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中科院2001生化与分子一.是非题,每题1分,共25分。答“是”写“+”,答案“非”写“一”。1. 所有氨基酸中的碳原子都是一个不对称的碳原子( )2. 蛋白质的四级结构可以定义为一些特定的三级结构的肽链通过共价键形成的大分子体系的组合( )3. 根据凝胶过滤层析的原理,分子量愈小的物质,因为愈容易通过,所以最先被洗脱出来( )4. 两个或几个二级结构单元被连接多肽连接在一起,组成有特殊的几何排列的局部空间结构,这样的结构称为超二级结构,有称为模体(MOTIF)( )5. 抑制剂不与底物竞争酶结合部位,则不会表现为竞争性抑制( )6. 酶反应最适PH不仅取决于酶分子的解离情况,同时也取决于底物分子的解离情况( )7. 寡聚酶一般是指由多个相同亚基组成的酶分子( )8. 糖异生途径是由相同的一批酶催化的糖酵解途径的逆转( )9. 线粒体内膜ADP-ATP载体蛋白在促进ADP由细胞质进入完整线粒体基质的同时ATP由完整线粒体基质进入细胞质的过程是需要能量的( )10. 脂质体的直径可以小到150nm( )11. 质膜上糖蛋白的糖基都位于膜的外侧( )12. 雄性激素在机体内可变为雌性激素( )13. CoA,NAD和FAD等辅酶中都含有腺苷酸部分( )14. 黄嘌呤氧化酶的底物是黄嘌呤,也可以是次黄嘌呤( )15. RNA连接酶和DNA连接酶的催化连接反应都需要模板( )16. DNA聚合酶和RNA聚合酶的催化反应都需要引物( )17. 真核生物mRNA两端都含有3-OH.( )18. 在细菌中RNA聚合酶和核糖体蛋白质的合成由共同的调节系统( )19. 所有氨酰-tRNA合成酶的作用都是把氨基酸连接在tRNA末端核糖的3-羟基上( )20. 核小体中的核心组蛋白在细胞活动过程中都不会被化学修饰( )二.选择题(20题,每题1分,共20分)1. 绒毛膜促性激素是一种: A. 甾醇类激素 B. 脂肪酸衍生物激素 C. 含氮激素2,溴化氰(CNBr)作用于: A. 甲硫氨酰-X B. 精氨酰-X C. X-色氨酸 D. X-组氨酸3.肌球蛋白分子具有下述哪一种酶的活力: A. ATP酶 B. 蛋白质激酶 C. 蛋白水解酶4.神经生长因子(NGF)的活性分子由下列肽链组成: A. B. C. 22 5.胰岛素原是由一条连接肽通过碱性氨基酸残基连接其他二条链的C端和N端,这条连接肽称为:A. A链 B. B链 C. C肽6.米氏方程双到数作图的总轴截距所对应的动力学常数为:A. Km B. Vmax C. Km/Vmax D. Vmax/Km7.磷酸化酶激酶催化磷酸化酶的磷酸化,导致该酶:A. 由低活性形式变为高活性形式 B. 由高活性形式变为低活性形式 C. 活性不受影响8.底物引进一个基团以后,引起酶与底物结合能增加,此时酶催化反应速度增大,是由于:A. 结合能增大 B. 增加的结合能被用来降低反应活化能C. 增加的结合能被用来降低Km D. 增加的结合能被用来增大Km9.TGF受体具有下列哪一种酶的活性:A. 酪氨酸激酶 B. 酪氨酸磷酸酯酶 C. 丝氨酸/苏氨酸激酶 D. 腺苷酸环化酶10.2000年诺贝尔生理学或医学奖予下列哪一个领域的重大贡献有关: A. 结构生理学 B. 发育生理学 C. 神经生物学 D. 免疫学11.苍术钳是一种抑制剂,它的作用位点在:A.钠钾ATP酶B.线粒体ADP-ATP载体C.蛋白激酶C D.线粒体呼吸链还原辅酶Q-细胞色素c氧化还原酶12.膜固有蛋白与膜脂的相互作用主要通过:A. 离子键 B. 疏水键 C. 氢键 D. Van der Waal氏力13.生物膜的基本结构是:A. 磷脂双层两侧各附着不同蛋白质 B. 磷脂形成片层结构,蛋白质位于各个片层之间C. 蛋白质为骨架,二层林脂分别附着与蛋白质的两侧D. 磷脂双层为骨架,蛋白质附着与表面或插入磷脂双层中14.辅酶Q是: A. NADH脱氢酶的辅基B. 电子传递链的载体C. 琥珀酸脱氢酶的辅基D.脱羧酶的辅酶15.完整线粒体在状态4下的跨膜电位可达: A. 1mv B. 10mv C. 100mv D. 200mv16.基因有两条链,与mRNA序列相同(T代替U)的链叫做: A. 有义链B. 反义链C. 重链D. cDNA链17.一段寡聚合糖核苷酸TCGm1Acmm5CC,其中含有几个修饰碱基(非修饰核苷):A. 3个 B. 4 C. 5 D. 618.已知有的真核内含子能编码RNA,这类RNA是:A. 核小分子RNA(sn RNA) B. 核仁小分子RNA(sno RNA) C. 核不均一RNA(hnRNA)19.别嘌呤醇可用于治疗痛风症,因为它是:A. 鸟嘌呤脱氨酶的抑制剂,减少尿酸的生成 B. 黄嘌呤氧化酶的抑制剂,减少尿酸的生成C. 尿酸氧化酶的激活剂,加速尿酸的降解20.-鹅膏覃碱能强烈抑制:A. 细菌RNA聚合酶 B. 真核RNA聚合酶 C. 细菌DNA聚合酶 D. 真核DNA聚合酶21. 在核糖体上进行蛋白质合成,除了肽链形成本身以外的每一个步骤都与什么有关?A. ATP的水解 B. GTP的水解 C. Camp的水解 D. 烟酰胺核苷酸参与22. 基因重组就是DNA分子之间的:A. 共价连接 B. 氢键连接 C. 离子键连接23. DNA复制过程中双链的解开,主要靠什么作用:A. 引物合成酶 B. Dnase I C. 限制性内切酶 D. 拓扑异构酶24. 包括中国在内,有很多国家科学家参与的人类基因组计划,到目前为止的进展情况如何?A. 仅完成23对染色体的遗传图谱和物理图谱 B. 仅测定了7,10合22号染色体的核苷酸序列C. 测定了人基因组3X109碱基的全序列,但只是一部天书,无法知道它的全部意义D. 测定了人基因组全序列,分析了他们代表的遗传信息,已经了解大部分基因的功能25. 催化转氨作用的转氨酶所含的辅基是: A. 磷酸吡哆醛 B. 泛酸 C. 烟酰胺 D. 硫氨素三、填空题(每空一分)1. 胰岛素最初合成的单链多肽称为_然后是胰岛素的前体,称为_2. 原胶原蛋白分子的二级结构是一种三股螺旋,这是一种_结构,其中每一股又是一种特殊的_结构.3. 有一类不可逆抑制剂具有被酶激活的性质,被称为_型不可逆抑制剂,又可被称作酶的_4. 蛋白质组是指_5. 蛋白激酶A的专一活化因子是Camp,蛋白激酶C的专一活化因子是_,此外还有某类型的蛋白激酶可以由_作为专一激活因子6. 已阐明原子分辨率三维结构的膜固有蛋白有_,_等(仅写两个)7. 霍乱毒素的受体是一种_化合物8. 线粒体内膜催化氧化磷酸化合成ATP的F1F0酶的F1部分的亚基组成的结构是_9. 除了膜脂脂肪酰链的长度外,影响膜脂流动性的主要因素是_10. 左旋的Z-DNA与右旋的B-DNA相比,前者的每对核苷酸之间的轴向距离_于后者;前者的直径_于后者11. 已知二类核糖体失活蛋白(RIP)都是通过破坏核糖体大亚基RNA而使核糖体失活,这二类蛋白质分别具有_和_活性12. 5-磷酸核糖-1-焦磷酸(PRPP)除了参与嘌呤和嘧啶核苷酸生物合成外,还与_和_氨基酸代谢有关.13. 大肠杆菌的启动子序列包含有_,_及_等信息.14. 逆转录病毒含有单链RNA,感染细胞后转变成双链DNA,这种DNA必须_,才能发生病毒的复制.15. 真核RNA聚合酶I主要位于细胞_中,合成大分子核糖体RNA前体四.问答题(5X6)1. 蛋白质化学测序法的原则和程序可归纳为哪5个阶段?(仅需写出阶段名称)2. 在酶的醇化过程中必须考虑尽量减少酶活性的损失,因此操作过程通常要求在低温下进行.如果醇化一个热稳定(耐温)的酶,是否不需要在低温条件下操作?请简述你的见解.3. 写出核酸降解的主要步骤(A卷)4. 简述RNA剪接和蛋白质剪接5.真核细胞中有几种RNA聚合酶?它们的主要功能是什么?中科院2001年攻读硕士学位研究生入学试题答案一、是非题1、-2、-3、-4、+5、-6、+7、-8、-9、+10、-11、+12、+13、+14、+15、-16、-17、+18、+19、-20、-二、选择题1、C;2、A;3、A;4、B;5、C;6、B;7、A;8、B;9、C;10、C;11、B;12、B;13、D;14、B;15、D;16、A;17、A;18、B;19、B;20、B;21、B;22、A;23、D;24、C;25、A三、填空题1、前胰岛素原、胰岛素原;2、三条肽链组成的右手螺旋、左手螺旋;3、Kcat、自杀性底物;4、生物体所拥有的全套蛋白质或基因组所编码的全部蛋白质;5、二酰基甘油、Ca2+;6、细菌视紫红质、孔蛋白;7、糖脂类;8、33d;9、脂肪酰链的不饱和度;10、大、小;11、RIP、磷酸二酯酶、N-糖苷酶;12、PRPP、组氨酸、色氨酸;13、操纵基因结合、RNA聚合酶结合、转录起始;14、整合人宿主染色体;15、核仁四、问答题1、肽链的选择性断裂,用特异性较强的蛋白酶或化学试剂对得到的肽链进行分离分别测定每个肽段的氨基酸序列用另一种方式断裂台联,并重复前三个步骤,测定另一组肽段的氨基酸序列利用两组肽段的序列,进行重叠从而得到肽链的全序列。2、在低温进行蛋白质(包括酶)的分离纯化,既可以防止蛋白质的变性而失活,又可以避免长菌而污染。但有些寡聚蛋白在低温时,反而会解聚而失活。特别是一些热稳定的酶的疏水作用可能起到相当重要的作用。因此在防止微生物污染的前提下,应该避免使用低温条件。3、核酸寡核苷酸核苷酸核苷碱基+戊糖-1-磷酸 催化的是核酸酶、核糖核酸酶、脱氧核糖核酸酶或磷酸二酯酶;催化同;催化的是核苷酸酶;催化的是核苷磷酸化酶。4、剪切是指删除由基因中的内含子转录和翻译产生的非编码功能序列,是转录后加工和翻译后加工的非常重要而不可缺少的步骤。已知多数情况下在RNA水平上的删除叫RNA剪切,在蛋白质水平上的删除叫蛋白质剪切。蛋白质剪切是一种翻译后修饰事件,它将插入前体蛋白的中间的蛋白质肽段(Intein,internal protein fragment)剪切出来,并用正常肽键将两侧蛋白质多肽链(Extein,flanking protein fragments)连接起来。在此过程中不需要辅酶或辅助因子的作用,仅需四步分子内反应。Intein 及其侧翼序列可以通过突变产生高度特异性的自我切割用于蛋白质纯化、蛋白质连接和蛋白质环化反应,在蛋白质工程方面有广泛的应用前景。5、真核生物的RNA聚合酶,按照对-鹅膏蕈碱的敏感性不同进行分类:RNA聚合酶基本不受-鹅膏蕈碱的抑制,在大于10-3M/L时才有轻微的抑制。RNA聚合酶对-鹅膏蕈碱最为敏感,在10-8M/L一下就会被抑制。RNA聚合酶对-鹅膏蕈碱的敏感性介于聚合酶和聚合酶之间,在10-5M/L到10-4M/L才会有抑制现象。RNA聚合酶存在与核仁中,其功能是合成5.8SrRNA、18SrRNA和28SrRNA。RNA聚合酶存在于核质中,其功能是合成mRNA、snRNA。RNA聚合酶存在于核质中,其功能是合成tRNA和5SrRNA及转录Alu序列。相关内容:原核生物的DNA聚合酶及功能,真核生物的DNA聚合酶及功能,转录调控,复制的调控。中科院2003生化与分子一.是非题(共25分)1.多肽链的共价主链形式可以是双链或单链()2.分子量相同的两种蛋白质,如分子中酪氨酸和色氨酸残基数亦相同,其摩尔消光系数可能不同()3.胰岛素元的降血糖活性是胰岛素的1/10左右()4.苯丙氨酸是人体必需氨基酸()5.丝-酪-丝-甲硫-谷-组-苯丙-赖-色-甘十肽经胰蛋白酶部分水解后,溶液中将有两种肽段存在()6.核酸在pH3.5的缓冲液中电泳时,是从正极向负极运动的()7.核糖体上蛋白质生物合成时,催化肽键合成的是核糖体RNA()8.tRNA转录后加工有剪接反应,它是有蛋白质催化的()9.核酸降解成单核苷酸时,紫外吸收值下降()10.RNA连接酶的底物是RNA,DNA连接酶的底物是DNA()11.DNA的复制方法有多种,滚动式复制方式通常以双向方式进行()12.色氨酸操纵子(trpoperon)中含有衰减子序列()13.对正调控和负调控操纵子而言,诱导物都能促进基因的转录()14.RecA蛋白只能与单链DNA结合,并发挥NTP酶活性()15.在克隆载体pBSK质粒中,利用完整的lacZ基因作为筛选标记,白色转化菌落表明重组质粒含有插入片断()16溶菌酶水解的底物是N-乙酰氨基葡萄糖的聚合物()17.激素受体都具有酪氨酸受体结构域()18.在底物的浓度达到无限大又没有任何效应剂存在的条件下,酶催化反应为零级反应()19.蛋白质可接离的基团都来自其侧链上的基团()20.蛋白质的等电点和它所含的酸性氨基酸残基和碱性氨基酸残基的数目比例有关()21.心碱脂是一种在中性pH下带正电荷的磷脂()22.生物膜上有许多膜固有蛋白,他们的跨膜肽段大多呈螺旋结构()23.生物膜以脂双层结构为骨架,虽然细胞的不同膜由不同的磷脂组成,但脂双层的两个单层的磷脂组成是基本一致的()24.NADH氧化时的P/O比值时3()25.生物膜是离子与极性分子的通透屏障,但水分子是例外()二.选择题(共20分)1.胰岛素的功能单位是 A单体; B二体; C四体; D六体2.1mol/L硫酸钠溶液的离子浓度为 A 2; B 3; C 6; D 83.某蛋白质的pI为8,在pH6的缓冲液中进行自由界面电泳,其泳动方向为A。像正极方向泳动;B没有泳动;C向负极方向泳动;D向正负极扩散4.今有A,B,C,D四种蛋白质,其分子体积由大到小的顺序是ABCD,在凝胶过滤柱层析过程中,最先洗脱出来的蛋白质一般应该是 A A; B B; C C; D D5.噬菌体展示可用来研究 A蛋白质-蛋白质相互作用; B蛋白质-核酸相互作用; C核酸-核酸相互作用; D噬菌体外壳蛋白性质6.DNA合成仪合成DNA片断时,用的原料是A 4种dNTP; B 4种NTP; C 4种dNDP; D4种脱氧核苷的衍生物7.酒精沉淀核酸时,下列何种长度核苷酸不能被沉淀 A10; B20; C50; D1008.反密码子IGC可以识别的密码子是 A。GCG; B。GCA; C。ACG; D。ICG9.真核RNA聚合酶2最大亚基C末端重复序列的功能是A磷酸化使RNA聚合酶2与其它转录因子解离,促进转录的起始与延伸;B乙酰化使RNA聚合酶2与组蛋白竞争结合与DNA上,促进转录的起始与延伸;C甲基化使RNA聚合酶2活化,促进转录的起始与延伸;D三者都有10.GAL4因子能够结合于基因的上游调控序列并激活基因的转录,它的DNA结合结构域属于 A锌指结构; B亮氨酸拉链结构; C螺旋-环-螺旋结构; D螺旋-转角-螺旋结构11.RNA聚合酶1的功能是A转录tRNA和5sRNA基因; B转录蛋白质基因和部分snRNA基因;C只转录rRNA基因; D转录多种基因12.在真核细胞内,着丝粒是指A两个构成染色体DNA分子的连接区域;B一段高度重复的序列与组蛋白结合形成异染色质区;C染色体DNA上的一段特殊序列,能够促进与纺锤体的相互作用;D大约430bp长的一段序列,两端为两段高度保守的序列13.下列哪种酶的巯基参与催化肽键断裂反应 A羧肽酶Y; B胃蛋白酶;C木瓜蛋白酶;D胰凝乳蛋白酶14.达到反应平衡时,决定酶催化反应中底物转化为产物比率的参数是A酶的比活力高低; B酶的Vmax大小; C酶的转化数; D酶的Km15.自然界通过光合作用生成大量的植物干物质,其中含量最高的是A淀粉; B木质素; C纤维素; D半纤维素16.能催化蛋白质的谷氨酸及天冬氨酸的羧基侧肽键断裂反应的酶是A枯草杆菌蛋白酶; B胃蛋白酶; C嗜热菌蛋白酶; D金黄色葡萄糖球菌v8蛋白酶17.下列化合物中哪一个是线粒体氧化磷酸化的解偶联剂A氯霉素; B抗酶素A; C2,4-二硝基苯酚; D-羟基丁酸18.蛋白激酶A催化蛋白质上氨基酸残基的磷酸化,它是A酪氨酸残疾; B组氨酸残基; C丝氨酸残基; D门冬氨酸残基19.钠钾ATP酶催化一分子ATP水解时,同时A泵出2Na+,泵入2K+; B泵出3Na+,泵入3K+; C泵出2Na+,泵入3K+; D泵出3Na+,泵入2K+;20.动物细胞质中游离Ca2+的浓度大约是细胞外的 A 1/1000; B 1/200; C 1/50; D 1/10三.填空(共25分)1.肌红蛋白分子中的辅基含有 离子(金属),在正常状态下,该离子的化合价为 。2.在朊病毒致病过程中,其分子中的 结构转变为 结构,从而使其分子产生 。3.Northern杂交是用 鉴定 。4.真核生物主要有三类DNA聚合酶:DNA聚合酶、DNA聚合酶和DNA聚合酶 ;他们分别催化rRNA,mRNA,和 的转录。5. 通过结合反式因子,改变染色质DNA的结构而促进转录。6.噬菌体侵入大肠杆菌细胞后通过 重组而进入溶源状态。7.在同源重组过程中,常常形成 中间体。8.大肠杆菌DNA依赖的RNA聚合酶由2五个亚基组成, 亚基与转录启动有关。9.天然染色体末端不能与其他染色体断裂片断发生连接,这是因为天然染色体的末端存在 结构。10.真核生物的基因组中有许多来源相同,结构相似,功能相关的基因,这样的一组基因称为 11.酶活性调节控制包括,酶的别构调节(或正负反馈调节),可逆的化学修饰,酶原活化,激活蛋白或抑制蛋白的调控。此外,还有 和 调控等。12.多酶复合体具有自身调节的机制,第一步反应一般是限速步骤,可被其他反应产物 。这种作用被称之为 ,催化这步反应的酶往往是 。13.紧密偶联的线粒体内膜在状态4时的跨膜电位为 伏特。14.磷酸酯酶C水解磷脂酰胆碱,生成 和 。15.蛋白质识别磷酸化酪氨酸残基的结构域是 。16.表皮生长因子受体与胰岛素受体分子的结构域功能的共同特点是受体的胞内区都具有 。四.问答题(108)1.某一单链蛋白质,经过实验测得,在20摄氏度时其解折叠反应(ND,其中N为该蛋白质的折叠态,D为非折叠态)的平衡常数是1.010-8,试求该种蛋白质在该条件下折 叠反应的自由能.(R=1.9872cal/(molK)或R=8.3144J/(molK)2.何谓蛋白质组,简述其研究特点。3.请你尽可能多地列举RNA生物功能的种类。4.说明基因芯片的工作原理及其在生物学研究中的意义.。5.简述反转录(还原)病毒HIV的结构特征及其可能的致病机理。6.简述真核生物染色体上组蛋白的种类,组蛋白修饰的种类及其生物学意义。7.如何用实验证明双功能酶所催化的2种化学反应是否发生在同一催化部位。8.为什么说体外蛋白质复性或折叠与细胞内蛋白质折叠的机制是不同的。9.试管内偶联线粒体加琥珀酸与ADP产生状态3呼吸耗氧时,在分光光度计下检测到线粒体内源NAD+还原。这有那几种可能的机制?最后证明是何种机制。10.信号转导中第二信使指的是什么?试举两个第二信使的例子与他们在细胞内的主要作用。中国科学院2003年攻读硕士学位研究生入学试题答案一、是非题1、- 多肽链的共价主链形式上都是单键;2、+;3、- 胰岛素无活性;4、+ 人体必需氨基酸有8种:亮氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、组氨酸;5、+ 胰蛋白酶为蛋白水解酶,能选择的水解蛋白质中有赖氨酸或精氨酸的所及所构成的肽链;6、-;7、-;8、-;9、- 当核酸变性降解时,其紫外吸收强度显著增加,称为增色效应;10、+;11、-;12、+ 色氨酸操纵子转录的衰减作用是通过衰减子(attenuator)调控原件使转录终止。色氨酸操纵子的衰减子位于L基因中,离E基因5端约30-60bp;13、-;14、-;15、+;16、+;17、-;18、+;19、- 蛋白质是两性电解质,分子中的可解离基团主要是侧链基团,也包括末端氨基和羧基;20、+;21、-;22、+;23、+;24、+ NADH经呼吸链完全氧化时P/O为3,即1分子的NADH通过呼吸链将电子最终传递给O2可产生3个ATP;25、- 离子和大的不带电荷的极性分子葡萄糖、蔗糖等不能通过生物膜,但是小的不带电荷的极性分子水、尿素、甘油等可以通过。二、选择题1、A;2、B;3、C;4、A;5、A;6、A;7、A;8、B 带有反密码子IGC的tRNA Ala分子可以与特异编码Ala的三个密码(GCU,GCC,GCA)中的任一个结合;9、A;10、A;11、C;12、C;13、C 木瓜蛋白酶是一种含巯基(-SH)肽链内切酶,具有蛋白酶酯酶的活性,有较广泛的特异性,对动植物蛋白、多肽、酯酰胺等有较强的水解能力,同时还具有合成的功能;14、C;15、A;16、D 葡萄球菌蛋白酶和梭菌蛋白酶是高专一性肽链内切酶。葡萄球菌蛋白酶亦称Glu(谷氨酸)蛋白酶,当在磷酸缓冲液(PH7.8)中进行裂解时,它能在Glu残基和Asp(天冬氨酸)残基的羧基端断裂肽键。如果改用碳酸氢铵缓冲液(PH7.8)或醋酸铵缓冲液(PH4.0)时,则只能断裂谷氨酸残基端的肽键。梭菌蛋白酶或称Arg蛋白酶,此酶专门裂解Arg残基的羧基端肽键;17、C;18、C 蛋白激酶A催化亚基可使细胞内某些蛋白的丝氨酸或苏氨酸残基磷酸化;19、D;20、A三、填空题1、亚铁、二价;2、螺旋、片层、构型变化;3、探针杂交、RNA;4、;5、顺式作用、元件;6、DNA;7、Holliday;8、s;9、端粒;10、基因家族(gene family);11、别构调节、激素调节;12、抑制、反馈调节、别构酶;13、31054105伏特;14、1,4,5-三磷酸肌醇(I3P)和二酰基甘油()DAG;15、SH2;16、酪氨酸激酶。四、问答题1、G=RTlnK=-2.3038.3144293lg10-8=103.35kJ2、蛋白质组(proteome)指由一个基因组(genome),或一个细胞、组织表达的所有蛋白质(protein),蛋白质组学(peoteomics)是用二维电泳和质谱技术在蛋白质水平上定量、动态、整体性地研究生物体,是研究蛋白质组的技术。蛋白质组分析工作集中在两个方面:通过二维胶电泳等技术得到正常生理条件下的机体、组织或细胞的全部蛋白质的图谱,相关数据将作为待测机体、组织活细胞的二维参考图谱和数据库。比较分析在变化了生理条件下蛋白质组所发生的变化。蛋白质组学的研究内容包括:蛋白质鉴定:可以利用一维电泳和二维电泳并结合Western等技术,利用蛋白质芯片和抗体芯片及免疫共沉淀等技术对蛋白质进行鉴定研究。研究翻译后修饰:对阐明蛋白质的功能具有重要作用。mRNA表达产生的蛋白质要经历翻译后修饰如磷酸化、酶原激活等。翻译后修饰是蛋白质调节功能的重要方式。蛋白质功能确定:如分析酶活性和确定酶底物,细胞因子的生物分析/配基-受体结合分析。可以利用基因敲除和翻译技术分析基因表达产物-蛋白质的功能。促进分子医学的发展:如寻找药物的靶分子。很多药物本身就是蛋白质,而很多药物的靶分子也是蛋白质。药物也可以干预蛋白质-蛋白质相互作用。3、核糖体RNA(rRNA):核糖体组分。 信使RNA(mRNA):蛋白质合成模板转运RNA(tRNA):转运氨基酸。 不均一核RNA(hnRNA):成熟mRNA的前体。小核RNA(snRNA):参与hnRNA的剪接、转运。 小胞浆RNA(scRNA/7SL-RNA):蛋白质内质网定位合成的信号识别体的组成成分。microRNA:平均每个microRNA调解人类的200种不同的mRNA,并且多个microRNA能够协调它们的活动以调节一些特殊的靶标基因。miRNA:主要功能是调节内源基因的表达,参与细胞周期的调控及个体发育过程。导引RNA(gRNA):mRNA编辑。RNA聚合酶(RNA P):tRNA加工。核仁小分子RNA(snoRNA):参与rRNA成熟加工(切割和修饰)。SRP-RNA:参与蛋白质的分泌。端粒mRNA:参与DNA端粒合成并影响细胞的寿命。tmRNA:参与破损mRNA蛋白质合成的终止。4、基因芯片工作原理:应用已知核酸序列作为靶基因与互补的探针核苷酸序列杂交,通过随后的信号检测进行定性与定量分析。具体讲是将许多特定的寡核苷酸片段或cDNA基因片段作为靶基因,有规律的排列固定于支持物上,样品DNA/RNA通过PCR扩增、体外转录等技术掺入荧光标记分子或反射性同位素作为探针然后按碱基配对原理将两者进行杂交,在通过荧光或同位素检测系统对芯片进行扫描,有计算机系统对每一探针上的信号作比较和检测,从而得出所需要的信息。Schematic illustrantion of an HIV-1 virion.The viral particle is covered by a lipid bilayer that is derived from the host cell.基因芯片技术应用领域主要有基因表达谱分析、新基因发现、基因突变及多态性分析、基因组文库作图、疾病诊断和预测、药物筛选、基因测序等。另外基因芯片在农业、食品监督、环境保护、司法鉴定等方面都将作出重大贡献。随着研究的不断深入和技术的更加完善基因芯片一定会在生命科学院就领域发挥出其非凡的作用。5、HIV结构gp120gp41核心:二两RNA链+逆转录酶+核心蛋白p17。P24P24 capsid外壳:来自宿主细胞脂膜+病毒编码糖蛋白(外膜gp120,跨膜gp41)。ReverseTranscriptaseRNAProteaseIntegraseLipid bilayerHIV-1基因组9个:gag、pol、env编核心蛋白、逆转录酶、跨膜糖蛋白;Tat、rev、nef调控病毒复制;vif、vpr、vpu功能不清。无nef基因的HIV通过血液感染患者并为发展为AIDS,提示可将病毒调控蛋白(如nef编码蛋白)作为抗AIDS药物的靶点,或采用无关键调控蛋白的HIV突变体作为疫苗治疗AIDS。HIV致病机理HIV感染CD4+T细胞:HIV-gp120+CD4+T细胞膜上CD4R+趋化因子受体CXCR4HIV-RNA进入细胞内反义DNA双链DNA与宿主基因整合潜伏(前病毒)被TNF、IL-6激活复制入血CD4+T细胞破坏。HIV感染组织中单核巨噬细胞、树突装细胞:10-50%被感染HIV-gp120+MC-CD4R+共受体CCR5HIV进入细胞HIV-Ab+(树突+MC)-Fc受体HIV进入大量复制储存、释放。6、真核生物染色体上组蛋白的种类包括H2A、H2B、H3、H4四种。组蛋白修饰包括:乙酰化、磷酸化、甲基化、泛素化以及ADP核糖基化等。特定的组蛋白修饰与特定的基因激活化抑制状态相联系,组蛋白修饰在基因调控中发挥了重要作用。将有利于:更好的开发新药。深入探讨遗传调控和表观遗传调控相互作用的网络与不同生物学表型之间的关系。在控制真核基因选择性表达的网络体系内进一步深入理解染色质结构、调控序列以及调控蛋白之间交互作用的内在机理。建立基因表达的调控网络数据库及其分析系统。7、双功能酶活性中心(或催化位点)的测定。双功能酶:在生物体内共价修饰后有不同于未共价修饰的不同时的酶活性的酶。活性中心(或催化位点)的测定,对共价修饰的不同的酶与未共价修饰的用同样的方法测定活性中心(或催化位点)的测定看是不是一样。比如定点突变等。8、主要从催化的酶、分子伴侣和其它分子的影响等几个方面组织答案。9、氧化磷酸化的偶联机制的相关内容:化学偶联假说:认为电子传递时ATP的合成是由化学能的直接转换,在电子传递时先生成不含磷酸的高能中间物,再转移成含磷酸的高能中间物,最后生成ATP构象偶联假说:认为由电子传递所产生的能量的储存是通过一种电子传递蛋白或是偶联因素分子的构象变化而实现的。这种高能构象状态的产生是维持蛋白质三维构象的一些弱键(如氢键、疏水基团)的位置和数目发生变化的结构,这些弱键的数目和位置的变化是由能量变化引起的,这种高能结构中的能量即提供给ADP和无机磷酸形成ATP,同时能量携带蛋白又可逆的回到原来的低能状态化学渗透假说(chemiosmotic hypothesis):认为电子传递的结果将H+从线粒体内膜上的内侧“泵”到内膜的外侧,于是在内膜内外两侧产生了H+的浓度梯度。即内膜的外侧与内膜的内侧之间含有一种势能,该势能是H+返回内内膜内侧的一种动力。H+通过F0F1-ATP酶分子上的特殊通道又流回内膜的内侧。当H+返回内膜内测时,释放出自由能的反应和ATP的合成反应相偶联。10、第二信使指能把激素或神经递质的信息传导细胞内,并引起相应生理效应的细胞内的某种化学物质至少有两个基本特性:是第一信使同其膜受体结合后最早在细胞膜内侧或胞浆中出现、仅在细胞内部起作用的信号分子能启动或调节细胞内稍晚内出现的反应信号应答。细胞内有五种最重要的第二信使:cAMP、cGMP、1,2-二酰甘油(DAG)、1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)、Ca2+等。环磷腺苷(cAMP):是ATP经AC作用的产物。受体、D1受体、H2受体等激动药通过GS作用使AC活化,ATP水解而使细胞内cAMP增加。受体、D2受体、MACH受体、阿片受体等激动药通过Gi作用抑制AC,细胞内cAMP减少。cAMP受磷酸二酯酶(PDE)水解为5AMP后灭活。茶碱抑制PDE而使胞内cAMP增多。cAMP能激活蛋白酶A(PKA)而是胞内许多蛋白酶磷酸化(ATP提供磷酸基)而活化环磷鸟苷(cGMP):是GTP经鸟苷酸环化酶(GC)作用的产物,也受PDG灭活。cGMP作用与cAMP相反,使心脏抑制、血管舒张、肠腺分泌等。cGMP可以独立作用而不受cGMP制约。cGMP可激活蛋白酶G而引起各种效应钙离子:对细胞功能有着重要调节作用,如肌肉收缩、腺体分泌、白细胞及血小板活化等。中科院2004生化与分子一.是非题:每题1.5分,共30分,答“是”写“+”,答“非”写“-”。 1.目前已知的G蛋白都是由和亚基组成的. 2.作为膜脂的鞘糖脂的功能主要与能量代谢有关. 3.生物膜中脂质的流动性受胆固醇含量的影响. 4.磷脂的代谢转化主要是与三酯酰甘油的合成和利用有关. 5.人是最高等生物,其基因组的碱基对数目(2.9109)是动物界中最大的. 6.有两个核酸制剂A和B,A的A260/A280=2.0,B的A260/A280=1.5,因此可判定制剂A的纯度比制剂B的要高. 7.真核生物mRNA的两端都有3-羟基. 8.DNA半不连续复制是指复制时一条链的合成方向是53.而另一条链的合成方向为35. 9.一个真核细胞内基因编码所用的密码子是通用的. 10.人类基因组中有大量重复序列,如SINE,ALu等序列. 11.端粒的序列在同一细胞各条染色体上都是相同的. 12.在遗传作图中,1厘摩(cM)相当于1Mb的碱基长度. 13.一个酶催化正反应和逆反应的Kcat或Km值可以不同,但Kcat/Km比值通常是相同的. 14.信号肽的结构有一些特征,目前发现的信号肽序列都是位于多肽连的N端. 15.构成淀粉,纤维素和半纤维素的基本单位都是葡萄糖. 16.ELISA和Western印迹两种方法都是应用抗体检测抗原的实验手段. 17.生物膜的基本结构是脂双层.其中的二个单层的脂质组成大体上是相同的. 18.Na+,K+-ATP酶在水解1分子ATP时使2个K+由细胞外进入细胞内,同时使2个Na+由细胞内达到细胞外. 19.脂质体不是一种细胞器. 20.寡霉素是氧化磷酸化的抑制剂,既抑制呼吸也抑制磷酸化,但是它对呼吸的抑制可以被解偶联剂所解除. 二.选择题,每题1.5分,共45分.答案一律写在答题纸上。 1.类二十碳烷(eicosanoid)的主要前体是 A.前列腺素; B.亚油酸; C花生四烯酸; D棕榈酸. 2.环加氧酶(cyclooxygenase)参与下述何种分子的合成? A.白三烯;B.血栓烷;C.亚油酸;D,血小板活化因子. 3.肌醇三磷酸(IP3)作用与受体,从而调节 A.G蛋白的活性;B.Ca2+通道;C.PKG的活性;D.腺苷酸环化酶的活性. 4.磷脂酶D催化磷脂酰胆碱水解的产物是 A.二酯酰甘油;B.磷脂酸;C磷酸胆碱;D.溶血磷脂酸. 5.一氧化氮(NO)受体是 A.G蛋白偶联受体; B.鸟苷酸环化酶; C.腺苷酸环化酶; D蛋白酪氨酸激酶. 6.已知佛波醇酯(TPA)可以强烈地活化 A.蛋白酪氨酸激酶;B.G蛋白;C.蛋白激酶C;D.蛋白激酶B. 7.能与DNA结合使DNA失去模板功能,从而抑制复制和转录的是 A.5-氟尿嘧啶; B.放线菌素; C.利福霉素; D.-鹅膏蕈碱. 8.氨基酸在叁入肽链前需要被ATP活化,氨基酸活化的场所是 A.内质网;B.线粒体;C.核糖体;D.细胞质. 9.真核生物mRNA的帽子结构中,m7G与多核苷酸链通过三个磷酸基联接的方式是 A.2-5; B.3-5; C.3-3; D.5-5. 10.与tRNA中的反密码子为GCU相配对的mRNA中的密码子是 A.UGA; B.CGA; C.AGU; D.AGI. 11.能校正+1移码突变基因的是 A.突变型氨酰tRNA合成酶; B.含突变型反密码子的tRNA;C.含四个碱基的反密码子的tRNA; D.能切割一个核苷酸的酶. 12.用a32PdATP标记一个DNA片段,需要用 A.多核苷酸激酶; B.DNA连接酶; C.DNA聚合酶; D.逆转录酶. 13.DNA甲基化是基因表达调控的重要方式之一,甲基化位点是 A.CpG岛上的C的3位; B.CpG岛上的G的3位; C.CpG岛上的C的5位; D.CpG岛上的G的7位. 14.遗传学的三大定律是 A.连锁定律.分离定律.独立分配定律; B.隐性定律.自由组合定律.独立分配定律; C.重排定律.突变定律.减数分裂定律; D.质量性状定律.数量性状定律.混合性状定律. 15.非孟得尔式遗传可以由以下的原因引起 A.核外基因的存在; B.转座子的激活; C.逆转录病毒的插入; D.同源重组. 16.人类某些神经系统疾病主要与下列那种核苷酸序列的不正常扩增有关 A.三核苷酸序列; B.具有回文结构的六核苷酸序列; C.CpG序列; D.SINE序列.17.基因参与凋亡的许多证据最初来源于对线虫(C.elegens)发育的研究,这些参与凋亡调控的基因称为Ced基因,其中和人类基因Bcl2同源的是 A.Ced3; B.Ced5; C.Ced7; D.Ced9. 18.根据F2代出现极端表型的频率可以估算数量性状基因的数目,如果这一频率为0.0143,则该性状由 A.2对基因控制; B.3对基因控制; C.4对基因控制; D.5对基因控制; 19.Lineweaver-Burk双倒数作图法和求抑制剂Ki的Dixon作图法分别采用 A.1/v对于1/S作图和1/v对1/I作图; B.1/v对于1/S作图和1/v对I作图; C.1/v对于S作图和1/v对1/I作图; D.1/v对于1/S作图和v对1/I作图. 20.在含金属酶中,最常见的金属是 A.铜; B.铁; C.锌; D.镁. 21.英国科学家完成牛胰岛素的氨基酸序列测定工作和中国科学家完成牛胰岛素的人工合成工作分别在 A.20世纪40年代和20世纪50年代; B.20世纪50年代和20世纪60年代 C.20世纪50年代和20世纪50年代; D.20世纪60年代和20世纪70年代 22.催化糖原合成的三种酶是 A.糖原磷酸化酶,糖原合酶,糖原分支酶;B.UDP-葡萄糖焦磷酸酶,糖原磷酸化酶,糖原分支酶; C.UDP-葡萄糖焦磷酸酶,糖原磷酸化酶,糖原合酶; D.UDP-葡萄糖焦磷酸酶,糖原合酶,糖原分支酶. 23.蛋白质在处于等电点时的溶解度 A.最小; B.最大; C.与等电点没有关系. 24.酵母双杂交系统被用来研究 A.哺乳动物功能基因的表型分析;B.酵母细胞的功能基因;C.蛋白质的相互作用;D.基因的表达调控. 25.凝集素是一类蛋白质,它们能专一地识别 A.某个氨基酸残基或特定肽段序列; B.某个糖基或特定寡糖链; C.某个核糖核苷酸或特定寡核糖核苷酸序列; D.某个脱氧核糖核苷酸或特定寡脱氧核糖核苷酸序列. 26.2003年诺贝尔化学奖授予研究生物膜上通道蛋白的科学家,他们阐明了 A.Cl-通道与Na+通道; B.K+通道与H2O通道; C.Ca2+通道与H+通道; D.乙酰胆碱通道与GABA通道. 27.蔗糖与麦芽糖的区别在于 A.麦芽糖是单糖; B.蔗糖是单糖; C.蔗糖含果糖; D.麦芽糖含果糖. 28.下述化合物中不属于胆固醇衍生物的是 A.雌性激素; B.胆酸; C.黄体酮; D.前列腺素. 29.抗霉素A是一种抑制剂,它抑制 A.线粒体呼吸链复合物I; B.线粒体呼吸链复合物II; C.线粒体呼吸链复合物III; D.线粒体ATP合成酶. 30.细胞色素C是重要的呼吸链组份,它位于 A.线粒体内膜的内侧; B.线粒体内膜的外侧; C.线粒体外膜; D.细胞质内. 三.简答题:每题5分,共25分.答案一律写在答题纸上. 1.当细胞中某一个蛋白激酶被活化,结果却发现细胞中有一个蛋白质的磷酸化水平没有提高,反而降低了.请问这个结果可不可信?如何解释? 2.根据结构与催化机制(而不是根据被驱动的离子类型),说出三类驱动离子的ATP酶的名称. 3.简述磷脂酶C催化磷酯酰肌醇4,5-二磷酸的水解产物可引发的信号传递事件. 4.有一寡聚核糖核苷酸片段:ApCpCpCpCpApGpGpGpUpUpUpApGp,请分别写出用牛胰核糖核酸酶A,核糖核酸酶T1和碱处理得到的完全降解物. 5.简述平衡致死系统作为一种隐性纯合致死突变品系保存方式的原理 四.问答题:每题10分,共50分. 1.已知细胞质膜中脂分子组成的复杂性远远超过它们作为单纯的生物或物理屏障所需的程度,你认为这有什么生物学意义? 2.一个可逆抑制剂对酶的抑制常数(Ki)是否就等于当酶的活性被抑制到50%时的抑制剂浓度?请你通过对一个竞争性抑制剂和一个非竞争性抑制剂的酶动力学分析,对上述问题做出解答. 3.目前已得到原子分辨率结构的蛋白质膜蛋白的比例不到1%,请问解析膜蛋白空间结构的难度在那里?测定膜蛋白原子分辨率空间结构的方法有那些? 4.简述表观遗传变异(epigeneticvariation)的概念与意义,并举出两种主要表现形式. 5.严重急性呼吸综合症(SevereAcuteRespiratorySyndrome,SARS)的病原体被称为SARS病毒.就你所知,简单回答SARS病毒的类属,结构特征和生物特性.中国科学院2004年攻读硕士学位研究生入学试题答案一、是非题 1、-。2、- 鞘糖脂是细胞膜重要组成成分之一,调节细胞的生长、分化,控制肿瘤的侵润与转移。3、+。4、-。5、-c值悖论和N值悖论。6、+。7、+真核细胞的mRNA分子最显著的结构特征是具有5端

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