落过毒物的桌子和地面洗净。1143严禁试剂入口或以鼻子接近试剂瓶口鉴别试剂。若必须以鼻子鉴别试剂，应将试剂瓶远离鼻子，开盖后以手轻轻煽动，稍闻其味即可。1144严禁食具和仪器互相代用。1145有毒药品必须在固定位置通风柜使用，用后应仔细洗手和漱口。11 5防伤：1151取用腐蚀性药品，如、硫酸、盐酸、冰醋酸等时，尽可能戴上橡皮手套。搬用较大瓶子时，必须一手托住底一手拿住瓶颈。1152腐蚀性药品不得在烘箱内烘烤。1153稀释硫酸时，必须在烧杯等耐热容器中进行，而且必须在玻璃棒不断搅拌下，仔细缓慢地将浓硫酸加入水中，而绝对不能将水加注到浓硫酸中。在溶解氢氧化钠等发热物时，也必须在耐热容器中进行。若需将浓酸和浓碱中和，则必须先稀释。1154取下正在沸腾的水或溶液时，须先用烧杯夹子摇动后才能取下使用，以防使用时突然沸腾溅出伤人。1155有害有毒化学药品的性质及存放条件见附表.附表：有害有毒化学药品的性质及存放条件名称有害性存放条件甲醛、冰醋酸、氢氧化钠、碘、氢氧化钾、氨水、过硫酸钠、苯酚、浓硫酸、浓盐酸对人体皮肤、眼、口、手、呼吸器官及金属有腐蚀性。阴凉通风，隔离存放二甲苯、甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、石油醚、苯胺、甲苯极易挥发成气体遇明火即燃烧。阴凉通风、室温底于30度甲醛、冰醋酸、苯胺、甲苯、苯酚、氯化钡、四氯化碳、氯化汞、三氯化二砷、醋酸铅、领苯二胺有消化道侵入极少量即能引起中毒致死。阴凉干燥，与酸类隔离。重铬酸钠、碘酸钾、硝酸钾、高锰酸钾、过硫酸钠适当条件下可能发生爆炸，可与有机物、锌粉等易燃固体形成爆炸混合物，个别遇水可发热爆炸。阴凉通风，室温底于30度与酸、糖等易燃物隔离。锌粉受热、冲击、摩擦或与氧化剂接触会产生爆炸；遇水可燃烧。室温底于30度与易燃物、氧化剂隔离。第三节 仪器设备操作规程1酶标仪操作规程（MULTISKAN MK3）11 用途： 用于进行标准光密度测定与凝集反应检测12 使用方法 121使用前认真检查设备状态是否良好。122开机，仪器将显示自检，预热1分钟，插板。 123按打印机上的纸键（酶标仪显示基础酶标有关准备）。 124按测量模式键。 125按输入键（显示单波长）。 126选择波长=450nm。 127按输入键（显示无试剂空白）。 128按输入键。 129按开始键。 1210自动打印结果。 1211使用完毕，关闭电源，清洁设备，盖好防尘布。13 注意事项131仪器一定要放在一个干净、平整的工作台上，要注意防尘、防潮、防晒、防震、防撞，远离强磁场，避免日光直接照射，不要在过湿或温差过大的环境下工作，应在机器两边留出足够的空间以保证空气流通。132仪器应避免干扰光学系统的任何部件。133仪器应避免任何液体流入仪器内部，防止其他外源性物质进入仪器内部，不要用手触摸透镜表面，滤光片，光检测器。134一定要使用符合仪器需要的电压，电压不稳定的则要使用稳压器，使输入酶标仪的电压保持稳定。使用读板之前，仪器有15分钟的温热过程，以使仪器工作稳定。135使用完毕后，先关掉机后面的开关，此时仪器会进行初步的自检，约耗时20秒，自检完成后，才可以拨下电源插头。136对酶标仪进行清洁工作或需开盖查看和更换零件，一定要先切断电源才可以进行。14清洁331每次使用完毕，立即清洁仪器，悬挂标识，并填写仪器使用记录。332检测结束后，先用干净纸去仪器工作区的杂物和浮尘。333用细软布擦拭仪器表面污迹、污垢目测无清洁剂残留，用清洁布擦干。334每次使用清洁完毕用布罩罩好仪器。334效果评价:设备内外表面应该光亮整洁，没有污迹。2电热蒸馏水器操作规程21用途： 制备蒸馏水22使用方法 221使用前认真检查设备状态是否良好。 222先关闭设备的放水阀。 223开启水源阀，使水从进水控制阀进入冷凝器，再从回水管进入蒸发锅，直至水位上升到玻璃水位表中心处，关闭水源阀。 224接通电源，当水沸后有蒸馏水 滴出时再重新开启水源阀，并调节到冷却水溢出水温为70左右，蒸馏水水温在40左右。 225蒸馏水出水口用洁净的导管导入洁净容器中。 226使用完毕，先关闭电源，待蒸发锅内水温降至50左右，再关闭水源阀。 227待蒸发锅内水温降至常温后，将锅内的水导完出来，清洗蒸发锅。23注意事项 231每次使用前应洗刷蒸发锅一次，且将有水排净，更换新鲜水。 232蒸发锅有水垢，可用弱酸或弱碱溶液洗刷，清除。233新购进蒸馏水器应先清洗，并经过2小时以上通电蒸馏后，方可进行制备蒸馏水。234使用过程切勿断水。3超净工作台操作规程31用途：局部高洁工作环境，无菌接种生物培养物。32使用方法：321超净工作台的主要组成部分：高效过滤器、中效过滤器、通风机、电气控制及排气管道部分。322安放点的选择：3221应安放于卫生条件较好的地方，便于清洁，门窗能够密封以避免外界的污染空气对室内的影响。3222安放位置应远离有震动及噪音大的地方。3223严禁安放在产生大尘粒及气流大的地方，以保证操作区空气的正常流动。323使用前的检查：3231接通超净工作台的电源。3232旋开风机开关，使风机开始正常运转，这时应检查高效过滤器出风面是否有风送出。 3233检查照明及紫外设备能否正常运行，如不能正常运行则通知机修检修。3234工作前必须对工作台周围环境及空气进行超净处理，认真进行清洁工作，并采用紫外线灭菌法进行灭菌处理。3235净化工作区内严禁存放不必要的物品，以保持洁净气流流动不受干扰。 324使用：3241使用工作台时，先经过清洁液浸泡的纱布擦拭台面，然后用消毒剂擦拭消毒。3242接通电源，提前50分钟打开紫外灯照射消毒，处理净化工作区内工作台表面积累的微生物，30分钟后，关闭紫外灯，开启送风机。3243工作台面上，不要存放不必要的物品，以保持工作区内的洁净气流不受干扰。3244操作结束后，清理工作台面，收集各废弃物，关闭风机及照明开关，用清洁剂及消毒剂擦拭消毒。 3245最后开启工作台紫外灯，照射消毒30分钟后，关闭紫外灯，切断电源。3246每二月用风速计测量一次工作区平均风速，如发现不符合技术标准，应调节调压器手柄，改变风机输入电压，使工作台处于最佳状况。3247每月进行一次维护检查，并填写维护记录。33清洁331每次使用完毕，立即清洁仪器，悬挂标识，并填写仪器使用记录。332取样结束后，先用毛刷刷去洁净工作区的杂物和浮尘。333用细软布擦拭工作台表面污迹、污垢目测无清洁剂残留，用清洁布擦干。334要经常用纱布沾上酒精将紫外线杀菌灯表面擦干净,保持表面清洁,否则会影响杀菌能力.335效果评价:设备内外表面应该光亮整洁，没有污迹。4高压灭菌器操作规程41用途：工器具，培养基及微生物培养物灭菌。42使用方法：421灭菌原理：本灭菌器采用压力饱和蒸汽灭菌，利用饱和蒸汽对被灭菌物品迅速潮润和加热，恒温适当时间使微生物被杀灭，达到灭菌效果。422加水：在主体内加入清水8升，使水位一定要超过电热管，连续使用时，必须在每次灭菌前补足上述水量，以免干热使电热管烧坏；当加水过多发现内胆中有存水时，应开启下排汽阀放去内胆中的多余水量。423堆放：将待灭菌的物品予以妥善包扎，各包之间留有间隙，顺序地堆放在灭菌桶的筛板上，这样可有利于蒸汽的穿透，提高灭菌效果；堆放灭菌包时应注意安全阀放汽孔位置必须留出空隙，保障其畅通放汽，否则因安全阀汽孔堵塞未能泄压，易造成锅体爆裂事故。424密封：将堆好物品的灭菌桶放在主体内，把横梁推向立柱内，横梁必须全部推入立柱槽内，手动保险销自动下落锁住横梁，并将手轮向左旋转，使锅盖向下压紧锅体，加力使之充分密合。425加热：将灭菌器接上与铭牌标志电压一致的电源，在加热开始时应将放气阀的摘子推至垂直“放气”方位。使空气随着加热由桶内逸去，待有较急的蒸汽喷出时，即将该摘子扳回水平“关闭”方位，此时压力表指针会随着加热逐渐上升，指示出灭菌器内的压力。426灭菌：当压力到达所需的范围时，开始计算灭菌所需时间，并使之维持恒压。当应用0.14兆帕斯卡，124-126灭菌时，则安全阀能使之维持恒压。427干燥：对于物品在灭菌后需要迅速使之干燥者，可在灭菌终了时将灭菌器内的蒸汽通过放气阀予以迅速排出，待压力表指针回复至“零”位，再稍待1-2分钟，然后将盖打开继续加热10-15分钟，使物品上残留水蒸汽得到蒸发，随后将电源开头拔到“关”停止加热。428冷却：在对液体灭菌时，当灭菌时间终了时，切勿立即将灭菌器内的蒸汽予以排出，否则，由于液体的温度未能迅速下降，而压力蒸汽突然释放，会使液体剧列沸腾造成溢出或容器暴裂等危险事故，所以在灭菌终了时必须先将电源开关拔至“关”，停止加热，待其冷却直至压力指针回复至“零”位，再待数分钟后，打开放汽阀，排去余汽后，才能将盖开启。429消毒参数灭菌物类保温时间（分）蒸汽压力Mpa饱和蒸汽相对温度（）橡胶类塑料类器皿类器械类瓶装溶液类1530-45151020-400.1050.110.1050.140.1050.140.1050.140.1050.14121121-126121-126121-126121-12643维护保养： 431每次使用前，应保证主体内有8升左右的足够水量，使水位超过电热管，但也不能过量，水过量会使敷料不易干燥。432在开始加热时，应将放气阀摘子置于垂直“放气”位置，使桶内的冷空气随着加热逸出，否则蒸汽的穿透会受到空气的阻碍而得不到预期的灭菌效果。433对不同类型，不同灭菌要求的物品，切勿放在一起灭菌，以免顾此失彼，造成损失。434灭菌终了时，若压力表指针已回复零位，而盖不易开启时，则将放气阀摘子置于“放气”方位，使外界空气进入灭菌器内，真空消除后盖即可开启。435压力表使用日久后，压力表指示不正常或者不能回复零位时，应及时予以检修，平时应定期与标准压力表相对照，若不正常，应换上新表。436橡胶密封垫圈使用日久会老化，应定期更换。应对设备保持清洁干燥，延长使用年限。437对安全阀、放气阀、压力表应经常检查，以保持良好的精度和灵敏度，发现不正常时应及时修理，切不冒险使用。438使用电加热时必需接通地线，在消毒化学物品应考虑物品的爆裂，以免发生危险。439本消毒器应经常清刷，保持清洁，以延长使用寿命。4310每月进行一次维护检查，并填写仪器维护记录。44清洁441每次使用完毕立即清洁仪器，悬挂标识，并及时填写使用记录。442用细软布擦拭表面污迹、污垢目测无清洁剂残留，用清洁布擦干443用软布蘸中性洗涤剂擦洗，再用干布擦干5水分快速测定仪操作规程51用途样品含水量的测定52使用方法521接通电源，打开开关。522红外线灯亮点预热约20分钟，干燥秤盘和秤盘架部件表面的水分。523天平经预热后调整零点，调零后不能再旋动零位微调旋钮。待天秤盘冷却后称量被测样品。524 打开红外线灯开关，用温度控制器调整至规定温度，用定时器根据需要定时。525待样品恒重后取下砝码和被测物质，根据测定结果0进行计算。53维护与保养4.6.1 每次放入样品量不能超过天平的最大量程。4.6.2仪器应放在水平台面上。4.6.3每月进行一次仪器的维护检查，并填写维护记录。54清洁541 每次使用完毕，清理掉天平盘上的样品，用细软布擦拭设备表面目测无药物残留，用清洁布擦干。542对仪器进行清洁后悬挂标识，及时填写仪器使用记录543效果评价:设备表面应该光亮整洁，没有污迹。6分析天平操作规程61用途：精确称量样品或药品试剂62使用方法：621在使用前必须知道此天平的原理，并经调试校正后方可使用。622称量前检查各部件是否处于正常状态。检查专用砝码的数目和天平零件部位是否在正确位置上。旋转器上的读数盘应为零。察看天平上标明的最大载重量，切勿超过。623检查天平盘是否清洁，如有灰尘或其他杂物，用软毛刷清扫干净。检查天平是否在水平位置，如不水平，调节天平脚使天平水平。624开启天平两侧玻门510分钟，使天平内外的温度和湿度趋于一致，以免天平内外的温度，湿度不一致而产生变动性。625接通电源后，检查天平的零点。626天平箱内的各部件尽可能不要用直接接触，如必须接触时，应将手指擦干净，最好是戴上干净的手套。63维护与保养631被称物的载体必须干净，不得将称量的药物直接放在天平盘上，称量吸湿性和挥发性强的物体须放在密闭的容器中进行，称具有腐蚀性的物体时，必须注意不要把被称量物洒落在天平盘，以免腐蚀天平的零件，被称物应放在盘的中央。632过冷和过热的物品都不能放在天平上称量。凡是经过干燥或灼热的物品，必须放在干燥器内在室温冷却，方可称量。633称量时不要打开前门，以防呼出的热气、水、汽、二氧化碳和气流影响称量。读数时，一定要关上天平两侧的门。634进行同一分析工作，称量