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高三生物一轮复习辅导与测试 选修一生物技术实践 第四章生物化学与分子生物学技术实践 首页 尾页 上页 下页 1 蛋白质的分离与提纯2 从生物材料中提取某些特定的成分3 pcr技术的基本操作和应用 首页 尾页 上页 下页 考点突破 高考演练 微课助学 课时训练 考点一dna和蛋白质技术 1 dna的粗提取与鉴定 单向 溶解度 0 14mol l 酒精 dna 释放dna 吸水涨破 首页 尾页 上页 下页 考点突破 高考演练 微课助学 课时训练 考点一dna和蛋白质技术 1 dna的粗提取与鉴定 蓝色 nacl dna 冷酒精 二苯胺 首页 尾页 上页 下页 考点突破 高考演练 微课助学 课时训练 考点一dna和蛋白质技术 2 多聚酶链式反应扩增dna片段 dna模板 引物 dna聚合酶 三十 变性 延伸 指数 首页 尾页 上页 下页 考点突破 高考演练 微课助学 课时训练 考点一dna和蛋白质技术 3 血红蛋白的提取和分离实验 1 常用的分离方法 法 凝胶电泳法等 2 基本原理 凝胶色谱法 也称 是根据分离蛋白质的有效方法 电泳 利用待分离样品中各种分子的差异以及分子本身的大小 的不同 使带电分子产生不同的迁移速度 凝胶色谱 分配色谱法 相对分子质量的大小 带电性质 形态 首页 尾页 上页 下页 考点突破 高考演练 微课助学 课时训练 考点一dna和蛋白质技术 较小 血红蛋白 透析 首页 尾页 上页 下页 考点突破 高考演练 微课助学 课时训练 考点一dna和蛋白质技术 凝胶色谱 首页 尾页 上页 下页 考点突破 高考演练 微课助学 课时训练 考点一dna和蛋白质技术 1 2009 高考江苏卷 提取细胞中的dna和蛋白质都需用蒸馏水涨破细胞 2 2011 江苏卷改编 用菜花替代鸡血作为实验材料进行 dna的粗提取与鉴定 其实验操作步骤相同 3 2009 高考江苏卷 用不同浓度nacl溶液反复溶解与析出dna可去除蛋白质 4 2009 高考江苏卷 蛋白质提取和分离过程中进行透析可去除溶液中的dna 5 2011 高考江苏卷 利用鸡血进行 dna的粗提取与鉴定 的实验中 将丝状物溶解在2mol lnacl溶液中 加入二苯胺试剂即呈蓝色 6 2010 高考山东卷 若需克隆脂肪酶基因 可应用耐热dna聚合酶催化的pcr技术 首页 尾页 上页 下页 考点突破 高考演练 微课助学 课时训练 考点一dna和蛋白质技术 7 2009 高考广东卷 pcr反应包括多次循环 每次循环包括三步 变性 复性和延伸 8 2014 唐山一模 pcr中加入的引物有两种 其作用是使dna聚合酶能够从引物的5 端开始连接脱氧核苷酸 9 2014 临沂一模 dna变性后 当温度缓慢降低后 两条彼此分离的dna链又会重新结合成双链 称为复性 pcr技术利用了dna的热变性原理 通过控制温度来控制双链的解聚与结合 10 2011 高考广东卷 猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核 提纯时杂蛋白较少 洗涤红细胞时 使用生理盐水可防止红细胞破裂 首页 尾页 上页 下页 考点突破 高考演练 微课助学 课时训练 考点一dna和蛋白质技术 11 2011 高考广东卷 血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测 在凝胶色谱法分离过程中 血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢 12 2009 高考江苏卷 蛋白质和dna都可以用电泳的方法进行分离纯化 13 2011 高考山东卷 电泳法纯化蛋白质时 若分离带电荷相同的蛋白质 则其相对分子质量越大 电泳速度越快 14 2010 高考江苏卷 利用透析法纯化蛋白酶时 应以蒸馏水作为透析液 首页 尾页 上页 下页 考点突破 高考演练 微课助学 课时训练 考点一dna和蛋白质技术 1 dna与蛋白质在不同nacl溶液中溶解度不同 首页 尾页 上页 下页 考点突破 高考演练 微课助学 课时训练 考点一dna和蛋白质技术 2 比较细胞内dna复制与体外dna扩增 pcr 首页 尾页 上页 下页 考点突破 高考演练 微课助学 课时训练 考点一dna和蛋白质技术 2 比较细胞内dna复制与体外dna扩增 pcr 首页 尾页 上页 下页 考点突破 高考演练 微课助学 课时训练 考点一dna和蛋白质技术 2 比较细胞内dna复制与体外dna扩增 pcr 首页 尾页 上页 下页 考点突破 高考演练 微课助学 课时训练 考点一dna和蛋白质技术 3 分离dna pcr技术 分离蛋白质三者比较 首页 尾页 上页 下页 考点突破 高考演练 微课助学 课时训练 考点一dna和蛋白质技术 3 分离dna pcr技术 分离蛋白质三者比较 首页 尾页 上页 下页 考点突破 高考演练 微课助学 课时训练 考点一dna和蛋白质技术 1 下列关于dna的粗提取实验和血红蛋白的提取实验 叙述正确的是 a 前者选择鸡血细胞作为材料较好 后者选择哺乳动物成熟的红细胞作为实验材料较好b 样品预处理时 前者静置1天处理除去上清液 后者需要加入清水 反复低速短时间离心洗涤 至上清液无黄色c 在dna粗提取实验中 往2mol l氯化钠溶液中加入蒸馏水析出dna时 应该缓慢加入 直到出现黏稠物为止d 洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖 无机盐等 解析 鸡血细胞有细胞核 适于提取dna 哺乳动物成熟红细胞无细胞核和众多细胞器 适于提取血红蛋白 提取血红蛋白的实验中 洗涤红细胞时 不能加清水 应该加入生理盐水 否则细胞提早释放出血红蛋白与杂质混合 加大提取难度 dna初次析出时 加清水至黏稠物不再增加为止 洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白 以利于血红蛋白的分离和纯化 a 首页 尾页 上页 下页 考点突破 高考演练 微课助学 课时训练 考点一dna和蛋白质技术 2 凝胶色谱技术是一种快速而又简单的分离技术 对高分子物质有很好的分离效果 目前已经被多个领域广泛应用 不但应用于科学实验研究 而且已经大规模地用于工业生产 据图回答问题 1 a b均为蛋白质分子 其中先从层析柱中洗脱出来的是 原因是 2 自己制作凝胶色谱柱时 在色谱柱底部d位置相当于多孔板的结构可由 替代 首页 尾页 上页 下页 考点突破 高考演练 微课助学 课时训练 考点一dna和蛋白质技术 3 装填凝胶色谱柱时 色谱柱内不能有气泡存在 原因是 4 洗脱用的液体应尽量与浸泡凝胶所用的液体 填 相同 或 不同 洗脱时 对洗脱液的流速要求是 5 若选用sephadexg 75 则 g 表示 75表示 首页 尾页 上页 下页 考点突破 高考演练 微课助学 课时训练 考点一dna和蛋白质技术 解析 1 用凝胶色谱技术分离各种不同蛋白质时 大分子物质由于直径较大 只能分布于颗粒之间 所以向下移动的速度较快 小分子物质除了可在凝胶颗粒间隙中扩散外 还可以进入凝胶颗粒的微孔 在向下移动的过程中 从一个凝胶颗粒内扩散到颗粒间隙后再进入另一凝胶颗粒内 如此不断地进入和扩散 小分子物质的下移速度落后于大分子物质 所以大分子物质先洗脱出来 2 自己制作凝胶色谱柱时 在色谱柱底部d位置相当于多孔板的结构可由尼龙网和尼龙纱替代 首页 尾页 上页 下页 考点突破 高考演练 微课助学 课时训练 考点一dna和蛋白质技术 解析 3 在色谱柱中装填凝胶的时候要尽量紧密 以降低凝胶颗粒之间的空隙 一是在装填凝胶柱时 不得有气泡存在 因为气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序 降低分离效果 二是凝胶色谱操作过程中 不能发生洗脱液流干 露出凝胶颗粒的现象 一旦发生上述两种情况 凝胶色谱柱需要重新装填 4 洗脱液应与浸泡凝胶所用液体相同 且洗脱液流速要稳定 以免干扰洗脱结果 首页 尾页 上页 下页 考点突破 高考演练 微课助学 课时训练 考点一dna和蛋白质技术 答案 1 aa相对分子质量较大 无法进入凝胶内部的通道 只能在凝胶间隙移动 路程较短 移动速度较快 2 尼龙网和尼龙纱 3 气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序 降低分离效果 4 相同保持稳定 5 凝胶的交联程度 膨胀程度及分离范围凝胶得水值 即每克凝胶膨胀时吸水7 5g 首页 尾页 上页 下页 考点突破 高考演练 微课助学 课时训练 考点二植物有效成分的提取 1 提取玫瑰精油实验 水蒸气蒸馏 首页 尾页 上页 下页 考点突破 高考演练 微课助学 课时训练 考点二植物有效成分的提取 2 提取橘皮精油的实验 1 方法 一般采用法 2 实验流程 无榨 压榨 过滤 首页 尾页 上页 下页 考点突破 高考演练 微课助学 课时训练 考点二植物有效成分的提取 3 胡萝卜素的提取 纸层析 不溶于 易溶于 萃取 石油醚 干燥 过滤 首页 尾页 上页 下页 考点突破 高考演练 微课助学 课时训练 考点二植物有效成分的提取 1 2010 高考山东卷 用于生产生物柴油的植物油不易挥发 可选用蒸馏 压榨和萃取等方法从油料作物中提取 2 2011 高考山东卷 柚皮易焦糊 宜采用压榨法提取柚皮精油 该过程得到的糊状液体可通过过滤除去其中的固体杂质 3 2012 高考山东卷 萃取加热时需安装冷凝回流装置 其目的是防止有机溶剂挥发 4 2014 青岛一模 水蒸气蒸馏法是植物芳香油提取的常用方法 其中提取柠檬芳香油常用水中蒸馏法 5 2008 高考宁夏卷 从胡萝卜中提取胡萝卜素 可用有机溶剂作为溶剂 首页 尾页 上页 下页 考点突破 高考演练 微课助学 课时训练 考点二植物有效成分的提取 6 2008 高考宁夏卷 从胡萝卡中提取胡萝卜素常用的方法是萃取法 用这种方法提取胡萝卜素的主要步骤是 粉碎 干燥 萃取 过滤 浓缩 7 2008 高考宁夏卷 在胡萝卜颗粒的加热干燥过程中 应选择较高的温度以便于充分干燥 8 2008 高考宁夏卷 提取的胡萝卜素可通过纸层析法进行鉴定 在鉴定过程中需要用标准样品对照 9 2008 高考宁夏卷 一般情况下 提取胡萝卜素时 提取效率与原料颗粒的含水量成正比 首页 尾页 上页 下页 考点突破 高考演练 微课助学 课时训练 考点二植物有效成分的提取 首页 尾页 上页 下页 考点突破 高考演练 微课助学 课时训练 考点二植物有效成分的提取 首页 尾页 上页 下页 考点突破 高考演练 微课助学 课时训练 考点二植物有效成分的提取 易误警示 不同的物质提取方法不同 不同物质的提取是根据其理化性质的不同来进行的 因此在提取物质时 应先确定该物质的理化性质 然后再选择适宜的提取方法进行提取 1 蒸馏法适用于提取玫瑰油 薄荷油等挥发性强的芳香油 水蒸气蒸馏根据原料放置的位置可以分为水中蒸馏 水上蒸馏 水气蒸馏 水中蒸馏设备简单 成本低 易操作 而水上蒸馏和水气蒸馏时间短 出油率高 2 压榨法适用于含油量高的原料 主要用于提取柑橘类精油 如橘皮油 柠檬油 甜橙油等 3 萃取法可使用于提取大多数植物芳香油 4 除去液体中固体物的常用方法是过滤 首页 尾页 上页 下页 考点突破 高考演练 微课助学 课时训练 考点二植物有效成分的提取 下列是与芳香油提取相关的问题 请回答 1 玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取 其理由是玫瑰精油具有 的性质 提取玫瑰精油时应选用 鲜 干 玫瑰花瓣作原料 2 当蒸馏瓶中的水和原料量一定时 蒸馏过程中 影响精油提取量的主要因素有蒸馏时间和 当原料量等其他条件一定时 提取量随蒸馏时间的变化趋势是 3 如果蒸馏过程中不进行冷却 则精油提取量会 原因是 4 用萃取法提取玫瑰精油时 采用的溶剂是 原理是 首页 尾页 上页 下页 考点突破 高考演练 微课助学 课时训练 考点二植物有效成分的提取 5 某植物花中精油的相对含量随花的不同生长发育时期的变化趋势如图所示 提取精油时采摘花的最合适时间为 天左右 首页 尾页 上页 下页 考点突破 高考演练 微课助学 课时训练 考点二植物有效成分的提取 6 从薄荷叶中提取薄荷油时 填 能 或 不能 采用从玫瑰花中提取玫瑰精油的方法 理由是 首页 尾页 上页 下页 考点突破 高考演练 微课助学 课时训练 考点二植物有效成分的提取 解析 1 玫瑰精油难溶于水 易溶于有机溶剂 化学性质稳定 故采用水蒸气蒸馏法和萃取法提取 应选用鲜的玫瑰花 因为干燥时玫瑰精油会挥发 2 当蒸馏瓶中的水和原料量一定时 蒸馏过程中 影响精油提取量的主要因素有蒸馏时间和蒸馏温度 当原料量等其他条件一定时 提取量随蒸馏时间的变化趋势是 一定时间内随蒸馏时间的延长而增加 一定时间后提取量不再增加 3 蒸馏时玫瑰精油随水蒸气一起蒸馏出来 如果不进行冷却 部分精油会随水蒸气挥发而流失 首页 尾页 上页 下页 考点突破 高考演练 微课助学 课时训练 考点二植物有效成分的提取 解析 4 玫瑰精油易溶于有机溶剂 因此萃取时所选用的
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