健脾补肺化痰方对哮喘气道重塑模型幼龄大鼠全血中五种微量元素的影响

健脾补肺化痰方对哮喘气道重塑模型幼龄大鼠全血中五种微量元素的影响摘要目的探讨健脾补肺化痰方对哮喘气道重塑模型幼龄大鼠全血五元素的影响。方法将180只幼龄大鼠随即分为正常组、模型组、西药组和健脾补肺化痰方组，考察大鼠血浆中Cu、Zn、Ca、Mg和Fe的含量。结果模型组大鼠全血五元素含量与正常组存在显著差异，Zn、Ca浓度低于正常组，Fe浓度高于正常组，说明哮喘的发生与低Zn、低Ca、高Fe密切相关；健脾补肺化痰方各组与模型组比较，Zn浓度明显高于模型组，Cu、Fe浓度明显低于模型组，说明健脾补肺化痰方能改善哮喘气道重塑模型幼龄大鼠的低Zn、低Cu、高Fe状态。结论健脾补肺化痰方能改善哮喘气道重塑模型幼龄大鼠的低Zn、低Ca、高Fe状态，从而纠正体内各元素的失调，预防哮喘发作具有十分重要意义。关键词健脾补肺化痰方；哮喘；气道重塑；大鼠；全血五元素中图分类号R562.25文献标识码A文章编号1673-7210（2013）02（b）-0010-03对于哮喘缓解期的治疗，近10余年来治疗重点是长期吸入性糖皮质激素（Inhaledcorticosteroids，ICS）进行局部抗炎，中医学认为，支气管哮喘（bronchialasthma，BA）在缓解期的特点是肺、脾、肾脏气虚，且哮有夙根，若触遇诱因则易引起BA反复发作，致使正气不支，疾病迁延难愈1-4。为突出中医治疗优势，从中医角度深刻认识支气管哮喘的本质，从而更好地提高临床疗效，我们根据中医药治疗哮喘的临床经验，遵循缓解期以“健脾气补肺气以化痰”的立方法则，确立了以健脾补肺化痰方为主方的治疗方法5-7。在既往研究的基础上，制订了严谨的科研设计，以哮喘气道重塑模型幼龄大鼠为对象，观察健脾补肺化痰方对幼龄大鼠全血五元素摄入的影响，来论证中医药治疗哮喘所具备的优势，现将研究结果报道如下：1材料与方法1.1实验材料1.1.1实验动物与药物清洁级SD幼龄大鼠，雌雄各半，体重（905）g，由安徽省长临河动物实验基地提供。共180只，随机分为6组：正常组、模型组、西药组（地塞米松0.75mg/片，浙江仙居制药厂生产），每组30只；健脾补肺化痰方（健脾补肺化痰方：炙黄芪10g、太子参8g、炒白术8g、茯苓6g、陈皮6g、炙甘草6g、葶苈子6g、薏苡仁10g、砂仁5g、桔梗8g、山药10g、白扁豆10g，每剂用6080mL水混匀，所含生药量为0.8661.155g，组方为冲剂剂型。）组分为4周组、8周组、12周组，每组30只。适应性喂养7d后开始实验。1.1.2试剂和仪器原子吸收光谱仪元素专用检测试剂（北京博晖创新光电技术股份有限公司）；原子吸收光谱仪BH5500S（北京博晖创新光电技术股份有限公司）。1.2实验方法1.2.1造模及给药方法1.2.1.1造模方法常规饲养7d后复制BA大鼠模型，除正常组外，各组参照文献3，分别于第1天及第8天大鼠腹腔内注射新鲜配制的卵蛋白溶液1mL（内含卵蛋白100mg，氢氧化铝100mg）致敏，第15天开始将大鼠逐个放入体积约为4L密闭容器中，雾化吸入1%卵蛋白激发哮喘，隔日1次，雾化流量5mL/min，每次20min，共6周。以大鼠出现呼吸急促深快，肋间隙凹陷，腹肌出现明显收缩，呛水，喘鸣等呼吸道梗阻症状为激发成功。1.2.1.2给药方法引喘结束后第8天，西药组地塞米松0.75mg/（kgd），用蒸馏水融化为3mL灌胃，连续给药4周。健脾补肺化痰方组予以健脾补肺化痰方7.38g/（kgd）灌胃，4周组用药4周，8周组用药8周，12周组用药12周，正常组、模型组予以等剂量生理盐水灌胃，每日1次，连续4周。各组大鼠均于最后给药后常规喂养1周，再予指标测定7-9。1.2.2取血将大鼠各组大鼠用2%戊巴比妥0.3mL/100g腹腔注射麻醉，于测定肺功能后迅速从体瞄箱取出，打开腹腔，腹主动脉取血2mL。1.3指标测定腹主动脉全血，加原子吸收光谱仪元素专用检测试剂，131稀释后，按原子吸收光谱仪操作规程检测Cu、Zn、Ca、Fe、Mg浓度。分别统计正常组与哮喘模型组、西药组与哮喘模型组和健脾补肺化痰方各组与哮喘模型组大鼠全血五元素含量。1.4统计学方法应用SPSS17.0统计分析软件将各组资料建成数据库文件，计量资料采用均数标准差（xs）表示，组间比较采用t检验，以P0.05为差异有统计学意义。2结果2.1西药组与哮喘模型组大鼠全血五元素比较西药组与模型组相比，Zn浓度明显高于模型组（P0.01）；Fe浓度低于模型组（P0.05）。见表1。2.2健脾补肺化痰方各组与哮喘模型组大鼠全血五元素比较模型组与正常组比较，Zn浓度低于正常组（P0.01）；Ca浓度低于正常组（P0.05）；Fe浓度高于正常组（P0.05）。见表2。健脾补肺化痰方4周组Zn浓度明显高于模型组（P0.05）。健脾补肺化痰方8周组Zn浓度明显高于模型组（P0.01）；Cu、Fe浓度低于模型组（P0.05）。健脾补肺化痰方12周组Zn浓度明显高于模型组（P0.01）；Cu、Fe浓度明显低于模型组（P0.05）。健脾补肺化痰方各组间比较：健脾补肺化痰方4周组全血Cu浓度高于8周组、12周组，差异有高度统计学意义（P0.05）。见表2。表2中药各组与模型组大鼠全血五元素浓度比较（xs，mg/L）注：与正常组比较，*P0.01，P0.05；与模型组比较，P0.05，P0.013讨论大量的临床实验表明，微量元素与哮喘有着密切的关系。周宁等10发现哮喘患儿血中必需微量元素Zn、Se、Cr、Sr及宏量元素B、Mg比健康对照组显著降低，而Fe、Cu、Ca、V、Al、Co及有害元素Cd则显著升高。结果表明，小儿哮喘与人体免疫缺陷、部分微量元素降低及有害微量元素升高密切相关。冯学斌等11对21例支气管哮喘患儿血清12种微量元素钙、镁含量，以及外周血T细胞亚群进行检测。结果哮喘组血清锌、铁、铜、锂、钙均值明显低于对照组，锂作为重要生物学活性的微量元素，不仅具有抗病毒作用，而且可促进T细胞发育、成熟。且铁与T细胞增殖功能呈显著正相关，而与CD4+细胞百分率呈负相关，铝与T细胞增殖功能呈正相关；钛与CD4+/CD8+比值呈正相关。表明血清微量元素与T细胞亚群间有密切关联。哮喘时微量元素降低或缺乏，可能通过相应酶活性改变，使T细胞功能受损，临床上表现反复呼吸道感染，而促使哮喘发作。本课题所采用的健脾补肺化痰方由炙黄芪、太子参、炒白术、茯苓、陈皮、炙甘草、葶苈子、薏苡仁、砂仁、桔梗、山药、白扁豆组成。方中太子参、炙甘草性平味甘，健脾益气以扶正；炙黄芪补肺脾之气；茯苓、炒白术健脾补气；葶苈子化痰；陈皮为脾、肺二经之气分药，既能理气，又能燥湿。实验结果表明模型组大鼠全血五元素含量与正常组存在显著差异，Zn、Ca浓度低于正常组，Fe浓度高于正常组，说明哮喘的发生于低Zn、低Ca、高Fe密切相关；健脾补肺化痰方各组与模型组比较，Zn浓度明显高于模型组，Cu、Fe浓度明显低于模型组，说明健脾补肺化痰方能改善哮喘气道重塑模型幼龄大鼠的低Zn、低Ca、高Fe状态，从而减轻哮喘症状。本课题通过对哮喘大鼠的实验发现，低Zn、低Ca、高Fe与哮喘的发生有密切关系，而健脾补肺化痰方能改善哮喘气道重塑模型幼龄大鼠的低Zn、低Ca、高Fe状态，从而纠正体内各元素的失调，预防哮喘发作具有十分重要意义。参考文献1冯艳青，彭勋，赵培利.建立支气管哮喘大鼠模型的新方法及评价J.河北医药，2011，33（24）：3694-3695.2刘莉，余可斐，穆敬平，等.地塞米松对哮喘大鼠气道重建、肥大细胞及IL-10的影响J.中华肺部疾病杂志：电子版，2012，5（1）：15-19.3刘鑫，张恒平，彭光耀，等.柴朴汤对支气管哮喘大鼠气道重塑及肺组织中-平滑肌肌动蛋白表达的影响J.中国实验方剂学杂志，2012，（7）：220-224.4李江波，薄建萍，张朝蔷.地塞米松对支气管哮喘大鼠气道重塑及IL-8的影响J.中国现代医生，2012，50（12）：15-16，19.5吕洪臻，黄诚，崔玉宝.支气管哮喘动物模型的研究进展J.医学综述，2012，18（19）：3216-3220.6曹珊珊，孙轶秋.支气管哮喘动物模型制备的研究J.中国中医急症，2012，21（10）：1574-1576.7冯高华，朱虹，孙峰，等.平喘汤对支气管哮喘大鼠肺组织IgE、TGF-1及TNF-的影响J.中药新药与临床药理，2011，22（30）：273-276.8冯高华，朱虹，孙峰，等.平喘汤对支气管哮喘大鼠肺组织形态学及肺指数的影响J.中国中医急症，2011，20（7）：1100-1101.9段旭东，赵辉，张雅兰，等.氨茶碱对支气管哮喘气道重塑大鼠肺组织MMP-9及其基因表达的调节J.