三七总皂苷治疗阿尔茨海默病的多中心随机对照临床研究.doc

三七总皂苷治疗阿尔茨海默病的多中心随机对照临床研究 老年医学与保健2叭9年第25卷第4期Geriacr HealchCare，2019，V0125No4三七总皂苷治疗阿尔茨海默病的多中心随机对照临床研究李爱东1，陈建良2，夏军3，陈蕊森3，蔡思敏1，刘翠怡1，陈川11中山大学附属第八医院康复医学科，广东深圳518033；2中山大学附属第八医院神经外科，广东深圳518033；3深圳市第二人民医院(深圳大学第一附属医院)放射科，广东深圳518035摘要】目的探讨三七总皂借=(pamx notoginsengsaponins，PNS)治疗阿尔茨海默病(Alzheimer disease，AD)的临床效果，为治疗AD提供方法。 方法选择xx年1月2叭9年2月深圳中山大学附属第八医院和深圳市第二人民医院等就治的AD患者102例，采用随机数字表法分为对照组和观察组，每组51例。 对照组采用常规药物治疗，观察组在对照组的基础上给予血栓通注射液(PNS)静脉滴注。 观察并比较2组患者治疗前后简易精神心理测试量表(MMSE)评分，AD协作研究日常能力量表(ADCSADL)评分，以及双侧额叶、颞叶、枕叶和顶叶的脑灌注血流量(CBF)值的变化。 结果2组采用的基线抗AD药物差异均无统计学意义(PO05)；治疗后观察组MMSE评分和ADCS-ADL评分均高于对照组(P005)，观察组TNF、IL6和CRP水平均低于对照组(P005)；治疗后2组左右额叶、颞叶和顶叶CBF值均显著高于治疗前(P005)；afcertreatment，thescoresof MMSEandADCSADL werehigher andtheleVels ofTNF一。 【，IL-6and CRPwere lowerin observationgroup thanthose incontrolgroup(P005)；the CBFvalues inbilateraI frontal，temporal andparietallobes inthe2groups aftertreatment werehigher thanthosebefbretreatment U005)andtheincreaseinobserVation groupwaseVengreaterthanthatin controlgroup U005)Conclusions ThetreatmentwiIh PNSfor ADcases canimproVe theCBF，decrease theleVel ofinnammatiOn andimproVe cognitiVefunctiOn，it isOfcenain cliIlicalapplicatiOn Value【KEYwoRDSlAlzheimer。 s Disease(AD)；panax notoginsengsaponins(PNS)；blood perfusion；neurologicalfunctionrandomized rol阿尔茨海默病(A1zheimer disease，AD)是一种渐进性神经退行性疾病，早期表现为记忆障碍等，随基金项目深圳市科创委科技计划基础研究项目(JCYJxx0529153646078通信作者陈建良，电子信箱chenjl7777163着病情进展，逐渐发展为认知功能等损害?。 我国人口老龄化不断加速，老年人口不断增加，我围AD患者不断增加，给社会与家庭带来巨大负担，因此，寻求有效的防治AD的方法已经刻不容缓”1。 AD的发病机制主要有Ap级联假说、tau蛋白假说、氧化应激501万方数据老年医学与保健2019年第25卷第4期Geriacr HealIhCare，2019，V0125No4假说、基因突变假说和胆碱能假说等多种假说，虽然根据AD的发病机制研发了多种药物，如多奈哌齐、美金刚和依他唑酯等药物显示了一定的临床应用效果，但治疗效果有限，目前尚缺乏有效的治疗药物”。 研究显示，AD存在脑灌注量下降或受损情况，有学者认为脑血管的病理变化在AD发病过程中起着至关重要的作用，改善大脑血液循环可能是AD治疗的重要方向”。 三七总皂苷(paIlax notoginsengs印onins，PNS)是中药三七的有效成分，包括多种皂苷单体，临床和基础研究|51均显示，PNS具有扩张血管、改善脑循环、清除自由基和抗炎等多种功效，可改善AD患者脑血流量和改善AD患者症状。 鉴于此，本试验研究PNs(血栓通)治疗AD，观察其临床效果，为PNS治疗AD提供参考，具有一定的应用价值。 1资料与方法11一般资料选择xx年1月-2019年2月选择中山大学附属第八医院、深圳市二人民医院及深圳其他区属医院等记忆门诊及住院的AD患者作为研究对象，符合纳入标准共102例，其中男性60例，女性42例，年龄为6084岁，平均年龄为(74265)岁。 采用随机数字表法将102例AD患者分为对照组和观察组，每组5l例。 2组性别、年龄、受教育年限、病程和基线的简易精神心理测试量表(MMsE)评分等一般资料差异均无统计学意义(P005)，具有可比性。 见表l。 12纳人标准 (1)符合AD的诊断标准”。 ； (2)年龄65岁，性别不限； (3)MMSE评分26分； (4)至少有小学及以上文化程度，AD发病前具有一定读写能力和正常沟通交流能力； (5)患者或其直系亲属对研究知情同意，并签署知情同意书。 具有上述全部选项者纳入本研究。 本试验经医院伦理委员会批准。 13排除标准 (1)符合血管性痴呆等其他痴呆类型的诊断标准； (2)合并精神疾病者； (3)合并心血管、肝、肺、肾脏等基础疾病，病情严重，生命体征不稳定者； (4)合并恶性肿瘤，预计生存期1年者； (5)合并听力障碍、语言障碍等，不能完成MMSE评估者； (6)汉密尔顿抑郁量表15分者； (7)酒精依赖、药物依赖、毒品依赖者； (8)对研究药物过敏者； (9)拟纳入或已纳入其他临床研究者。 符合上述选项中至少1项者不纳入本研究。 14剔除标准 (1)研究过程中出现严重并发症，需要中止研究者； (2)研究期间患者出现躯体疾病加重或新发躯体疾病，治疗可能影响研究结果判定者； (3)研究期间死亡、失访者； (4)患者或直系亲属强烈要求退出研究者。 符合上述选项中至少1项者即踢除。 15治疗方法对照组根据患者基础疾病情况给予调脂、降糖和降压等基础治疗，指导患者戒烟戒酒，饮食以低脂饮食为主，指导患者完成日常散步和慢跑等日常运动，同时按照经验常规用药，但药物名称和剂量统一。 观察组在对照组的基础上给予血栓通注射液(广西梧州制药业集团股份有限公司，批准文号国药准字zxx5652，规格5mL01759术1)治疗，5儿血栓通注射液溶于生理盐水250mL进行静脉滴注，1次d，连续治疗4周。 16观察指标与方法 (1)MMSE评分【7】采用MMSE评估患者的认知功能，MMSE评分包括视结构、语言、即刻记忆、延迟记忆、注意力和计算、时间定向力、空间定向力7个纬度共30个问题，计分30分，得分越高说明患者的认知功能越好7】。 (2)ADCSADL评分8采用AD协作研究日常能力量表(ADcs-ADL)评估患者的基本和操作性日常生活活动能力。 ADCsADL包括19个条目，分值范围054分，得分越高说明患者独立完成日常生活的能力越强|81。 (3)炎性细胞因子检测抽取患者晨起空腹静脉血3mL，检测血肿瘤坏死因子一0【(TNF-0【)、白介素一6(IL一6)和c反应蛋白(CRP)水平，采用放射免疫分析法对TNFq IL一6和cRP水平进行检测，试剂盒购于北京北方生物技术研究所，主要操作步骤 (1)试剂室温平衡20mill，除空白孔外，每孔分别加入样品或不同浓度的标准品100止，封闭反应孔37。 C孵育90IIlin，洗板4次。 (2)标准品孔及样表12组馓资料比较502万方数据老年医学与保健2019年第25卷第4期Geriatr HealthCare，2019，V0125No4本孑L中每孔加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体100止，封闭反应孑L370C孵育1h，洗板4次。 (3)除空白孔外，加人酶结合物工作液(100“L孔)，封闭反应孔37。 C孵育30mill，洗板4次。 (4)每孔加入底物各50此，37。 C孵育15IniIl。 每孔加入终止液50止，在450IlIIl波长处测定各孔的吸光读数，以标准品绘制曲线。 (4)磁共振脑灌注成像采用GE S追naEX-CITE HD30T超导磁共振仪进行磁共振脑灌注成像，所有受检者测量在同一层面，相同解剖结构下进行，测量范围包括双侧额叶、颞叶、枕叶和顶叶，记录各感兴趣区的灌注参数值。 于治疗前后进行评估，并对结果进行分析与比较。 17统计学分析采用SPSS230软件进行数据统计分析。 计量资料采用均数标准差(夏s)表示，组间比较采用独立样本t检验，组内比较采用配对f检验，计数资料采用率或百分比表示，采用#检验，P005)。 见表2。 222组治疗前后MMSE和ADCSADL评分比较治疗前2组MMSE评分和ADCS-ADL评分差异均无统计学意义(P005)；治疗后观察组MMSE评分和ADCSADL评分均明显高于对照组，差异均有统计学意义(P005)；治疗后观察组TNFa、IL-6和CRP水平均显著低于对照组，差异均有统计学意义(PO05)。 见表4。 232组治疗前后MRI脑灌注成像水平相比较治疗前2组患者左右额叶、颞叶、顶叶、枕叶CBF相比较差异均无统计学意义(P005)；2组治疗后左右额叶、颞叶、顶叶CBF与治疗前相比较均显著升高(P005)，且观察组与同期对组相比较均显著升高(P005)；2组治疗后枕叶CBF相比较差异均无统计学意义(即05)。 见表5。 表22组患者基线抗AD药物治疗比较(例)注与同组治疗前比较，6P P P P AD病理改变主要为皮质弥漫性萎缩，脑室扩大，神经元大量减少，p淀粉样蛋白与神经缠结的沉积等，过去几十年AD的药物研发主要聚焦于降低大脑内p样淀粉蛋白(Ap)的浓度，常用药物包括控制伴发精神病理症状的药物如抗焦虑、抗抑郁、抗精神病的药物和益智药或改善认知功能的药，以促进脑细胞的恢复，改善功能脑细胞，从而达到提高记忆力目的，尚无有效药物可以控制AD的病理发展，临床多数学者认为需要找寻新药物作用靶点，特别是与AD早期病理改变有关的靶点”01。 正常脑血流与脑代谢是脑功能维持的重要基础，脑血液灌注量下降、脑代谢紊乱，可造成脑神经元缺血、缺氧而变性，影响脑功能。 大量临床和基础研究“。 12l显示，长时间慢性低脑灌注病理生理状态下，存在Ap升高和磷酸化Tau蛋白显著升高，而Ap升高和磷酸化Tau蛋白升高被认为是AD的特征性改变。 Pluta等”“研究进一步显示，Ap沉积于毛细血管基膜可促使血管内皮细胞分泌内皮素，增加血管收缩功能，加重脑病的缺血缺氧，缺血缺氧和Ap沉积现成恶性循环，随着时间延长能诱发或加重AD患者的记忆认知功能障碍。 多项研究”4。 51显示，中医的活血化瘀疗法可能改善脑的血管血液灌注，改善神经功能及认知功能，为AD治疗提供新的药物治疗病理依据，而中药中的有效成分成为新AD药物的重要研究方向。 传统中药中的三七可用于各种内外出血症和跌打504损伤、瘀滞疼痛等，具有抗血栓形成，改善微循环，保护血管内皮细胞，抗神经细胞凋亡，扩张脑血管，增加脑血管流量，广泛用于脑缺血再灌注的治疗“61。 近年来，有关三七主要成分治疗ADD的基础研究逐渐增多。 Ap主要以Ap40和Ap42两种形式存在，Ap42可迅速集结成淀粉蛋白纤维，是Ap聚集和沉积的开端，研究“1显示，PNS可抑制Ap42对微血管内皮细胞活力的抑制。 动物实验显示，PNS可通过上调去整合素一金属酶表达”、上调过氧化物酶体增殖物激活受体”、升高IDE酶表达、抑制tau蛋白过度联酸化 1、清除自由基”烈、抑制脑内神经炎症【21等多种机制发挥调节Ap代谢、影响tau蛋白磷酸化、抑制神经细胞凋亡等作用，改善AD实验动物模型的学习记忆水平。 因此，PNS可通过多途径、多靶点发挥抗AD功效，有望开发成防治AD的药物，但目前对PNS的研究多以基础研究为主，较少见随机对照的临床研究。 本研究基于众多基础研究，设计了PNS辅助治疗AD随机对照研究，本研究结果显示，观察组治疗后MMsE和ADL评分均高于对照组，结果提示，PNS辅助常规药物治疗AD可改善患者的认知功能，改善患者的日常行为能力。 AD的关键特征是脑内神经炎症，Ap激活星形胶质细胞和小胶质细胞，诱导大量炎症因子释放，损伤神经细胞，诱导AB生成，形成恶性循环，临床研究显示，AD患者存在血清炎症因子水平升高，血清炎症因子水平有助于AD的确诊124。 2”。 本研究结果显示，观察组治疗后TNF一0【、IL一 6、CRP等炎症因子水平均低于对照组，结果提示，PNS可降低AD患者的炎症水平，对Ap诱导炎症导致的神经细胞损伤具有一定保护作用。 脑血流动力学改变是AD的重要病因，MRI脑灌注成像可反映脑血管微循环情况，主要参数为cBF指一定时间内流经一定体积脑组织的血流量，研究【26。 271显示，AD患者存在额、万方数据老年医学与保健2019年第25卷第4期Geriacr HealthCare，2019，V0125No4颞、顶叶低灌注。 本研究结果显示，治疗后观察组双侧额叶、颞叶、顶叶CBF均高于对照组，结果提示，PNS可改善AD患者脑部的灌注血流。 综上所述，本研究结果初步显示，PNS治疗可改善AD的脑部灌注血流量，降低AD患者的炎症水平，在一定程度上改善认知功能。 本研究的局限性在于PNs对AD的作用机制是多靶点、多途径的，其抑制AD的主要作用途径尚需要进一步研究探讨；本研究随访时间较短，PNS对AD的远期效果尚需要进一步研究探讨。 参考文献【1Hafl-Javallerian M，Fang L，Muse V，酣甜Deep convolutioIlalneuralne研orks forsegmenting3D inviVo multiphotonimagesof VasculatIlrein Alzheimerdisease mousemodels【J】PLoSOne，2019，14 (3)e02135392】史奇，朱丽萍，颜玮，等江西省60岁及以上居民老年痴呆症和记忆力减退流行病学调查J】实用临床医学，2018，19 (1)83873】SaIl-JuanRodriguez A，Zhang Y，He M，雕a，Associationof amidenlemiat11erapies wimtiIne tosknled nursingfacility adIIlissiOn andcardiovascular eventSamong elderlyadults witllA1一zheiIller diseaseJ】JAMA Ne附0pen，2019，2 (3)e190213【4】YazdaIli M，Edrab N，Badri R，甜a，Multitarget inhibitorsagainstA1zheiIncr diseasederiVed仃om3一hydraziIlyl1，2，4一仃ia-zine scaffoldcontailling penda呲phenoxy metllyl-l，2，3triazoleDesign，synthesis a11d biologicalevalualion【J】Bioorg Chem，201984363371【5】聂娟，唐标基于系统药理学分析三七总皂苷干预脑血管疾病的作用机制【J】湖南中医药大学学报，2018，38 (9)103210376】McKha衄GM，KnopImn DS，Chertkow H，等美国围立老化研究所与阿尔茨海默病协会诊断指南写作组阿尔茨海默病源性轻度认知障碍诊断标准推荐【J1中华神经科杂志，xx，45 (5)352355【7】F01stein MF，Folstein 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