CN101987094A门冬氨酸鸟氨酸注射液及其制备方法

CN101987094A门冬氨酸鸟氨酸注射液及其制备方法 (10)申请公布号101987094A (43)申请公布日xx.03.23101987094A*101987094A* (21)申请号xx10056112.8 (22)申请日xx.08.07A61K31/198(xx.01)A61K9/08(xx.01)A61K47/04(xx.01)A61K47/12(xx.01)A61P25/00(xx.01)A61P1/16(xx.01) (71)申请人上海秀新臣邦医药科技有限公司地址xx03上海市浦东新区松涛路563号B座213 (72)发明人沈莹刘晓帆杜狄峥 (54)发明名称门冬氨酸鸟氨酸注射液及其制备方法 (57)摘要本发明涉及一种门冬氨酸鸟氨酸注射液及其制备方法，所述注射液包含门冬氨酸鸟氨酸、注射用水和酸碱调节剂，其pH值为5.26.0，注射液的浓度为0.011g/ml。 所述的门冬氨酸鸟氨酸用注射用水溶解、用酸碱调节剂调节pH值，经活性炭脱色、定容、分装和灭菌后制得。 所述注射液用于治疗肝性脑病。 本发明提供的注射液具有杂质含量少、质量易于控制、临床应用更安全等特点。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请权利要求书1页说明书5页附图5页101987094A1/1页21.一种门冬氨酸鸟氨酸注射液，包含门冬氨酸鸟氨酸、注射用水和酸碱调节剂，其特征在于所述注射液的pH值为5.26.0。 2.根据权利要求1所述的注射液，其特征在于所述pH值为5.25.95。 3.根据权利要求2所述的注射液，其特征在于所述pH值为5.55.75。 4.根据权利要求3所述的注射液，其特征在于所述pH值为5.5或5.75。 5.一种制备权利要求1所述的门冬氨酸鸟氨酸注射液的方法，包括以下步骤1)门冬氨酸鸟氨酸用注射用水溶解，用酸碱调节剂调节pH为5.26.0，制得门冬氨酸鸟氨酸溶液；2)步骤1)的溶液经活性炭脱色、定容、分装、灭菌，制得门冬氨酸鸟氨酸注射液。 6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于步骤1)所述酸碱调节剂选自盐酸、硫酸、醋酸、磷酸二氢钾、磷酸二氢钠、柠檬酸、琥珀酸、氨水、氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠或碳酸氢钾。 7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于步骤1)所述酸碱调节剂为醋酸或氨水。 8.一种如权利要求1所述的门冬氨酸鸟氨酸注射液的用途，其特征是用于制备治疗肝性脑病的药物。 9.根据权利要求1-4中任意一项所述的门冬氨酸鸟氨酸注射液，其特征在于所述注射液中门冬氨酸鸟氨酸的含量为0.01g1g/mL。 10.根据权利要求9所述的门冬氨酸鸟氨酸注射液，其特征在于其中门冬氨酸鸟氨酸的含量为0.5g/mL或0.1g/mL。 权利要求书101987094A1/5页3门冬氨酸鸟氨酸注射液及其制备方法技术领域0001本发明属于医药领域，涉及一种药物制剂及其制备方法，具体涉及一种门冬氨酸鸟氨酸注射液及其制备方法。 背景技术0002门冬氨酸鸟氨酸最先于20世纪70年代在德国用于临床，1991年收载德国药典，并被美国FDA批准用于治疗肝性脑病。 门冬氨酸鸟氨酸注射液是我国首个用于临床的具有护肝、解毒、能量三效合一的新药，其主要治疗成分是门冬氨酸和鸟氨酸，临床应用于急、慢性肝病的治疗，包括肝硬化、脂肪肝及肝炎所引起的血氨升高，对肝性脑病尤其有效。 目前常用的剂型有粉针剂、颗粒剂、注射液。 颗粒剂特别适用于早期的意识失调或神经系统并发症。 注射液则特别适用于因肝脏疾患引起的中枢神经系统症状的解除及肝昏迷的抢救，且作用直接，起效显著。 粉针剂制备工艺复杂，成本高，且对医务人员的使用技能要求较高。 0003在国外，门冬氨酸鸟氨酸注射液的主要生产厂家有德国麦氏公司(Merz PharmaceuticalsGmbH)和印度Win-Medicare公司。 而在国内，仅德国麦氏公司进口注册门冬氨酸鸟氨酸注射液，其商品名为雅博司TM。 对雅博司TM注射液进行研究分析，其pH值为6.57.0，重要的是该注射液存在一个重要的杂质，该单一杂质的含量高于1，因此杂质含量高使得注射液质量不易控制，同时高含量的杂质会增大药物不良反应的风险，降低了用药的安全性。 发明内容0004本发明所要解决的技术问题是由于现有注射液的主杂质含量高、杂质不明确等因素导致制剂质量不易控制，增大了患者用药时产生不良反应的风险，为此本发明提供了一种门冬氨酸鸟氨酸注射液。 所述注射液含杂质含量低、质量易于控制以及安全性更高。 通过本发明人创造性的劳动，明确了现有技术中主要杂质的具体结构，并在具体实施例中给出制备该主要杂质的一种方法。 本发明还提供了一种前述门冬氨酸鸟氨酸注射液的制备方法。 0005本发明提供的技术方案是0006一种门冬氨酸鸟氨酸注射液，包含门冬氨酸鸟氨酸、注射用水和酸碱调节剂，其特征在于所述注射液的pH值为5.26.0，优选为5.25.95，更优选5.55.75。 0007经本发明人研究发现，门冬氨酸鸟氨酸的水溶液在高温或碱性条件下不稳定。 进一步的研究发现，鸟氨酸在溶液状态下，易形成内酰胺结构，在不同的pH条件下，内酰胺结构产物的含量是不同的。 鸟氨酸内酰胺结构式如下所示0008说明书101987094A2/5页40009经过发明人大量的实验，发现门冬氨酸鸟氨酸注射液的主要杂质为鸟氨酸的内酰胺结构产物，并且在pH越偏碱性的条件下，鸟氨酸的内酰胺结构产物含量越高。 本发明所述的门冬氨酸鸟氨酸注射液的主杂质为鸟氨酸的内酰胺结构产物。 根据该主杂质的理化性质，对门冬氨酸鸟氨酸注射液在不同pH条件下含量、有关物质进行试验，发明人惊喜地发现，pH值为5.26.0的条件下，注射液的杂质含量小、注射液的质量好。 0010在不同pH值下，对门冬氨酸鸟氨酸注射液进行了影响因素考察，选取pH为5. 2、5. 5、5. 75、6. 0、6. 5、7. 0、7.5等7种条件，处方的其他组份和制备工艺均相同，分别经终端灭菌后，在40、60两个温度条件下放置5天、10天，对注射液做有关物质分析，上述主杂质的含量结果如下表所述00110012以上结果表明当注射液pH值小于5.2时，有不溶物析出；同一温度下，pH值越偏碱性，注射液的主杂质含量越高；同一pH值下，温度越高，注射液的主杂质含量越高。 pH大于6.0相比6.0以下，两种温度下注射液的主杂质含量都有明显地增加。 0013本发明将门冬氨酸鸟氨酸注射液的pH值控制在5.26.0，更易于控制注射液中的主杂质。 0014本发明提供的注射液与市售进口产品雅博司TM注射液(批号708081，生产日期xx.08)进行比较，结果下表所示00150016其结果是本发明提供的注射液的主杂质含量大大低于已经上市的产品。 0017本发明提供的门冬氨酸鸟氨酸注射液，可以根据不同的临床用药要求，配制成不同浓度的注射液，注射液中门冬氨酸鸟氨酸含量的范围为0.01g1g/mL，优选0.5g/mL或0.1g/mL。 0018本发明还提供了一种门冬氨酸鸟氨酸注射液的制备方法，包括以下步骤00191)门冬氨酸鸟氨酸用无菌注射用水溶解，用酸碱调节剂调节pH为5.26.0，制得门冬氨酸鸟氨酸溶液；00202)步骤1)的溶液经活性炭脱色、定容、分装、灭菌，制得门冬氨酸鸟氨酸注射液。 0021所述酸碱调节剂包括酸类调节剂和碱类调节剂，酸类调节剂选自盐酸、硫酸、醋酸、磷酸二氢钾、磷酸二氢钠、琥珀酸或柠檬酸，优选盐酸或醋酸，更优选醋酸；碱类调节剂选自氨水、氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠或碳酸氢钾，优选氨水或氢氧化说明书101987094A3/5页5钠，更优选氨水。 0022本发明提供的门冬氨酸鸟氨酸注射液可用于治疗肝性脑病。 附图说明0023图1为实施例1主杂质醋酸盐的HPLC分析图。 0024图2为实施例2门冬氨酸鸟氨酸注射液的HPLC分析图。 0025图3为实施例3门冬氨酸鸟氨酸注射液的HPLC分析图。 0026图4为实施例4门冬氨酸鸟氨酸注射液的HPLC分析图。 0027图5为主杂质醋酸盐的质谱图。 0028图6为主杂质醋酸盐的红外光谱图。 0029图7为主杂质醋酸盐的氢核磁共振谱图。 具体实施方式0030下面结合实施例对本发明作进一步说明，可使本领域专业技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。 0031测定门冬氨酸鸟氨酸注射液的有关物质的高效液相色谱条件0032色谱柱氨基键合硅胶色谱柱4.6mm250mm，5m；0033流动相乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾(5050v/v)；0034流速1.0mL/min；0035柱温25；0036检测波长200nm；0037进样量20L；0038有关物质计算方法有关物质的其他杂质采用自身对照法，主杂质采用外标法。 0039制备1对照品溶液的配制0040取门冬氨酸鸟氨酸注射液适量，加水稀释10倍后，用流动相稀释成每1mL中约含5mg的溶液或直接用流动相稀释成每1mL中约含5mg的溶液。 对照品溶液将上述溶液稀释100倍进行配制。 0041制备2主杂质对照品溶液的配制0042取主杂质对照品适量，加流动相稀释成每1mL中约含2mg的溶液(以内酰胺计)，作为主杂质对照储备液，使用时根据样品中杂质含量配制杂质对照品溶液(主杂质含量在定量限至0.005范围内，将储备液稀释成每1mL含0.1g的主杂质对照溶液；在0.0025至0.05范围内，将储备液稀释成每1mL含1g的主杂质对照溶液；高于0.05，将储备液稀释成每1mL含20g的主杂质对照溶液)。 0043实施例1主杂质醋酸盐的制备0044反应式如下0045说明书101987094A4/5页60046取鸟氨酸醋酸盐适量，加浓氨水使完全溶解。 100下回流25小时，每隔4小时补加适量浓氨水，HPLC跟踪监测反应，至HPLC中鸟氨酸峰面积归一化法计算约占0.5。 100下，加入0.1的活性炭，过滤。 滤液旋转蒸发干，加甲醇，冷至0，过滤即得主杂质醋酸盐，类白色粉末。 经HPLC分析纯度大于99.0，如图1所示，t R(保留时间)7.643为主杂质峰。 主杂质醋酸盐的化学特征如下0047分子式C7H14N2O3，熔点127.9130.9。 IR(max cm-1)3411.5，1675.9，1558.2，1407.8。 1HNMR(DMSO-d6，400MHz)7.49(1H，brs，NH)，5.53(3H，brs，NH3)，3.16(1H，m，CH-NH3)，3.08(2H，m，CH2-NH)，1.4-2.0(4H，m，CH2-CH2)，1.76(3H，s，CH3)。 MS m/z(int)115M+H-CH3COOH (7)，69 (100)，56 (56)。 以上谱图见图5-7。 0048实施例20049按以下处方制备门冬氨酸鸟氨酸注射液0050门冬氨酸鸟氨酸500.6g0051注射用水600mL00521醋酸溶液适量0053注射用水定容至1000mL00540055溶液灭菌后分装，pH5.75100瓶0056取门冬氨酸鸟氨酸500.6g，加入600mL注射用水，搅拌使溶解，加适量的1醋酸溶液调节酸碱度为pH5.7，加入0.1针用活性炭，40水浴加热45分钟，趁热0.45m滤膜过滤，再用少量注射用水多次荡洗活性炭滤饼，合并收集的滤液。 将滤液定容至1000mL刻度，精确量取10mL灌入10mL的安瓿瓶，封口，检验，查漏，115灭菌30分钟。 取出，自然冷却至室温，制得门冬氨酸鸟氨酸注射液。 0057产品检测pH5.75；HPLC分析计算后，主杂质含量为0.10，有关物质含量为0.21。 如图2所示，其中t R7.276为主杂质峰，t R16.496为门冬氨酸峰，t R26.600为鸟氨酸峰。 0058实施例30059按以下处方制备门冬氨酸鸟氨酸注射液0060门冬氨酸鸟氨酸100.2g0061注射用水600mL00621醋酸溶液适量0063注射用水定容至1000mL00640065溶液灭菌后分装，pH5.50100瓶0066取门冬氨酸鸟氨酸100.2g，加入600mL注射用水，搅拌使溶解，加适量的1醋酸溶液调节酸碱度为pH5.4，加入0.05针用活性炭，60水浴加热30分钟，趁热0.45m滤膜过滤，再用少量注射用水多次荡洗活性炭滤饼，合并收集的滤液。 将滤液定容至1000mL刻度，精确量取10mL灌入10mL的安瓿瓶，封口，检验，查漏，121灭菌15分钟。 取出，自然冷却至室温，制得门冬氨酸鸟氨酸注射液。 0067产品检测pH5.50；HPLC分析计算后，主杂质含量为0.07，有关物质含量为说明书101987094A5/5页70.15如图3所示，其中t R7.270为主杂质峰，t R16.488为门冬氨酸峰，t R26.588为鸟氨酸峰。 0068实施例40069按以下处方制备门冬氨酸鸟氨酸注射液0070门冬氨酸鸟氨酸50.8g0071注射用水600mL00721醋酸溶液适量0073注射用水定容至1000mL00740075溶液灭菌后分装，pH5.95