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文档简介

医院污水监测方法细菌总数及粪大肠菌群的测定1. 采样时间在消毒后1小时，排放前进行采样2. 采样方法1） 水样瓶采集前必须进行灭菌，并需保证在装运、保持过程中不受污染2） 在采集水样时，先将出水口消毒，然后将水龙头完全打开，放水5-10min,以排除管道内的贮水后再采水样。3） 如果是经加氯处理的污水，应按每500ml加1.5%硫代硫酸钠2ml中和余氯，终止余氯的杀菌作用。4） 所才的水量为采样瓶容量的80%左右，以便在检验时可以充分摇动水样。5） 水样从采集到检验一般不超过2h,如放冰箱保存，也应不超过4h.3. 细菌总数的测定： 细菌总数是指1ml水样在营养琼脂培养基中，于37培养48h后，所生长的细菌菌落数。操作方法：1） 无菌操作吸取10ml充分混匀的水样注入盛有90mln灭菌蒸馏水的玻璃瓶中，混匀成1:10稀释液。2） 吸取1:10稀释液1ml注入盛有9ml灭菌水的试管中，混匀成1:100稀释液。3） 用涂抹法或倾注法接种平皿。4） 置37培养48h后计数菌落数，报告1ml水样的细菌总数。4. 粪大肠菌群的检验方法采用发酵法。步骤：初发酵试验平板分离复发酵试验 初发酵试验1） 将水样作1:10及1:100稀释2） 水样的接种1:100稀释水样(相当于原水样0.1ml)1ml原水样1ml以上分别注入10ml普通浓度（单料）乳糖蛋白胨液中（内有倒管）。原水样10ml注入5ml3倍浓缩（三料）乳糖蛋白胨液中（内有倒管）如水样较清洁，再取原水样10ml注入50ml3倍浓缩乳糖蛋白胨液中，上述发酵管置44，24h培养。平板分离 将产酸产气及只产酸不产气的发酵管，分别接种伊红美蓝培养基上，于37培养1824小时，挑去深紫黑色、具有金属光泽的菌落（或紫黑色，不带或略带金属光泽的菌落；淡紫红色、中心色较深的菌落），进行涂片、染色、镜检。复发酵试验挑取镜检为革兰阴性无芽孢杆菌的典型菌落13革，接种于一支单料乳糖发酵管内，44培养24h，产酸产气即证实有大肠菌群存在。结果报告根据证实有大肠菌群存在的阳性管（瓶）数查表1或表2，报告没升水样中的粪大肠菌群数。5、污水中沙门菌、志贺菌检验步骤：污水样品过滤、稀释、增菌处理：取200ml污水，用灭菌滤膜进行抽滤；用100ml二倍浓度SF（亚硒酸盐增菌液）把滤膜上截留的杂质洗脱倒灭菌三角烧瓶内，充分摇匀，置于37培养2448h；挑选可疑菌落接种于双糖37培养1824小时。鉴定：生化、血清学试验，检验结果报告一定体积样品中存在或不存在沙门三、报告填写编号： 格式：ZG-XJ-JL细菌总数检测报告样品名称：检测日期： 生产日期：稀释度101001000菌落计数（CFU）3503302802603238平均数（CFU）结果（CFU）检测人：审核人：编号： 格式：ZG-XJ-JL大肠杆
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