高敏肌钙蛋白T(cTnThs)的检测优势.ppt

高敏肌钙蛋白t ctnt hs 的检测优势 xxx march 2010 contents 肌钙蛋白概述高敏肌钙蛋白t检测特性高敏肌钙蛋白t与不同肌钙蛋白的比较总结 contents 肌钙蛋白概述高敏肌钙蛋白t检测特性高敏肌钙蛋白t与不同肌钙蛋白的比较总结 急性心肌梗死 mi 后心脏标志物的分泌心脏标记物升高量与心肌坏死程度成正比 frenchjandwhitehheart2004 90 1 99 106 肌钙蛋白生理 troponin 肌纤维由平行的粗丝和细丝组成网状结构 粗丝是肌球蛋白复合体 细丝由肌动蛋白 原肌球蛋白和肌钙蛋白组成肌钙蛋白在骨骼肌和心肌中广泛存在 肌钙蛋白c结合ca离子 存在于骨骼肌和心肌肌钙蛋白i是肌动蛋白抑制亚基 仅存在于心肌中肌钙蛋白t是原肌球蛋白结合亚基 推动肌肉收缩 仅存在于心肌中 心肌纤维 肌钙蛋白是特异性最好的心脏标志物 43名马拉松选手奔跑3天后 血液中肌钙蛋白浓度未有升高肌红蛋白和ckmb则有升高1 clinchem43 3 458 466 1997 心肌损伤后 肌钙蛋白浓度升高时间早 持续时间长是理想的心肌损伤标志物 frenchjandwhitehheart2004 90 1 99 106 症状出现后时间 korffsetal heart 2006 92 987 993 wuaetal clinchem1998 44 1198 1208 katrukhaaetal clinchem1997 43 1379 1385 肌钙蛋白t的存在形式单一 而肌钙蛋白i有多种存在形式导致肌钙蛋白i检测标准不统一 troponini易发生蛋白质水解和酶代谢 降解在体内体外都可发生troponint单体是tnt唯一的存在形式troponini有多种存在形式 自由的和复合形式蛋白结合形式复合的非肝磷脂形式磷酰基形式 不同的肌钙蛋白i检测方法采用肌钙蛋白i肽链的不同位点 不同肌钙蛋白i形式对不同检测方法的反应各不相同 wuaetal clinchem1998 44 1198 1208 report05085 ninetroponinassays december2005 https www pasa nhs uk cep 不同检测系统的肌钙蛋白i检测其结果也完全不同 不同检测系统的肌钙蛋白i检测 其结果也完全不同 report06020 may2006 https www pasa nhs uk cep 标准化问题对肌钙蛋白i检测所带来的问题 个体间ctni检测到标准化较困难且检测水平可能出现20倍以上的差异干扰物可能导致错误的升高或错误地降低分析物浓度 这与反应中干扰的部位有关还可能导致使其他分析物的结果出现误差对于免疫检测的干扰可能导致实验室对患者结果的错误解读 及使医生对患者应用错误的治疗由于ctni检测方法多样 医生和实验室人员产生常会出现严重的混淆 接受应用一种个人的tn检测需要有基于同行评审的文献支持 dattapetal clinchem1999 56 2266 69 tatej wardg clinbiochemrev 2004 25 105 20 applefandwua clinchem2001 47 377 379 contents 肌钙蛋白概述高敏肌钙蛋白t检测特性高敏肌钙蛋白t与不同肌钙蛋白的比较总结 高敏肌钙蛋白t检测特性 肌钙蛋白t的检测历史高敏肌钙蛋白t检测的一致性高敏肌钙蛋白t检测的灵敏度高敏肌钙蛋白t检测的准确性 制作工艺的不断进步 使得肌钙蛋白的检测水平不断提高 制作工艺的不断进步 使得肌钙蛋白的检测水平不断提高 ctnt hs与第四代肌钙蛋白t比较更低的检测阈值 更精确的检测参考值 ctnt hs沿用了最先进的电化学发光技术 先进的检测技术电化学发光技术电化学发光免疫测定法 elecsys 发展于1996年 它在发光反应中加入了电化学反应 是继放射免疫 酶免疫 化学发光免疫测定之后的新一代标记免疫测定技术 是电化学和免疫测定相结合的产物 世界公认的最先进的临床免疫检测技术 肌钙蛋白 先进的电化学发光法 以三明治模式应用2个ctnt特异性鼠单克隆抗体作为抗原结合片段 fab 抗体识别位于ctnt分子中部的表达位 氨基酸位125 131和135 147 检测基于电化学发光免疫分析应用钌的三联啶金属错合物 ii 作为标记 高敏肌钙蛋白t 更先进的检测技术 生物素捕获抗体保持不变 检测抗体的基因经过重新设计 用人iggc1区域取代鼠单克隆抗体fab片段的连续c1区域 形成人鼠嵌合型检测抗体获益 进一步减少易受嗜异性抗体 hamas 的干扰 提高了检测的准确度样本量由15 l增加到50 l 增加检测抗体的钌浓度 和通过缓冲区优化降低背景信号来实现获益 提高了分析检测的灵敏度 最低检测阈值由0 01ng ml降低到0 003ng ml 高敏肌钙蛋白检测过程 生物素捕获抗体 2 5 g ml 钌标记检测抗体 2 5 g ml 样本在均相中培养4 5分 elecsys2010 cobase411 stat应用 或9分钟 modulare170 cobase611 正常应用 添加链霉亲和素包裹的珠 在第二个4 5或9分钟的培养期内所形成的免疫复合物结合成微粒物 在第二次培养期后 反应混合物被转送入测量单元 其中珠被磁极捕获至电极表面 清洗测量单元去除未绑定的标记并注满包含三丙胺的检测缓冲液 给电极施以电压后 释放出的化学发光可以由光电倍增器检测到 结果通过2点校准曲线确定且具有仪器特异性 ctnt hs简单方便的试剂管理 2维条形码自动输入全部信息试剂联体包成分独立稳定好无需配制 打开即用自动开闭试剂瓶盖 有效地防止挥发等 ctnt hs检测样本的采集 适用多种标本类型血清血浆 k2 edta k3 edta 肝素理 肝素钠 标本稳定时间2 8 c24h 20 c12月 可冰冻一次超长试剂稳定时间 高敏肌钙蛋白t检测特性 肌钙蛋白t的检测历史高敏肌钙蛋白t检测的一致性高敏肌钙蛋白检测灵敏度高高敏肌钙蛋白检测变异小 精确度高 ctnt hs检测可在多种检测平台上进行 适用于各种型号的电化学发光全自动免疫分析仪elecsys2010cobase411cobase601modulare170 p bregressiony 1 0 x 0 001md 95 0 008n 200r 0 9995t 0 9740 ctnt hs在各种平台均有非常好的检测一致性e2010 stat vs e170 18min range0 2 5ng p bregressiony 1 002 x 0 001md 95 0 007n 195r 0 9990t 0 9727 ctnt hs在各种平台均有非常好的检测一致性e2010 stat vs e170 18min range0 1ng ml ctnt hs在所有检测平台均有非常好的检测一致性多中心研究结果 高敏肌钙蛋白t检测特性 肌钙蛋白t的检测历史高敏肌钙蛋白t检测的一致性高敏肌钙蛋白检测灵敏度高高敏肌钙蛋白检测变异小 精确度高 ctnt hs比第四代肌钙蛋白t有更好的检测灵敏度tntgen4th 10 cv tnt hs 99thpercentile 507位超过20分钟胸痛患者 apacestudy ctnt hs比第四代肌钙蛋白t更早诊断心梗 所有患者 胸痛小于3小时患者 treichlinetal nejm volume361 858 867 2009 ctnt hs比第四代肌钙蛋白 ckmb和肌红蛋白更早发现心梗 5468位stemi患者多中心研究 5124位nstemi患者多中心研究 ctnt hs连续检测可提高nstemi检测敏感度在怀疑急性mi患者中 必须结合临床情况进行tnt连续检测 高敏肌钙蛋白基线水平的升高或降低对于区分急性或慢性心肌损伤非常重要动态肌钙蛋白变化对于诊断acs更为重要 5361位ua患者多中心研究 0 1 10 0 1 2 3 4 5 6 timefromadmission h cut offratio tnths tnt4 ckmb cut offratio1 5124位nstemi患者多中心研究 myoglobin 高敏肌钙蛋白t检测特性 肌钙蛋白t的检测历史高敏肌钙蛋白t检测的一致性高敏肌钙蛋白检测灵敏度高高敏肌钙蛋白检测变异小 精确度高 每个心脏标志物都应建立参考决定范围 且是基于正常健康无心脏疾病史的人群 参考人群 对于心脏肌钙蛋白和ck mb值的升高应定义为测量值超过参考对照组的第99百分位数每个检测第99百分位数变异系数cv应 10 nacb ifcc指南对于acs心脏标志物检测的建议检测99百分位参考值变异系数 cv 10 applefetal nacbpracticeguidelinesinacs circulation2007 352 355 nacb nationalacademyofclinicalbiochemistry美国临床生化科学院ifcc internationalfederationofclincalchemistryandlaboratorymedicine国际临床化学学会 初步结果 445人 第99百分位数 0 014ng ml ctnt hs正常人群中第99百分位数 0 014ng ml confidential forinternaluseonly 来自546位健康志愿者 tnt hs检测10 cv为0 013ng ml小于99百分位参考值 符合指南对于检测标准的要求 10 cvat0 013ng ml tnt hs在第99百分位数的url值时能小于10 cv 14pg ml ctnt hs完全满足esc acc对于检测精确性的要求 rocheelecsys tnt siemenscentaur tniultra 2nd abbottarchitect beckmanaccess accutni 2nd siemensimmulite2500statsiemensimmulite1000turbo 99thcentileurl 10 cv 0 04 0 03 0 012 0 032 0 04 0 06 0 034 0 03 0 15 0 64 siemensvista 2cd 0 045 0 14 esc acccriteriamet yes no no yes no no yes no 0 009 limitofdetection 0 01 0 006 0 01 0 012 0 04 fromtheupdatedtablefromifccwebsite analyticalcharacteristicsofcommercialtnassaysasstatedbymanufacturer oct2008 orthovitroseci 2nd no 0 003 0 013 0 2 0 42 rocheelecsys tnt hs 0 014 0 1 0 015 0 07 0 04 siemensdimensionrxl 2cd no riskstratification yes yes yes no no yes yes yes no no biomerieuxvidastni ultra yes yes 0 01 yes no 0 02 abbottaxsymadv 2cd 0 04 0 16 no no tosohaia21 2cd 0 06 0 09 ctnt hs在所有检测平台均有非常好的检测精确性cobas6000 e170 e411ande2010上ctnt hs批内检测精确性 ctnt hs在所有检测平台均有非常好的检测精确性cobas6000 e170 e411和e2010上ctnt hs批间检测精确性 contents 肌钙蛋白概述高敏肌钙蛋白t检测特性高敏肌钙蛋白t与不同肌钙蛋白的比较小结 肌钙蛋白检测评价标准1 1 anewseasonforcardiactroponinassays it stimetokeepascorecard fredsappleclinicalchem 2009 55 7 1303 1306 仅有ctnt hs符合指南要求并达到4级最佳试剂标准 company platform assaya99th cv99th10 cvacceptanceassay g l g l g ldesignationdesignation contents 肌钙蛋白概述高敏肌钙蛋白t检测特性高敏肌钙蛋白t与第四代肌钙蛋白t的比较高敏肌钙蛋白t与不同肌钙蛋白的比较总结 总结 肌钙蛋白检测已成为各种指南诊断急性心肌梗死的 金标准 罗氏高敏肌钙蛋白t采用最先进的电化学发光免疫检测技术 且在各种平台上均有很好的检测一致性高敏肌钙蛋白t的最低检测浓度仅为0 003pg ml 是目前灵敏度最佳的肌钙蛋白高敏肌钙蛋白t第99百分位参考值的检测变异系数 cv 10 完全符合nacb ifcc esc acc的检测要求高敏肌钙蛋白t能比第四代肌钙蛋白更早发现心梗 且连续检测能进一步提高其