CN103655723A一种促进提取连翘中活性成分的方法

CN103655723A一种促进提取连翘中活性成分的方法 (10)申请公布号103655723A (43)申请公布日xx.03.26103655723A (21)申请号xx10349438.1 (22)申请日xx.09.20A61K36/634(xx.01)A61P29/00(xx.01)A61P31/04(xx.01)A61P31/12(xx.01)A61P1/16(xx.01)A61P37/04(xx.01) (71)申请人江南大学地址214122江苏省无锡市蠡湖大道1800号江南大学化学与材料工程学院 (72)发明人宋健 (54)发明名称一种促进提取连翘中活性成分的方法 (57)摘要连翘中的活性成分可用溶剂提取后，再进一步进行加工。 连翘的提取一般采用水或乙醇作为溶剂，本发明进一步用超声波作用，提高了各主要成分的得率。 (51)Int.Cl.权利要求书1页说明书3页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请权利要求书1页说明书3页 (10)申请公布号103655723A103655723A1/1页21.选择合适的溶剂提取连翘中的活性成分。 2.同时用超声波发生器施加20kHz超声波以提高连翘中的活性成分的得率。 权利要求书103655723A21/3页3一种促进提取连翘中活性成分的方法技术领域0001连翘中的活性成分可用溶剂提取后，再进一步进行加工。 连翘的提取一般采用水或乙醇作为溶剂，本发明进一步用超声波作用，提高了各主要成分的得率。 背景技术0002连翘是临床常用传统清热解毒中药，其性寒，味辛苦，无毒，入肺、心、胆经，具有清热解毒，散结消肿，疏散风热的功效。 医用始载于神农本草经。 医学衷中参西录日“连翘，具升浮宣散之力，流通气血能透肌解表，清热逐风，又为治风热要药。 常为历代医家治疗外感风热之良药。 有抗菌、抗病毒、解热抗炎和抗肝损伤等多种药理作用。 冯淑怡等通过实验证实连翘酯苷能延缓酵母发热大鼠的体温升高，促进内毒素所致发热家兔的体温下降，并可显著降低细菌感染模型动物的死亡数和死亡率，提示连翘酯苷有明显的抗感染和解热作用。 杨天鸣等实验显示连翘对金黄色葡萄球菌、伤寒杆菌有明显的抑制作用，对副伤寒杆菌、福氏痢疾杆菌、宋内氏痢疾杆菌均有一定的抑制作用；体内抑菌试验显示，连翘可显著降低由伤寒杆菌引起的小鼠急性感染的死亡率，这一作用随着剂量的增加而增强。 0003连翘有如下作用00041.连翘与脓毒症0005脓毒症，即脓毒血症，是一种临床发病率较高、病死率高，且治疗比较困难的危重疾病。 其定义为由感染或有高度可疑感染灶引起的全身炎症反应综合征(SIRS)。 其病原体包括细菌、真菌、寄生虫及病毒等。 脓毒症的发病机制，从微生物的角度为化脓性病原菌(如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌)侵入血流并在其中大量的繁殖，并随血流向全身扩散，在组织器官引起的新的多发性化脓性病灶造成脓毒症发生；从分子生物学的观点来看是毒素与细胞因子的相互作用。 相关的临床实践证明，革兰氏阳性菌感染引发内毒素的释放及肠源性内毒素移位进入血循环中，通过诱导体内的炎性递质如肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素(IL)、一氧化氮(NO)等的产生发挥毒性作用，是脓毒症发生的主要原因。 Hotchkis等研究发现小鼠CLP模型中，肠系膜、肺和骨骼肌处淋巴细胞出现细胞凋亡；脓毒血症存应，有明显的T淋巴细胞免疫血症的发生与免疫功能紊乱、和免疫抑制状态密切相关。 相关实验证明连翘挥发油蒎烯具有抗大肠杆菌0157作用究显示连翘对耐甲氧西林金黄及甲氧西林敏感金黄色葡萄球的抑制作用。 段飞等的实验研究显示连翘苷具有一定的抑菌能力，且抑菌强度与提取液浓度呈正相关，无论是药材粗提物还是连翘苷单体对大肠杆菌的抑制效果都明显强于对金黄色葡萄球菌的抑制效果。 00062.连翘与内毒素0007内毒素常是伴发、加重及影响临床危重疾病的重要因素。 中医常把内毒素看作“热毒”“邪毒”的物质基础。 研究表明，清热解毒中药用于治疗“热毒”“邪毒”有着良好的临床效果。 中药可直接通过提高机体的免疫力而间接抑制或杀灭病原菌，某些清热解毒中药则可以破坏内毒素结构或拮抗内毒素诱生的机体活性物质造成损伤。 有研究表明，连翘体外抗内毒素效力较高，且这种作用是对内毒素的直接摧毁，而不是对其活性的暂时抑制。 胡说明书103655723A32/3页4竟一等研究显示连翘果壳水煎剂、大孔树脂吸附物及连翘多酚具有显著的抗炎、解热和中和内毒素作用。 00083.连翘与免疫0009连翘对机体有免疫调节作用。 尹乐乐等试验显示连翘可延长小鼠盲肠结扎穿孔(CLP)诱导脓毒血症小鼠的存活率。 连翘药物治疗组小鼠脾脏及胸腺指数明显增加，说明连翘对CLP小鼠胸腺和脾脏有保护作用。 Meakins等发现脓毒血症患者迟发超敏反应丧失，循环T淋巴细胞数目降低，而且存活的T淋巴细胞也处于无反应状态。 刘静实验显示，连翘苷可降低小鼠的超敏反应，能显著增强小鼠单核巨噬细胞的吞噬功能，增强动物机体非特异性免疫功能。 张明远等研究发现，连翘能增加荷瘤机体的TNF含量，诱导T细胞等的增加，并降低IL一8水平，从而发挥抗肿瘤、调节机体免疫力的作用。 00104.连翘与炎症0011炎症是机体的一种防御反应。 炎症发生时组织受一系列防御机制保护，其中大部分是由粒细胞和可溶性免疫复合物炎性递质和细胞因子引起的非特异性免疫反应。 郭际等的实验研究显示，连翘挥发油具有确实的抗炎作用，有明显的抑制二甲苯所致小鼠的耳廓肿胀及抑制大鼠角叉菜胶性足肿胀、抑制大鼠棉球肉芽形成及大鼠胸膜炎模型、大鼠急性肺损伤模型的作用，并可明显对抗小鼠腹腔毛细血管通透性的亢进。 其抗炎机理与抑制炎症介质PGE和组胺、五羟胺的释放有关。 尹乐乐等的实验研究表明，连翘对ConA刺激诱导的T细胞活化的早期、中期和晚期分别表达的CD 69、CD25和CD71的表达有降低作用，并对其体外增殖有抑制作用。 相关试验表明，连翘还可促进小鼠腹腔巨噬细胞的体外吞噬。 此外，连翘还可以促进炎性屏障的形成，促进对小鼠炎症细胞的吞噬作用。 脓毒症是一种复杂的疾病过程，内毒素刺激、炎症因子作用，以及机体的自身免疫反应等方面相互关联作用，临床治疗相对困难。 中药连翘用于治疗脓毒症机理从调和内毒素、调节机体的免疫功能、抗炎及调节炎症因子等方面有着确实的作用，其进一步作用机制尚待研究。 0012连翘中的活性成分可用溶剂提取后，再进一步进行加工。 发明内容0013连翘的提取一般采用水或乙醇作为溶剂，本发明进一步用超声波作用，提高了各主要成分的得率。 具体实施方式0014实施例一0015对照组取连翘1g，用50mL乙醇回流提取1hr，提取液分别测定总黄酮、连翘苷含量。 0016超声波组取连翘1g，用50mL乙醇回流提取1hr，同时用超声波发生器施加20kHz超声波，提取液分别测定总黄酮、连翘苷含量。 0017结果0018说明书103655723A43/3页5组别总黄酮()连翘苷()对照组2.761.27超声波组3.451.860019超声波组取得了更好的提取效果。 0020实施例二0021对照组取连翘1g，用50mL水回流提取1hr，提取液分别测定总黄酮、连翘苷含量。 0022超声波组取连翘1g，用50mL水回流提取1hr，同时用超声波发生器施加20kHz超声波，提取液分别测定总黄酮、连翘苷含量。 0023结果0024组别总黄酮()连翘苷()对照组2.571.34超声波组3.181.810025超声波组取得了更好的提取效果。 0026实施例三0027对照组取连翘1g，用50mL氯仿回流提取1hr，提取液分别测定