病原生物学细菌所致疾病.ppt

病原生物学 提问 1 IMViC 2 细菌毒素 3 细菌耐药性如何产生 4 大肠杆菌所致疾病 5 志贺毒素6 沙门菌重要的生化特征 7 Vi抗原8 幽门螺杆菌主要的生物学特征 9 霍乱弧菌培养的特点 10 霍乱毒素 案例分析 案例分析患者 男 16岁 因 发热 腹痛 腹泻 解脓便1天 就诊 就诊前一天 患者晚餐进食卤肉后 当晚即感身体不适 头痛 发热 恶心 四肢无力 半夜有阵痛性腹痛 大便为黄色水样 量多 其后每0 5 1h排便1次 便前有剧烈腹痛 最近几次带有脓血便 便后仍想解大便 要求 从微生物学角度 应该考虑采集哪些标本进行检测 如何设计鉴定试验 试分析引起该患者腹泻的可能原因 第二章 细菌所致疾病 消化道感染细菌化脓性细菌呼吸道感染细菌 第二节 化脓性细菌 化脓性细菌 引起化脓性炎症的细菌 皮肤皮下软组织深部组织内脏器官脓肿 化脓性细菌 革兰氏阳性菌 葡萄球菌属 链球菌属 肠球菌属革兰氏阴性菌 奈瑟菌属 莫拉菌属 假单胞菌属 埃希菌属 变形杆菌属 无芽孢厌氧菌 一 葡萄球菌属 化脓性细菌中最常见的G 球菌 呈葡萄串状人及动物的皮肤与腔道均存在 多数不致病 除金黄色葡萄球菌 医务人员带菌率高达70 多为耐药菌 医院内交叉感染的主要传染源组织器官化脓性炎症 食物中毒 烫伤样皮肤综合症 毒性休克综合症 化脓性腹膜炎 烫伤样皮肤综合症 金黄色葡萄球菌 1 生物学性状 形态与染色0 5 1 0um 球形或椭圆形的G 细菌 呈葡萄串状 无芽孢 无鞭毛 在脓汁或液体培养基中呈单个 成双或短链状排列 在固体培养基上呈典型排列 在青霉素作用下变为L型细菌 电镜观察L型葡萄球菌 1 生物学性状 培养与生化需氧或兼性厌氧 营养要求不高 耐盐 10 15 NaCl 菌落特征 1 3mm圆形 凸起 边缘光滑 不透明的菌落 不同菌株可产生不同的脂溶性色素 血平板上致病菌株能产生 溶血 多数菌株能分解葡萄糖 麦芽糖 蔗糖和甘露醇 产酸不产气 鉴定 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 腐生葡萄球菌 1 生物学性状 抗原结构葡萄球菌A蛋白 SPA 90 金黄色葡萄球菌细胞壁上存在 具有种属特异性的单链多肽 可与人和动物的IgG的Fc段非特异性结合 从而干扰吞噬细胞的作用 SPA与IgG复合物有促进细胞分裂 引起超敏反应 损伤血小板等活性 多糖抗原 细胞壁上含磷多聚物 具有群特异性 磷壁酸能与细胞表面的纤连蛋白结合 介导葡萄糖球菌对粘膜表面的黏附 1 生物学性状 分类 金黄色葡萄球菌 金黄色 表皮葡萄球菌 白色 腐生葡萄球菌 柠檬色 表型 凝固酶阳性菌凝固酶阴性菌 4群23型 凝固酶 噬菌体分型 I群 医院败血症流行株II群 产生表皮剥脱毒素III群 产生肠毒素 详见p59表8 1三种葡萄球菌主要性状鉴别 1 生物学性状 为无芽胞细菌中最强的 可概括为 四耐一敏感 耐干燥 在干脓汁 痰液中可存活2 3个月 耐热 在60 1h或80 30min以上仍能存活 耐药 目前对青霉素耐药以达90 以上 耐盐 可在10 15 NaCl肉汤中生长 对碱性染料敏感 1 10万龙胆紫能抑制其生长 抵抗力 2 致病性 金黄色葡萄球菌磷壁酸介导黏附 荚膜抗吞噬以及产生多种酶和毒素 故致病力极强 而表皮和腐生葡萄球菌则一般不致病 为条件致病菌致病物质 凝固酶葡萄球菌溶血素杀白细胞素肠毒素表皮剥脱毒素毒性休克综合征毒素 凝固酶 鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标 分游离型和结合型两种 使血液或血浆中的纤维蛋白沉积 保护细菌抵抗吞噬及其它杀菌物质作用 并决定了金黄色葡萄球菌引起化脓性感染时的感染特点 病灶局限 不易扩散 而且脓汁粘稠 葡萄球菌溶血素 4种溶血素 溶血素为主要致病因子 溶解红细胞 破坏白细胞 血小板及多种其它细胞杀白细胞素 破坏中性粒细胞和吞噬细胞 抗吞噬 增强病菌侵袭力 重要的毒素和酶 肠毒素 部分金葡菌产生 1 3 可引起急性胃肠炎 耐热 100 30min 引起毒素性食物中毒 呕吐 抗酸 不受胃肠液中蛋白酶影响 表皮剥脱毒素又称表皮溶解毒素 裂解细胞间桥小体 破坏细胞间连接 引起表皮与真皮脱落 烫伤样皮肤综合征毒性休克综合征 1 TSST 1 引起发热 组织损伤 休克 肾衰 皮疹等多个器官功能紊乱 毒性休克综合征 TSS 其它葡激酶 耐热核酸酶 透明质酸 脂酶 有利于细菌在机体内扩散 侵袭性疾病 主要引起化脓性炎症 常见的有 皮肤软组织的感染 疖 痈 毛囊炎 脓疱疮 甲沟炎 麦粒肿 伤口化脓 内脏器官的感染 气管 肺 脑膜 中耳 尿路感染全身感染 败血症 毒素性疾病 食物中毒 假膜性肠炎 皮肤烫伤综合征 毒性休克综合征等 2 所致疾病 痈 麦粒肿 甲沟炎 毛囊炎 烫伤样皮肤综合征假膜性肠炎 3 微生物学检查 一 标本的采集 脓汁 渗出液 血液 呕吐物 粪便 二 检查方法 直接涂片 分离培养与鉴定 快速诊断试验肠毒素检查 4 防治原则 及时处理伤口 保证饮食卫生安全 选择敏感药物治疗 耐药性 二 链球菌属 链球菌属种类繁多 致病性强弱不一 广泛分布于人粪便 鼻咽部 大多数不致病 主要引起化脓性炎症 如扁桃体炎 咽炎 新生儿败血症 细菌性心内膜炎 毒素性疾病 猩红热 以及超敏反应对人类致病的主要是A群链球菌和肺炎链球菌 肺炎链球菌 猪链球菌 1 形态染色 G 呈链状排列 无芽孢 无鞭毛 多数幼龄期有荚膜 随培养时间的延长 菌体自身产生的透明质酸使荚膜消失 营养要求高 普通培养基上生长不良 兼性厌氧 在液体培养基中混浊 管低有絮状沉淀 血平板上形成灰白色光滑型的细小菌落 分解葡萄糖 只产酸 不分解菊糖 不被胆汁溶解 肺炎链球菌 生物学性状 在血平板上可有 三种溶血 1 根据溶血现象分类 甲型溶血型链球菌 溶血 菌落周围有草绿色溶血环 亦称为草绿色链球菌 溶血环中的红细胞并未完全溶解 可能是细菌产生的H2O2使血红蛋白氧化成正铁血红蛋白的产物 此类细菌多为条件致病菌 拔牙 扁桃体摘除 龋齿 乙型溶血型链球菌 溶血 菌落周围形成完全透明的溶血环 也称为溶血性链球菌 其致病性强 常引起人类和动物的多种疾病 丙型链球菌 溶血 不产生溶血素 菌落周围无溶血环 也称为不溶血 链球菌 无致病性 主要分布于乳类或动物的粪便中 2 分类 2 根据抗原分类 根据细胞壁中的多糖抗原不同分类 现已有20个血清群 对人类致病的主要为A群 90 以上 多数呈 溶血 其它如B C D G群偶尔可感染人 同一群的链球菌因其表面抗原不同又可分为若干血清型 例如A群根据M抗原的不同分为100个型 3 抵抗力 对理化因素抵抗力弱 不耐热 60 30min 对常用消毒剂敏感 青霉素是首选 极少产生耐药性 链球菌引起的感染在临床上极为常见 一 致病物质 溶血素 能溶解红细胞 据其对氧的敏感性分为溶血素O SLO 和溶血素S SLS 前者对氧敏感 对热较稳定 抗原性强 感染后2 3周可产生抗体 ASO 后者对氧稳定 对热敏感 抗原性弱 致热外毒素 SPE 也称红疹毒素或猩红热毒素 具有致热作用和细胞毒作用 抗原性强 是人类猩红热主要致病物质 侵袭性酶 链激酶 溶解血块或阻止血浆凝固 链道酶 降解脓汁中具有高度黏稠性的DNA 透明质酸酶 利于细菌扩散 胶原酶 感染特点 感染病灶与周围界限不清 易于扩散 脓汁稀薄 菌体表面结构 脂磷壁酸 黏附 M蛋白 抗吞噬 F蛋白 结合纤连蛋白 4 致病性 一 致病因子 脂磷壁酸 LTA 黏附于细胞表面F蛋白 与上皮细胞粘连蛋白结合 利于定植和增殖 抗吞噬能力M蛋白 抗吞噬和抗杀菌作用 介导细菌的黏附 参与超敏反应 定植因子 溶血素 能溶解红细胞 破坏白细胞和血小板 又称红疹毒素或猩红热毒素 引起发烧 是人类猩红热的主要毒性物质 也可导致毒性休克综合征 致热外毒素 2 致病性 侵袭性酶 透明质酸酶 分解细胞间质的透明质酸链激酶 溶解血块或组织血浆凝固 利于扩散 急性心肌梗塞链道酶 脓液变稀薄胶原酶 溶解胶原纤维 A群链球菌 主要导致化脓性感染 约占人类链球菌感染的90 1 急性化脓性炎症 丹毒 蜂窝组织炎 淋巴 节 炎 脓皮病等2 猩红热 链球菌经咽喉黏膜侵入机体 增殖并产生致热外毒素3 感染后超敏反应性疾病 急性肾小球肾炎 上呼吸道及皮肤感染均可继发急性肾小球肾炎 风湿热 常继发于A族链球菌感染的咽炎 二 所致疾病 丹毒 蜂窝组织炎 脓皮病 猩红热 其他链球菌感染1 B群链球菌 为阴道 鼻咽部的正常菌群 分娩时感染胎儿 导致新生儿脑膜炎 肺炎 败血症 死亡率50 70 2 D群肠球菌 属于皮肤 上呼吸道 消化道 泌尿生殖道的正常菌群 可导致老年及中青年女性的泌尿生殖道感染 化脓性盆腔感染 败血症等 3 甲型溶血性链球菌 为人鼻咽 口腔 女性生殖道的正常菌群 拔牙时 入血可导致亚急性心内膜炎 败血症等 变异链球菌与龋齿有关 龋齿 三 肺炎链球菌 寄生于正常人的鼻咽腔中 40 70 的正常人鼻咽部携带有此菌 一般不致病 当机体免疫力下降时才致病 是细菌性肺炎的主要病原体 主要引起大叶性肺炎 1 形态染色 G 球菌 呈矛头状 排列时钝端相对 尖端相背 故又称肺炎双球菌 在脓汁 痰液标本中有时呈单个或短链排列 液体培养基中呈链状 在人体内可形成荚膜 人工传代后消失 2 培养与生化血平板上形成灰白色细小 半透明的菌落 呈 溶血 与甲型溶血性链球菌相似 若孵育时间 48h 产生自溶酶 菌体溶解 菌落中央下陷呈脐状 在血清肉汤中培养早期呈混浊生长 稍久因自溶而逐渐澄清 分解菊糖 胆汁溶菌试验阳性 1 生物学性状 接种小白鼠 腹腔 肺炎链球菌 24h内死亡甲型溶血性链球菌 不死亡 3 抗原结构 荚膜多糖抗原具有型特异性 分为90多个血清型 其中20多个可引起疾病 M蛋白 型特异性抗原 但各型免疫原性不同 与细菌毒力无关C多糖 CRP与肺炎链球菌多糖抗原结合能激活补体 并增强吞噬细胞的吞噬功能 2 致病性 一般不致病 多形成带菌状态 感染后获得牢固的免疫 致病物质 荚膜 主要致病物质 有荚膜才能致病溶血素O 溶解红细胞 抑制吞噬脂磷壁酸 神经氨酸酶 SIgA蛋白酶所致疾病 大叶性肺炎和支气管炎 也可引起肺脓肿 败血症及脑膜炎 中耳炎等 多重耐药株增多 死亡率高 3 微生物学检查 一 标本的采集 脓汁 渗出液 脑脊液 血液 脑脊液 二 检查方法 直接涂片 分离培养与鉴定 动物试验小鼠对肺炎链球菌高度易感 提问 1 巧克力培养基 2 细菌毒素 3 溶血 4 如何区分甲型链球菌和肺炎链球菌 5 猩红热由哪个病原体造成 6 肺炎链球菌的生化培养特征7 表皮剥脱毒素 案例分析 案例分析患者 男 16岁 因 发热 腹痛 腹泻 解脓便1天 就诊 就诊前一天 患者晚餐进食卤肉后 当晚即感身体不适 头痛 发热 恶心 四肢无力 半夜有阵痛性腹痛 大便为黄色水样 量多 其后每0 5 1h排便1次 便前有剧烈腹痛 最近几次带有脓血便 便后仍想解大便 要求 从微生物学角度 应该考虑采集哪些标本进行检测 如何设计鉴定试验 试分析引起该患者腹泻的可能原因 三糖铁琼脂试验 志贺菌都能分解葡萄糖 产酸不产气 大多不发酵乳糖 不产生H2S 沙门氏菌能分解葡萄糖 不发酵乳糖 大多数产生H2S 多数产气 大肠埃希菌能分解葡萄糖产酸产气 大多数能分解乳糖 不产生H2S 对照 志贺菌 沙门氏菌 大肠埃希菌 乳糖 蔗糖 葡萄糖 10 10 1 H2S 酚红指示剂 酸性 黄色pH6 6至8 0 橙色碱性 红色 重要的致病菌包括脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌 一 脑膜炎奈瑟菌 简称脑膜炎双球菌 是流行性脑脊髓膜炎 流脑 的病原菌 人是本菌的唯一宿主 主要通过咳嗽 喷嚏等飞沫传播 流脑患者和带菌者是本病的主要传染源 一 生物学性状 1 形态染色 G 球菌 菌体呈肾形或豆形 多成双排列 凹面相对 无鞭毛 无芽孢 新分离株大多有荚膜和菌毛 奈瑟菌属 3 抗原结构荚膜多糖抗原有群特异性 分为A D X Y Z 29E W135等13个血清群 对人致病的多属于A B C群 C群致病力最强而病例极少 B群散发 我国95 属于A群 外膜蛋白抗原分为1 5类 刺激机体产生抗体 有免疫保护作用脂寡糖抗原 LOS 型特异性抗原 L1 L12血清型 A群L10型为优势株4 抵抗力弱 对热 冷 干燥等敏感 对常用消毒剂敏感 对青霉素敏感 对磺胺普遍耐药 脑膜炎奈瑟菌 油镜 G 双球菌 二 致病性1 致病物质 菌毛 荚膜和内毒素 2 所致疾病 流行性脑脊髓膜炎 流脑 致病过程 通过菌毛黏附于鼻咽部上皮细胞表面引起局部感染 出现上呼吸道症状 细菌进入血液 引起菌血症或败血症 2 3 恶寒 发热 恶心 皮肤出血性皮疹 细菌进入脑脊髓膜 引起化脓性脑脊髓膜炎 2 3 头痛 喷射状呕吐 颈项强直等 严重者导致爆发性脑膜炎 10 20 爆发性紫癜 衰竭 内毒素休克 DIC及严重的中枢神经系统症状 3 微生物学检查 一 标本的采集 脓汁 渗出液 血液 脑脊液 二 检查方法 直接涂片 离心后涂片镜检 三 免疫性特异性抗荚膜多糖抗体及抗外膜蛋白抗体是主要的保护性抗体 SIgA可阻止该菌对呼吸道的侵袭 疫苗荚膜多糖 A C二价或A C Y和W135四价混合多糖疫苗 治疗 青霉素 磺胺类等能通过血脑屏障的抗生素 一 生物学性状1 形态染色 G 双球菌 菌体呈肾形或蚕豆状 凹面相对 急性患者中多数细菌位于脓汁标本的中性粒细胞内 而在慢性患者则菌量较少 且多位于细胞外 有菌毛 有荚膜 二 淋病奈瑟菌 2 培养特征 专性需氧菌 初次分离需要5 10 的CO2 营养要求高 在巧克力培养基上生长缓慢 48小时形成圆形 光滑 无色或灰白色小菌落 血平板上不溶血 只分解葡萄糖 产酸不产气 3 生化反应 不活泼 只分解葡萄糖 不分解麦芽糖 产酸不产气4 抵抗力 弱 对冷 热 干燥 消毒剂极度敏感 1 4000硝酸银7min死亡 1 硝酸银1min死亡 一 致病因子 依靠菌毛黏附到柱状上皮细胞表面 能在吞噬细胞内寄生 抗吞噬 黏附 外膜蛋白 PI 破坏膜结构的完整性导致中性粒细胞损伤 介导细菌与靶细胞的黏附 组织吞噬溶酶体的形成 利于定植PII 参与黏附PIII 阻抑抗体活性 局部形成炎症反应 内毒素 2 致病性 人是淋球菌的唯一天然宿主 几乎全是通过性传播感染 偶尔污染的内衣 被褥 毛巾等也可间接传播 也可垂直传播 感染淋球菌后 细菌借助菌毛吸附于泌尿生殖道上皮细胞上 局部大量繁殖 导致上皮细胞的溶解 破坏 引起急性化脓性炎症 男性为尿道炎 女性为急性阴道炎和尿道炎 如果治疗不及时 该菌可沿泌尿系统扩散 造成各种合并症 如男性前列腺炎 附睾炎 女性盆腔炎 输卵管炎等 严重者可导致不孕 不育 如孕妇感染淋球菌 分娩时胎儿可经产道感染 患淋菌性结膜炎 二 所致病疾病 脓漏眼 三 免疫性人无免疫力 多数可自愈 并出现特异性抗体 但再感染和慢性患者普遍存在 耐药株较多 头孢菌素类治疗1 硝酸银或其他银盐溶液处理新生婴儿 超级淋菌 超级淋菌 2013年5月 对头孢类药物有较好的抵抗性 如不及时阻住 10年内将全球泛滥 3 微生物学检查 一 标本的采集 生殖道内脓性分泌物 子宫颈口表面分泌物 二 检查方法 直接涂片镜检 分离培养与鉴定 其他化脓性细菌 1 铜绿假单胞菌俗称绿脓杆菌 广泛存在于自然界 是人体的正常菌群 G 杆菌 无芽孢 有荚膜 有鞭毛 菌毛 专性需氧 35 在4 不生在而42 可生长 普通培养基上形成大小不一 扁平湿润 边缘不齐 带亮绿色的水溶性色素菌落 血琼脂上产生透明溶血环 分解葡萄糖产酸不产气 不液化明胶抗原结构O和H抗原 O抗原含有内毒素脂多糖 原内毒素蛋白 OEP 抵抗力较强 耐多种化学消毒剂与抗生素 56 需1h杀死 致病性与免疫力 致病物质 主要为内毒素所致疾病 条件致病菌 多见于皮肤黏膜受损部位 长期化疗或免疫抑制缺陷患者 局部化脓性炎症 中耳炎 角膜炎 胃肠炎等 婴儿严重的流行性腹泻 防治OEP疫苗氨基糖苷类和酰胺类抗生素联合治疗 其他化脓性细菌 2 肠球菌属是G 中仅次于葡萄球菌的主要医院感染病原菌 常见为尿路感染 创伤或术后感染 常用青霉素和氨基糖苷类抗生素治疗 近年出现耐药株3 卡他布兰汉菌又称黏膜炎布兰汉菌 G 球菌 在痰液中呈肾形双球菌状 存在于吞噬细胞内或外 抵抗力较强 导致急性咽喉炎 支气管炎 肺炎 脑膜炎等 第三节 呼吸道感染细菌 能侵犯呼吸道 引起呼吸道局部病变或以其为侵入门户 引起呼吸道及其他组织器官病变的病原菌 经呼吸道途径感染 口 口途径 结核分枝杆菌棒状杆菌 白喉棒状杆菌嗜肺军团菌百日咳鲍特菌流感嗜血杆菌肺炎克雷伯菌 细长而略带弯曲的杆菌 生长繁殖过程中常呈分枝状 无特殊结构 不易着色 经加热 延长加热时间 提高染料浓度等措施后 一旦染色又能抵抗酸酒精脱色 故又称抗酸杆菌 acidfastbacillus 对人致病的主要有 结核分枝杆菌非结核分枝杆菌麻风分枝杆菌 一 分枝杆菌属 结核分枝杆菌简称结核杆菌 TB 是引起人类结核病的病原菌 通常是指人型和牛型 一 生物学性状 形态染色 1 组织中典型的结核杆菌为细长 直或微弯曲 在痰液中多单个存在 有时呈分枝状 菌量多时可聚集成团或束 簇 人工培养后可呈丝状 棒状 一般牛型较人型粗短 2 G 杆菌 无鞭毛 无芽孢 有荚膜 抗酸染色成红色 金胺O染色呈金黄色荧光 结核分枝杆菌 培养特征 1 专性需氧 初次分离需要5 10 CO2刺激 2 温度范围广 37 最适 最适pH值6 5 6 8 生长需要一定的湿度 3 营养要求高 需要加入卵黄 血液 马铃薯粉 氨基酸 无机盐等 罗氏培养基 4 生长缓慢 18 24小时分裂一代 3 4周形成菌落 5 在罗氏培养基中人型结核分枝杆菌的菌落为粗糙型表面干燥 颗粒状 不透明 乳白色或淡黄色 菜花状 牛型结核分枝杆菌菌落为S型 6 在液体培养基中结核杆菌生长迅速 形成菌膜 有毒株可呈索状生长 三 抵抗力 结核杆菌细胞壁含有大量脂类 对理化因素的抵抗力强 耐干燥 细菌细胞壁中含有大量的脂质 可防止水分的丢失 在干燥的痰液中可存活6 8个月 粘附于尘埃中传染性能保持8 10天 耐酸碱 4 NaOH 3 HCl 6 H2SO4中半小时仍能存活 故可用酸或碱处理标本去除杂菌 耐青霉素及低浓度的染料 龙胆紫 孔雀绿等 对酒精 过氧乙酸 湿热 紫外线敏感 60 煮1小时 日光照射2小时即可被杀灭 二 致病性 结核杆菌不产生内 外毒素 也无荚膜和侵袭性的酶 其致病主要是依靠细菌在机体细胞内外的强大的繁殖能力 以及菌体成分 如索状因子 蜡脂D 结核菌酸等 代谢产物引起的免疫活性损伤 变态反应等有关 一 致病物质1 脂质 约占细胞干重的60 脂质的含量与毒力密切相关 2 蛋白质 蛋白抗原成分极为复杂 引起自身免疫 参与黏附和侵入 对巨噬细胞内的菌体起保护作用 3 多糖 吸引中性粒细胞 诱发迟发型超敏反应 二 致病性与免疫性 结核杆菌主要通过呼吸道 消化道和受损的皮肤侵入机体 引起各组织 脏器的结核 其中以肺结核最多见 腹膜 淋巴结 皮肤 肾脏 肠 骨 关节等亦可发生 如果机体抵抗力较弱 则结核杆菌可血液 淋巴液扩散 引起全身粟粒性结核 人对结核杆菌的感染率很高 但发病率低 表明机体对其有较强的免疫力 该免疫以细胞免疫为主 初次感染时机体释放出蛋白 类脂复合物激活T细胞 形成致敏的T细胞群 当再次感染时致敏T细胞被激活 释放一系列淋巴因子 使巨噬细胞聚集于病灶周围 分泌水解酶 杀伤 消除病原菌 而机体是否已建立抗感染免疫可用结核菌素 OT 试验 1 方法 取5U注射入前臂皮内 2 3天后观察结果 若注射局部红肿硬结直径大于0 5cm阳性 大于1 5cm为强阳性 小于0 5cm为阴性 2 结果判断 阳性结果 表明机体已感染过结核杆菌或接种卡介苗 BCG 成功 对结核杆菌有免疫力 强阳性结果 机体可能有活动性结核 阴性结果 机体未感染过结核杆菌 无免疫力 3 实际应用 1 选择卡介苗接种对象及接种后效果观察 2 在未接种卡介苗人群中作结核杆菌感染流行病学研究 3 婴幼儿结核病的辅助诊断 结核菌素试验 作业 1 如何区分肺炎链球菌和甲型溶血性链球菌 2 患儿 女 6岁 因 畏寒发热6天 全身出现多处脓肿3天 就诊 该患儿从小体弱多病 入院前10天左右 脸上张一小疹子 曾用手挤压 6天前 患儿出现畏寒 发热 曾服用磺胺 氨苄西林等未见好转 入院前3天 患儿头 手臂 小腿不断有脓肿出现 体格检查 急性病容 意识不清 头皮 颈部 左上臂外侧 右背下部 左小腿均可见直径为3 4cm的包块 有的已破溃 有的有波动感 要求 设计实验方案 得出明确诊断结果 并指导临床用药 细菌感染所致疾病 总结 消化道感染细菌化脓性细菌呼吸道感染细菌 消化道感染细菌 肠杆菌科细菌幽门螺杆菌霍乱弧菌副溶血性弧菌弯曲菌属 埃希菌属志贺菌属沙门菌属克雷伯菌属变形杆菌摩根菌属枸橼酸菌属肠杆菌属沙雷菌属 在胃肠道中增殖引起以胃肠道症状为主的疾病 食物中毒 以及肠道外感染 传播途径 粪 口传播 消化道感染细菌 1 形态与培养 G 无芽孢 大多有菌毛 需氧或兼性厌氧 2 生化反应 活泼 分解多种糖类和蛋白质非致病菌能分解乳糖 而致病菌多不能分解IMViC 吲哚 甲基红 VP 枸橼酸盐 大肠杆菌 3 致病性 侵袭力 菌毛 鞭毛 黏附素 脂多糖 内毒素 志贺菌 沙门氏菌 外毒素 肠毒素 大肠杆菌 霍乱毒素志贺毒素 志贺菌 毒素 4 所致疾病 消化道感染细菌 腹泻肠外感染胃肠炎 食物中毒 沙门氏菌 幽门螺杆菌败血症胃癌幽门螺杆菌 5 微生物学检查 收集标本 直接镜检分离培养血清学诊断 案例分析 案例分析患者 男 16岁 因 发热 腹痛 腹泻 解脓便1天 就诊 就诊前一天 患者晚餐进食卤肉后 当晚即感身体不适 头痛 发热 恶心 四肢无力 半夜有阵痛性腹痛 大便为黄色水样 量多 其后每0 5 1h排便1次 便前有剧烈腹痛 最近几次带有脓血便 便后仍想解大便 要求 从微生物学角度 应该考虑采集哪些标本进行检测 如何设计鉴定试验 试分析引起该患者腹泻的可能原因 化脓性细菌 革兰氏阳性菌 葡萄球菌属 链球菌属 肠球菌属革兰氏阴性菌 奈瑟菌属 莫拉菌属 假单胞菌属 埃希菌属 变形杆菌属 无芽孢厌氧菌 化脓性细菌 葡萄球菌 1 生物学性状 脂溶性色素 金黄色 白色 柠檬色 2 抵抗力 四耐一敏感 耐干燥 耐热 耐药 耐盐 对碱敏感 3 致病性 磷壁酸 黏附荚膜 抗吞噬 产生毒素和酶类凝固酶 有无致病性的重要标志 病灶局限性葡萄球菌溶血素 溶血肠毒素 呕吐表皮剥脱毒素 烫伤样皮肤综合征毒性休克综合征毒素 休克 4 所致疾病 化脓性细菌 葡萄球菌 侵袭性疾病 皮肤 发炎 化脓内脏 肺炎全身感染 败血症 痈 麦粒肿 甲沟炎 毛囊炎 化脓性细菌 葡萄球菌 4 所致疾病毒素性疾病 食物中毒假膜性肠炎烫伤样皮肤综合征毒性休克综合征 假膜性肠炎 烫伤样皮肤综合征 化脓性细菌 链球菌 1 生物学性状 产生透明质酸酶 血清肉汤培养易形成长链絮状沉淀 不分解菊糖 不被胆汁溶解 甲型溶血性链球菌 溶血 不完全溶血 草绿色 条件致病菌乙型溶血性链球菌 溶血 完全溶血 透明 致病性较强丙型链球菌 溶血 不溶血 无色 不致病 3 致病性 菌体胞壁 黏附 定植 抗吞噬链球菌溶血素 溶解红细胞 破坏白细胞和血小板致热外毒素 猩红热 毒性休克侵袭性酶 化脓性细菌 链球菌 透明质酸酶 易于扩散链激酶 溶解血块 阻止血浆凝固链道酶 使脓液变稀薄胶原酶 易于菌体扩散 化脓性细菌 链球菌 4 所致疾病 化脓性感染猩红热超敏反应 风湿热 急性肾小球肾炎其他疾病 菌血症 龋齿 脑膜炎和肺炎 新生儿 丹毒 猩红热 龋齿 1 生物学性状 溶血若孵育时间 48h 产生自溶酶 菌体溶解分解菊糖 胆汁溶菌试验阳性 化脓性细菌 肺炎链球菌 接种小白鼠 腹腔 肺炎链球菌 24h内死亡甲型溶血性链球菌 不死亡 常用的细菌分离技术 常见肠道感染细菌的分离与鉴定 粪便或肛门拭子 直接检查 分离培养 涂片革兰氏染色油镜观察 悬滴高倍镜观察 形态 染色性 动力 肠杆菌科 特殊细菌 选择鉴别琼脂平板 适当培养基 生化反应 分离鉴定 实验一 食品的细菌学检测 一 目的和要求 1 掌握食品微生物检验中细菌总数检测的基本操作技术 2 熟悉不同食品中细菌的分离和鉴定方法 3 了解菌落总数测定的意义 二 实验材料 饮料 乳饮料 可乐 牛奶 酸奶食物 凉菜类 卤菜 冰激凌 罐头水源 自来水 生活用水 河道水 待检食品 直接镜检 分离培养 样品预处理 涂布琼脂平板 37 培养 菌落计数 样品预处理 低速离心去除残渣 离心富集菌落 直接涂布平板 选择鉴别琼脂平板 EMB平板 中国蓝琼脂平板 SS琼脂平板 选择鉴别琼脂平板 脓汁 痰液 肚灶分泌物 直接涂片镜检 革兰氏染色 镜检 形态 排列 染色性 血琼脂平板 37 18 24h 观察生长情况 菌落特征 溶血性 色素等 挑选可疑菌落 涂片染色镜检 生化反应 致病性测定 血清学鉴定 药物敏感试验 血液脑脊液穿刺液 肉汤增菌培养 培养生长后直接涂片 染色 镜检 常见化脓性球菌的分离鉴定程序 常用尿液标本细菌计数法 1 直接计数法 取中段尿液一滴于载玻片上 盖上盖玻片 相差显微镜观察 G 菌数 视野 100个 尿液中细菌数为1010 感染菌菌数 视野 10个 尿液中细菌数为108 感染菌菌数 视野 1个 尿液中细菌数为107 污染菌2 定量计数法 定量接种环或1 100稀释的尿液0 1ml 在血琼脂平板上连续划线接种 置37 培养18 24h 计数平板上的菌落3 倾注培养法 1 100稀释尿液1ml加入无菌平皿内 倒入50 的普通琼脂培养基 立即混匀 凝固后置37 培养18 24h 计数平板上的菌落 乘以100 即得每毫升尿液的细菌数 生物安全等级 生物安全等级 BSL1 P1 安全一级 轻度传染病 肺炎球菌 沙门氏菌属进行试验研究用的物质都是已知的 所有特性都已清楚并且已证明不会导致疾病的多种微生物物质