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细菌鉴定细 菌 鉴 定目录第一章 葡萄菌属一、葡萄菌属介绍二、生物学特征三、鉴定及鉴别要点四、葡萄球菌属鉴定流程第二章 链球菌属一、链球菌属介绍二、生物学特征三、鉴定四、链球菌鉴定程序第三章 肠球菌属一、肠球菌属介绍二、生物学特征三、鉴定第四章 奈瑟菌属一、奈瑟菌属介绍二、生物学特征三、鉴定第五章 棒状杆菌属一、棒状杆菌属介绍二、生物学特征三、鉴定第六章 李斯特菌属一、李斯特菌属介绍二、生物学特征三、鉴定第七章 奴卡菌属一、奴卡菌属介绍二、生物学特征三、鉴别要点第八章 军团菌属一、军团菌属介绍二、生物学特征第九章 弧菌科一、弧菌科介绍二、弧菌科分类第一节 弧菌属一、弧菌属介绍二、生物学特征三、鉴别要点第二节 气单胞菌一、气单胞菌菌属介绍二、嗜水气单胞菌 （一）生物学特性 （二）鉴别要点第三节 邻单胞菌属一、邻单胞菌属介绍二、生物学特征三、鉴别要点第十章 布兰汉菌亚属一、布兰汉菌亚属介绍及生物学特性二、鉴别要点第十一章 假单胞菌属第一节 铜绿假单胞菌一、铜绿假单胞菌介绍二、生物学特征三、鉴别要点第二节 恶臭假单胞菌一、恶臭假单胞菌介绍二、生物学特征三、鉴别要点第十二章 莫拉菌属一、莫拉菌属介绍二、生物学特征三、鉴别要点第十三章 肠杆菌科一、肠杆菌科介绍二、生物学特征三、鉴定第一节 埃希菌属一、埃希菌属介绍二、生物学特征第二节 志贺菌属一、志贺菌属介绍二、生物学特征三、鉴定第三节 沙门菌属一、沙门菌属介绍二、生物学特征三、鉴定第四节 枸橼酸杆菌属一、枸橼酸杆菌属介绍二、生物学特征三、鉴定第五节 爱德华菌属一、爱德华菌属介绍二、生物学特征三、鉴定第六节 克雷伯菌属一、克雷伯菌属介绍二、生物学特征三、鉴定第七节 肠杆菌属一、肠杆菌属介绍二、生物学特征三、鉴定第八节 沙雷菌属与哈夫尼亚菌属一、沙雷菌属介绍二、生物学特征三、鉴定第九节 变形杆菌属、普罗威登斯菌属和摩根菌属一、变形杆菌属、普罗威登斯菌属和摩根菌属介绍二、生物学特征三、鉴定第十节耶尔森菌属一、耶尔森菌属介绍二、生物学特征三、鉴定第一章 葡萄球菌属一、 葡萄菌属介绍葡萄球菌属（Staphylococcus）是一类触酶试验阳性的革兰阳性球菌，属微球菌科，广泛分布于自然界。包括金黄色葡萄球菌（S.aureus）、表皮葡萄球菌(S.epidermidis)、腐生葡萄球菌(S.saprophyticus)等32个种、15个亚种。临床上常以是否产生凝固酶将葡萄球菌分为凝固酶阳性和凝固酶阴性葡萄球菌两大类。凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌是人类重要的致病菌，可引起社区和医院感染。感染常以急性、化脓性为特征，如果未经治疗或治疗不及时，感染可扩散至周围组织或经菌血症转移至其他器官。金黄色葡萄球菌的致病性主要与各种侵袭性酶类（如血浆凝固酶、透明质酸酶、磷脂酶、触酶、耐热核酸酶）和多种毒素（溶血毒素、杀白细胞毒素等）有关，某些菌株产生的肠毒素可引起食物中毒，表现为急性胃肠炎。凝固酶阴性葡萄球菌是人体皮肤粘摸正常菌群之一，也是医院感染的主要病原菌，其中，表皮葡萄球菌可引起人工瓣膜性心内膜炎、静脉导管感染、腹膜透析性腹膜炎和人工关节感染等。近年来，从临床感染部位中分离的葡萄球菌多重耐药现象比较严重，尤其是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和表皮葡萄球菌（MRSE）的分离率逐年增高。特别是耐万古霉素金黄色葡萄球菌（MRVA）的出现，已成为临床抗感染治疗的棘手问题，实验室应重视和加强对耐甲氧西林葡萄球菌和对万古霉素耐药的葡萄球菌的监测。二、 生物学特征典型的葡萄球菌呈球形，直径0.51.5m，革兰阳性球菌，无鞭毛和芽孢，本菌属中大多数菌种为需氧或兼性厌氧菌，对营养要求不高，最适温度为35-37，最适pH为7.4-7.6。在普通琼脂平板上，经35-37培养24-48小时后，形成2-3mm呈黄色、白色、柠檬色等不透明圆形凸起菌落。所产色素为脂溶性色素。三、 鉴定及鉴别要点1、 葡萄球菌属与微球菌属的鉴别：葡萄球菌属葡萄糖O/F试验为发酵型，镜下以葡萄状排列为主，菌体较小；而微球菌属为氧化型或无反应，镜下以四联排列为主，并且菌体较大。2、 葡萄球菌属与链球菌属的鉴别：葡萄球菌属葡萄糖O/F试验为发酵型，触酶试验阳性；链球菌属葡萄糖O/F试验为氧化型，触酶试验阴性。表 葡萄球菌属与微球菌科其他菌属的鉴别菌属触酶四联状排列葡萄糖发酵动力（G+C）mol%葡萄球菌属+-+-30-39微球菌属+-64-75动球菌属+-+39-52口腔球菌属d-+-56-61肠球菌属-+d37-45注：d 为反应不定。表 常见葡萄球菌的鉴别菌种新生霉素耐药（5g/片）多粘菌素B耐药（300U/片）脲酶木糖蔗糖甘露醇血浆凝固酶金黄色葡萄球菌-+-+表皮葡萄球菌-+-+-腐生葡萄球菌+-+-+-溶血葡萄球菌-+d-中间型葡萄球菌-+-+模仿葡萄球菌-+-+-木糖葡萄球菌+-+-孔氏葡萄球菌+-d-+-华纳葡萄球菌-+-+d-人型葡萄球菌-+-+-耳葡萄球菌-d-松鼠葡萄球菌+-+-解糖葡萄球菌-注：d 为反应不定。四、 葡萄球菌属鉴定流程样品提取：脓液、创面分泌物、穿刺液、咽拭子、尿液、痰液等 脑脊液、血液 粪便、呕吐物直接涂片 分离培养 增菌培养（5%二氧化碳）染色、镜检 接种血平板、接种葡萄糖肉汤或其他商品化培养基（5%二氧化碳）分离培养初步报告结果 挑选可疑菌落 接种高盐甘露醇平板鉴定试验涂片 染色 镜检血浆凝固 耐热酶试验 DNA酶试验 药敏试验 手工及仪器鉴定报告结果第二章 链球菌属一、 链球菌属介绍链球菌属是一群触酶试验阴性、呈链状排列的革兰阳性球菌。Bergteys分类法将链球菌属分为6个生物群、29个种，如化脓性链球菌、无乳链球菌和肺炎链球菌等。Lancefield根据链球菌细胞壁多糖抗原不同，将该菌属分为18个血清群，即A、B、C、D、E、F等。另外，传统上根据溶血现象将该菌属分为-溶血或草绿色溶血链球菌、-溶血或乙型溶血链球菌、-溶血或不溶血链球菌。链球菌广泛分布于自然界，常居于人体的鼻咽腔和肠道中。在链球菌属中，化脓性链球菌、无乳链球菌和肺炎链球菌是三种重要的致病菌，可引起化脓性扁桃腺炎、急性咽炎、医源性伤口感染、风湿热、肾小球肾炎以及呼吸道感染等。二、 生物学特性链球菌呈圆形或卵圆形，直径0.5-1.0m，呈单个、成双或链状排列，链的长短不一。革兰染色阳性，无鞭毛、无芽孢。肺炎链球菌呈矛头状，有荚膜。本菌属营养要求较高，需在含有血液或血清、葡萄糖、氨基酸、维生素等物质的培养基中才能生长。最适温度为35-37，最适pH7.4-7.6。在血琼脂平板上经35-37培养18-24小时，可形成灰白色、圆形、凸起、直径为0.5-0.75mm的小菌落。不同的菌株可有不同的溶血反应，观察溶血现象，对链球菌的鉴定有很大帮助。触酶试验阴性，分解葡萄糖产酸不产气，除肺炎链球菌外，链球菌不分解菊糖。三、 鉴定杆菌肽敏感试验：95%以上的化脓性链球菌对杆菌肽（每纸片含0.04单位）敏感，抑菌环10毫米为敏感。CAMP试验：无乳链球菌CAMP试验为阳性，其它链球菌为阴性。Optochin敏感试验：几乎所有的肺炎链球菌都对Optochin敏感。抑菌环18毫米为敏感。表 -溶血性链球菌的主要生物学特性血清群菌名PYRV-PCAMP杆菌肽胆汁七叶苷山梨醇海藻糖A化脓性链球菌+-+-+B无乳链球菌-+-+C马链球菌-d-C似马链球菌-+C兽疫链球菌-d+-ACFG咽峡炎链球菌-+-+-+注：PYR：L-吡咯烷酮-萘酰胺水解。d：为反应不定。表 非-溶血性链球菌的主要生物学特性菌 名Optochin敏感胆汁溶菌胆汁七叶苷PYRV-P山梨醇葡萄糖肺炎链球菌+-牛链球菌-+-d变异链球菌-+中间型链球菌-d-+-血链球菌-d-+注： d 为反应不定四、 链球菌鉴定程序样品提取：咽拭子、痰液、脓液、穿刺液等 脑脊液、血液 增菌培养（5%二氧化碳）接种葡萄糖肉汤或其血琼脂平板（5%二氧化碳）涂片 染色 镜检 挑选可疑菌落 鉴定试验血清学分类 杆菌肽敏感试验CAMP试验 Optochin敏感试验 胆汁溶菌试验 草绿色链球菌群鉴定 其他鉴定系统A、B、C A群链球菌 B群链球菌D、F、G 肺炎链球菌 草绿色链球菌等群链球菌报告结果第三章 肠球菌属（Enterococcus）一、 肠球菌属介绍肠球菌属是指一组主要存在于人类或动物肠道、具有共同生化特征的革兰阳性球菌，归属链球菌科。主要包括：粪肠球菌、屎肠球菌、鸟肠球菌、坚韧肠球菌、铅黄肠球菌等。肠球菌引起的感染以尿路感染最常见，大部分为医院内感染，常与尿道器械操作、导尿有关，其次为腹部和盆腔等部位的创伤和外科术后感染。近年来，肠球菌属氨苄青霉素耐药株和庆大霉素高耐药株逐渐增多，耐万古霉素的肠球菌也有较多报道，肠球菌所致重症感染的治疗已成为临床棘手的问题。因此，除常规K-B法药敏试验外，应考虑加作MIC测定和协同药敏试验。二、 生物学特性肠球菌属细菌呈卵圆形，单个或短链排列，直径0.5-1.0m，革兰染色阳性，无鞭毛、无芽孢，少数菌株有荚膜。本属细菌为需氧或兼性厌氧，对营养要求较高，分离培养时通常用5%羊或马血琼脂平板培养基。最适温度为35，在10、45和pH9.6条件下均可生长。在血琼脂平板上经35培养24-48小时，形成灰白色不透明或半透明的圆形菌落，或溶血，触酶试验一般为阴性，有些菌株可产生假阳性。三、 鉴定表 肠球菌属常见菌种的生化特征菌种精氨酸甘露醇山梨醇阿拉伯糖蔗糖棉子糖胆汁七叶苷6.5%Nacl生长动力粪肠球菌+-+-+-屎肠球菌+-+-+-鸟肠球菌-+-+-坚韧肠球菌+-+-铅黄肠球菌+-+孟氏肠球菌+-+-第四章 奈瑟菌属一、 奈瑟菌属介绍奈瑟菌属（Neisseria）是一群触酶、氧化酶试验均为阳性的革兰阴性球菌，主要包括脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、粘液奈瑟菌等11个种，临床上以脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌最为重要。脑膜炎奈瑟菌主要引起人类的流行性脑脊髓膜炎，也可引起关节炎、化脓性眼结膜炎、心内膜炎和原发性肺炎。淋病奈瑟菌是淋病的病原菌，可引起尿道炎、阴道炎，新生儿经过产道时被感染，可引起淋球菌性结膜炎。二、 生物学特征脑膜炎奈瑟菌为革兰阴性双球菌，肾形或咖啡豆状，常成双排列，凹面相对，菌体直径为0.6-0.9m，无鞭毛、无芽孢。本菌属细菌初次分离时需在5%-10%二氧化碳环境中生长。最适温度35（某些菌种30以下不生长），最适pH为7.4-7.6。在血琼脂平板上，形成灰色、光滑、湿润、有光泽、透明或半透明似露滴状菌落，直径1.0-2.0mm，氧化酶、触酶试验阳性。分解葡萄糖和麦芽糖，产酸不产气，不分解其他糖类和蛋白质。淋病奈瑟菌的形态与脑膜炎奈瑟菌相似，营养要求比脑膜炎奈瑟菌更高，只能在巧克力平板和专用选择性培养基中生长良好，只分解葡萄糖不分解其他糖类。脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌均可发生自溶现象，因此，留取标本后应保温、保湿及时分离培养。三、 鉴定脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌的培养标本（如脑脊液、血液、瘀点穿刺液、尿道分泌物、阴道分泌物等），应立即送检，接种血平板或巧克力平板，35、5%-10%二氧化碳环境下培养。同时，应将标本涂片，革兰染色，油镜下观察若有革兰阴性双球菌，尤其在白细胞内者有助于临床对本病的诊断。表 奈瑟菌属与相关菌属的主要生物学特征菌属形态氧化酶触酶DNA酶三丁酸甘油脂酶麦康凯生长奈瑟菌属球形+-莫拉菌属球杆状+-布兰汉菌属球形+-不动杆菌属球杆状-+-+表 卡他莫拉菌和奈瑟菌属内菌种的主要生物学特征菌种营养琼脂生长葡萄糖麦芽糖乳糖蔗糖果糖硝酸盐还原DNA酶脑膜炎奈瑟菌d+-淋病奈瑟菌-+-卡他莫拉菌+-+解乳糖奈瑟菌+-干燥奈瑟菌+-+-淡黄奈瑟菌+-dd-粘液奈瑟菌+-+-灰色奈瑟菌+-注：+ 表示90%以上的菌株阳性；- 表示90%以上的菌株阴性；d 表示不定第五章 棒状杆菌属（Corynebacterium）一、 棒状杆菌属介绍棒状杆菌属是一群菌体一端或两端膨大呈棒状的革兰阳性杆菌，菌体染色不均一、呈不规则排列。属内包括16个种，其中白喉棒状杆菌、假白喉棒状杆菌、假结核棒状杆菌、溃疡棒状杆菌、杰氏棒状杆菌、纹带棒状杆菌和解脲棒状杆菌等与人类疾病有关。临床上以白喉棒状杆菌最为重要。二、 生物学特征白喉棒状杆菌为革兰阳性，菌体细长微弯，菌体一端或两端粗大，呈棒状，排列不规则，常呈X、V、L、Y或删栏状。染色不均匀，用美蓝、甲苯胺蓝染色，菌体一端或两端可见浓染颗粒（异染颗粒）。无鞭毛、无芽孢、无荚膜。白喉棒状杆菌营养要求较高，在普通培养基上生长不良，在血琼脂平板上形成较小、圆形、凸起、光滑、灰白色菌落，似干漯状，无或有狭窄溶血坏。在亚碲酸钾血琼脂平板上形成黑色或灰黑色菌落。白喉棒状杆菌的主要致病因素为外毒素。该菌侵犯口咽、鼻咽等部位，局部形成灰白色假膜。产生的外毒素可损害心肌和神经系统，病死率高。此外，本菌可侵犯眼结膜、外耳道、阴道和皮肤伤口等。三、 鉴定表 棒状杆菌属内各菌种的主要生物学特征及鉴别菌种触酶动力脲酶-溶血硝酸盐还原明胶水解葡萄糖麦芽糖蔗糖白喉棒状杆菌+-d+-+-溃疡棒状杆菌+-+-+-假白喉棒状杆菌+-+-+-假结核棒状杆菌+-+d-+-干燥棒状杆菌+-+-+纹带棒状杆菌+-+-+-+微小棒状杆菌+-+d解脲棒状杆菌+-+d-杰氏棒状杆菌+-+d-牛棒状杆菌+-+-马红球菌+-dddd-注：d 为反应不定。第六章 李斯特菌属一、 李斯特菌属介绍李斯特菌属 （Listeria）为无芽孢革兰阳性杆菌，包括产单核细胞李斯特菌、伊凡诺夫李斯特菌、无害李斯特菌、格氏李斯特菌、默氏李斯特菌等9个种，只有产单核细胞李斯特菌对人和动物致病。可引起人脑脓肿、心内膜炎、胆管炎、骨髓炎、动脉炎和眼结膜炎等。二、 生物学特性革兰阳性的短小杆菌或球杆菌，菌体大小为0.4-0.5m0.5-2.0m,无芽孢、无荚膜，周身鞭毛（-），时鞭毛很少或无。需氧或微需养。在血琼脂平板上形成较小、圆形、光滑而有狭窄-溶血环的菌落，在液体培养基中呈均匀浑浊生长，在半固体培养基中，-时，动力自穿刺线向四周蔓延生长，呈倒伞状。触酶试验阳性，试验阳性。营养要求不高，-均能生长，由于其在能生长，故可进行冷增菌。三、 鉴定本菌容易被认为是污染的杂菌而丢弃，幼龄培养呈革兰阳性，小时后多转为革兰阴性。因此当遇到培养有动力的杆菌，而按照革兰阴性杆菌鉴定不符时，应考虑到李斯特菌的可能。本菌也可能因培养条件不同而呈链状，培养往往无动力，阳性，常误认为群链球菌，链球菌触酶试验阴性可与之鉴别。表 常见李斯特菌属各菌种的生物学特性菌名试验甘露醇木糖鼠李糖硝酸盐金葡菌马红球菌产单核细胞李斯特菌+-+-无害李斯特菌-d-伊凡诺夫李斯特菌-+-+-格氏李斯特菌-+-默氏李斯特菌-+-d+注： d 为反应不定第七章 奴卡菌属一、 奴卡菌属介绍奴卡菌属（Nocardia）是一群需氧的、能形成菌丝的革兰阳性菌，包括9个种，与医学有关的有星形奴卡菌、巴西奴卡菌、豚鼠奴卡菌、南非奴卡菌、鼻疽奴卡菌、新星奴卡菌等6个种，与人类疾病关系最大的是星形奴卡菌和巴西奴卡菌，多为外源性感染。星形奴卡菌主要通过呼吸道入侵肺部，引起化脓性炎症与坏死，症状类似结核病，病灶可向其他组织器官扩散，进而引起脑膜炎、腹膜炎等。巴西奴卡菌可通过损伤的皮肤侵犯皮下组织，产生慢性化脓性肉芽肿，称为分枝菌病，好发于脚和腿部。二、 生物学特性革兰阳性，菌体为丝状，称为菌丝或菌丝体。培养早期菌体裂解为球形或杆状，分枝状菌丝较少，培养后期，可见丰富的菌丝体。抗酸染色为弱阳性。在沙保罗琼脂或普通琼脂培养基上，室温或35均可缓慢生长，菌落表面皱褶，呈颗粒状。不同菌种可产生不同的色素，星形奴卡菌的菌落黄色或深橙色，表面无白色菌丝；巴西奴卡菌菌落有白色菌丝。三、 鉴别要点1、 本菌特征 革兰阳性，菌体为丝状，抗酸染色弱阳性，生长缓慢，菌落较小，分解葡萄糖，不分解酪蛋白、酪氨酸和黄嘌呤。2、 与分枝杆菌的鉴别 星形奴卡菌革兰染色性强，抗酸染色性弱，盐酸乙醇易脱色，菌体呈丝状；分枝杆菌抗酸性强，不易脱色，革兰染色弱。3、 与红球菌属的鉴别 星形奴卡菌对青霉素耐药，红球菌则敏感。4、 与棒状杆菌的鉴别 星形奴卡菌菌体呈丝状，而棒状杆菌属菌体一端或两端膨大呈棒状。表 奴卡菌属各菌种的生物学特性菌种45生长葡萄糖明胶液化鼠李糖酪蛋白黄嘌呤淀粉水解星形奴卡菌+-巴西奴卡菌-+-+-鼻疽奴卡菌+-+-豚鼠奴卡菌+-+-新星奴卡菌-+-南非奴卡菌-+-+第八章 军团菌属一、 军团菌属介绍军团菌（Legionella）于1976年首次在美国费城一次退伍军人集会后的呼吸道感染标本中分离到，故称作军团菌。该菌是一种具有高度爆发性、流行性、病死率较高的呼吸道传染病的病原菌，该菌属包括39个种（59个血清型），已从人体分离出嗜肺军团菌、米克戴德军团菌、伯兹曼军团菌、约旦军团菌、长滩军团菌、瓦兹魏斯军团菌等19种。军团菌可引起军团菌病，最主要是由嗜肺军团菌引起的一种全身性疾病，可分为轻型和重症型。轻型类似流感，重症型是以肺部感染为主的多器官损害，发病初期有胸痛、咳嗽、发热等症状，最终导致呼吸衰竭死亡。军团菌也是医院感染的病原菌之一。二、 生物学特性革兰阴性纤细小杆菌，有多形性，菌体大小为（2-3m）（0.3-0.4m），菌体呈杆状，有时为线状，无芽孢、无荚膜，具有极端鞭毛或侧鞭毛，能运动。初次分离在含有2.5%-5.0%二氧化碳环境中生长良好。最适温度为35，最适pH为6.9-7.0。营养要求较为苛刻，半胱氨酸和铁是培养军团菌的必需物质，普通血琼脂平板不生长。从临床或环境标本中分离军团菌时，需先对标本作酸处理（军团菌耐酸而其他杂菌则易被酸杀灭），并使用选择性琼脂平板（BCYE），以提高军团菌的检出率。触酶阳性，氧化酶随菌种而异，能液化明胶，脲酶和硝酸盐还原试验阴性，不分解糖类产酸，大部分菌种可产生-内酰胺酶，只有嗜肺军团菌能水解马尿酸。表 军团菌属常见菌种的主要特征菌种氧化酶触酶明胶液化动力马尿酸水解脲酶葡萄糖产酸嗜肺军团菌+-长滩军团菌+-约旦军团菌+-伯兹曼军团菌-+-米克戴德军团菌+-+-瓦兹魏斯军团菌-+-第九章 弧菌科一、 弧菌科介绍弧菌科包括弧菌属、气单胞菌属、邻单胞菌属和发光杆菌属。弧菌科细菌通常为直的或弯曲的革兰阴性杆菌，靠极生鞭毛运动，兼性厌氧，大多数菌株氧化酶试验阳性。二、 弧菌科分类弧菌科内4个属的鉴别见表表 弧菌科的属间鉴别弧菌属气单胞菌属邻单胞菌属发光杆菌属甘露醇发酵+-生长需要Na+-+O/129敏感+-+肌醇产酸-+-第一节 弧菌属一、 弧菌属介绍弧菌属有近40个种，其中霍乱弧菌、拟态弧菌、副溶血弧菌、河弧菌、溶藻弧菌、创伤弧菌等12个种与人类疾病有关。霍乱弧菌（V.cholerae）是烈性肠道传染病。霍乱弧菌可分为古典生物型和El Tor生物型；根据菌体抗原（O抗原）又可分为155个血清群，其中O1血清群和O139血清群能引起霍乱的发病和流行，是霍乱的病原菌。根据O1 群菌其O抗原中的ABC因子，又可进一步将其分为小川（AB）、稻叶（AC）和彦岛（ABC）等三个血清型。二、 生物学特性革兰阴性，菌体弯曲呈弧形或逗点状，菌体一端有单鞭毛，悬滴法直接镜检可见活泼的动力。霍乱弧菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，为兼性厌氧菌。生长温度为16-42，最适生长温度为37，适宜的pH为7.2-7.4，但在pH6.0-10均能生长，对碱的耐受性大，对酸敏感，在pH6.0以下很快死亡。在碱性琼脂平板上，可形成中等大小、圆形、表面光滑、边缘整齐、无色透明的菌落。在TCBS琼脂平板上，可形成较大、黄色的菌落。氧化酶试验阳性，发酵葡萄糖、蔗糖、甘露醇，不发酵乳糖和阿拉伯糖，动力、赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶、硝酸盐还原均为阳性。三、鉴别要点1、 与气单胞菌属、邻单胞菌属的鉴别见表2、 在选择琼脂平板上发现可疑菌落时，应结合临床症状和大便性状，考虑有霍乱弧菌可能时，应直接作O1群和O139群玻片凝集试验。凝集试验阳性者可作为霍乱弧菌的初步诊断，立即报告临床医师，并继续作生化反应及其他试验加以确诊。表 弧菌属与类似菌属的鉴别菌属O/129肌醇明胶液化甘露醇精氨酸双水解酶赖氨酸脱羧酶弧菌属S-+-+气单胞菌属R-+邻单胞菌属S+-+表 弧菌属常见菌种的生物学特性生化反应霍乱弧菌拟态弧菌副溶血弧菌创伤弧菌溶藻弧菌河弧菌海鱼弧菌麦氏弧菌氧化酶+-硝酸盐+-赖氨酸+-d-鸟氨酸+dd-精氨酸-+dV-P试验+-+-+葡萄糖产气-蔗糖+-+-+阿拉伯糖-+-+-d甘露醇+-+-+乳糖-+-d无盐+-10g/L氯化纳+60g/L氯化纳dd+d+100g/L氯化纳-+-注：d 为反应不定。第二节 气单胞菌一、 气单胞菌属介绍气单胞菌属（Aeromonas）包括14个基因种，其中嗜水气单胞菌、豚鼠气单胞菌、维罗纳气单胞菌、舒氏气单胞菌、简氏气单胞菌等11个种已被命名。嗜水气单胞菌临床上最为常见。气单胞菌为水中常居菌，可引起人类肠道感染和肠外感染。肠道感染主要表现为腹泻；肠外感染主要为菌血症、伤口感染、心内膜炎、脑膜炎等疾病。 二、嗜水气单胞菌（一）生物学性状嗜水气单胞菌为无芽孢、无荚膜、有动力的革兰阴性杆菌，大小为1-3.5m0.3-1.0m，在液体培养基中的鞭毛为单极毛，在固体培养基中的幼嫩培养物为周生鞭毛。最适生长温度为28，对营养要求不高可在普通培养基上生长，在血琼脂平板上，经35培养18-24h，可长出2-3mm大小、呈狭窄的-溶血的圆形、光滑、灰白色菌落。本菌氧化酶、触酶试验阳性，能液化明胶，产生DNA酶。发酵葡萄糖、蔗糖、阿拉伯糖，产酸产气，不发酵乳糖，胆汁七叶苷、精氨酸双水解酶、赖氨酸脱羧酶和硝酸盐还原试验均为阳性，O/129耐药。（二）鉴别要点1、 本菌特征：氧化酶试验阳性，发酵葡萄糖、阿拉伯糖等多种糖类，硝酸盐还原试验阳性，O/129耐药。2、 与弧菌属和邻单胞菌属的鉴别：嗜水气单胞菌对O/129耐药，可资鉴别。后两者的区别是邻单胞菌在TCBS琼脂平板上和含60g/L氯化钠的培养基中不生长，而弧菌属则相反。3、 与肠杆菌科细菌的鉴别：嗜水气单胞菌氧化酶试验阳性，而肠杆菌科细菌氧化酶试验为阴性。4、 与氧化酶试验阳性的非发酵菌的鉴别：嗜水气单胞菌葡萄糖O/F为发酵型，而氧化酶试验阳性的非发酵菌葡萄糖O/F为氧化型或产碱型。表 气单胞菌属和邻单胞菌属常见菌种的生物学特征菌种O/129吲哚V-P精氨酸赖氨酸鸟氨酸葡萄糖阿拉伯糖蔗糖溶血肌醇嗜水气单胞菌R+-+-简氏气单胞菌R+-+-+-舒氏气单胞菌R-+-+-豚鼠气单胞菌R+-+-+-维罗纳气单胞菌R+-+-+-类志贺邻单胞菌S+-+-+第三节 邻单胞菌属一、邻单胞菌属介绍邻单胞菌属（Plesiomonas）只有1个种，即类志贺邻单胞菌。可引起肠道内感染，表现为腹泻，与进食生水和海产品有关，好发于温暖的季节。肠外感染可引起菌血症、脑膜炎等疾病。二、生物学特性志贺邻单胞菌为革兰阴性小杆菌，无芽孢、无荚膜、有2-5根极端鞭毛，有动力。本菌为兼性厌氧菌，最适温度为37，在8-44均能生长。营养要求不高，能在普通琼脂培养基上生长。在血琼脂平板上形成灰色、光滑、不透明、无溶血、大小为1.5mm的菌落，在麦康凯琼脂平板上形成无色菌落。氧化酶试验阳性，发酵葡萄糖、麦芽糖，不发酵甘露醇、蔗糖，动力、精氨酸双水解酶、赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶和硝酸盐还原试验均为阳性。对O/129敏感。三、鉴别要点1、本菌特征：氧化酶、动力、肌醇、精氨酸双水解酶、赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶和硝酸盐还原试验均为阳性，对O/129敏感。2、与弧菌属的鉴别：类志贺邻单胞菌肌醇试验阳性，弧菌属细菌则为阴性。3、 与肠杆菌科细菌的鉴别：类志贺邻单胞菌氧化酶试验阳性，而肠杆菌科细菌氧化酶为阴性。4、 与氧化酶试验阳性的非发酵菌的鉴别：类志贺邻单胞菌葡萄糖O/F为发酵型，而氧化酶试验阳性的非发酵菌葡萄糖O/F为氧化型或产碱型。第十章 布兰汉菌亚属一、布兰汉菌亚属介绍及生物学特性布兰汉菌亚属（subgenus Branhamella）是一类革兰阴性球菌，包括卡他布兰汉菌、猪布兰汉菌、羊布兰汉菌和兔布兰汉菌4个种，仅卡他布兰汉菌对人类有致病性。卡他布兰汉菌又称卡他球菌，为革兰阴性双球菌，形态呈咖啡豆状，无芽孢、无荚膜、无鞭毛。本菌对营养无特殊要求，在普通培养基上能生长，为需氧菌，在18-42均能生长，最适温度为37，在血琼脂平板上经37培养18-24小时，可形成灰白色或红棕色、光滑、圆凸、不透明、不溶血的菌落，继续培养时菌落表面干燥、坚韧、边缘不整齐，如用接种环推移，整个菌落可移动，不易在盐水中乳化。在肉汤培养基中形成颗粒状沉淀。氧化酶、触酶和DNA酶试验均为阳性，不分解任何糖类，还原硝酸盐。卡他布兰汉菌是人类和其他动物上呼吸道的正常寄生菌之一，现已证实本菌可引起下呼吸道感染和结膜炎、中耳炎、鼻窦炎、支气管炎，偶尔可引起菌血症、心内膜炎、脓胸、脑膜炎、尿道炎等。二、鉴别要点1、 本菌特征：革兰阴性双球菌，在血琼脂平板上菌落灰白色，推移菌落时有特殊的手感，不分解糖类，氧化酶、DNA酶和硝酸盐还原试验均阳性。2、 与粘液奈瑟菌的鉴别：两者均还原硝酸盐，但卡他布兰汉菌不分解任何糖类，DNA酶试验阳性；粘液奈瑟菌能分解葡萄糖、蔗糖等，DNA酶试验阴性。3、 与莫拉菌属的鉴别：卡他布兰汉菌为球菌，成双或肾形排列，DNA酶试验阳性；莫拉菌属为球杆菌，DNA酶试验阴性。表 卡他布兰汉菌与相似菌的生物学特性菌种镜下形态菌落特征DNA酶触酶硝酸盐葡萄糖卡他布兰汉菌双球菌灰白色，干燥+-粘液奈瑟菌双球菌黄绿色，光滑-+金氏菌属球杆菌米黄色或灰棕色，光滑-+莫拉菌属杆菌或球杆菌灰白色，光滑-+-第十一章 假单胞菌属假单胞菌属（Pseudomonas）是一群专性需氧、氧化酶阳性、无荚膜、无芽孢的革兰阴性杆菌，有动力的细菌为一端单鞭毛或丛鞭毛。分为- 5个群、20多个种。第一节 铜绿假单胞菌一、铜绿假单胞菌介绍铜绿假单胞菌（P.aeruginosa）是假单胞菌属的代表菌种，也是临床上引起各种感染的主要致病菌。二、生物学性状铜绿假单胞菌为无芽孢细长的革兰阴性杆菌，大小为1.5-3.00.5um，菌体长短不一，短的呈球杆状，长的为丝状。无荚膜，菌体一端有单鞭毛，运动活泼。本菌为专性需氧菌，生长温度范围为20-42，最适温度为35。对营养无特殊要求，在普通培养基上生长良好，在血琼脂平板上经35培养18-24小时，可形成大而扁平、湿润、有金属光泽、有特殊气味（生姜味）的灰绿色、蓝绿色菌落，可形成透明溶血环。在麦康凯琼脂平板上，可形成5种不同的菌落。典型型：菌落不规则，边缘呈伞状伸展；大肠菌样型：菌落圆形凸起，无色透明，似大肠埃希菌菌落；粗糙型：菌落呈纽扣状，表面粗糙，或菌落中央隆起边缘扁平；粘液型：菌落光滑，隆起，呈粘液状，似肺炎克雷伯菌菌落；侏儒型：生长缓慢，培养18小时尚不见菌落，24小时后才有细小菌落。铜绿假单胞菌产生两种色素，一种为绿脓素，溶于水和氯仿，系蓝绿色色素；另一种为荧光素，只溶于氯仿，为绿色荧光素。铜绿假单胞菌氧化酶试验阳性，分解葡萄糖，不分解乳糖、麦芽糖、甘露醇和蔗糖，动力、枸橼酸盐、精氨酸双水解酶和硝酸盐还原试验均阳性，吲哚、赖氨酸和鸟氨酸脱羧酶试验为阴性。三、鉴别要点1、 本菌特征：典型的菌落和蓝绿色色素或荧光素，有生姜味，动力、氧化酶试验阳性，4时不生长而在42时可以生长。2、 与荧光假单胞菌和恶臭假单胞菌的鉴别：三者均可产生荧光色素，但铜绿假单胞菌42时生长，而后两者则不能生长。3、 与其他假单胞菌及类似菌的鉴别：见表表 常见假单胞菌及类似菌的生物学特性菌种氧化酶42生长硝酸盐还原明胶葡萄糖木糖麦芽糖甘露醇铜绿假单胞+d+-荧光假单胞菌+-+-恶臭假单胞菌+-+-斯氏假单胞菌+d+-+门多萨假单胞菌+-+d-类产碱假单胞菌+-产碱假单胞菌+-d-浅黄金色单胞菌-+dd+d栖稻假单胞菌-+注：d 为反应不定。第二节 恶臭假单胞菌一、恶臭假单胞菌介绍恶臭假单胞菌（P.putida）也是一种临床上较常见的假单胞菌。二、生物学特性本菌为革兰阴性杆菌，有极端鞭毛，能运动，无芽孢，无荚膜。最适生长温度为25-30，多数菌株在4能生长，菌落与铜绿假单胞菌相似，但不产生绿脓素，只产生荧光素。在血琼脂平板上形成大而湿润、灰色的菌落。陈旧培养物有臭鱼味。氧化酶试验阳性，分解葡萄糖、果糖、不分解蔗糖，葡萄糖O/F为氧化型，动力试验、精氨酸双水解酶试验阳性，鸟氨酸脱羧酶、赖氨酸脱羧酶试验阴性，不液化明胶。恶臭假单胞菌为鱼类的一种病原菌，常可从腐败的鱼类中检出，可引起人类呼吸道、泌尿道和伤口感染，也可引起化脓性关节炎和菌血症，并常污染血库血。三、鉴别要点1、 本菌特征：氧化酶试验阳性，葡萄糖O/F为氧化型，精氨酸双水解酶试验阳性，42环境中不生长，大部分菌株产荧光素，不液化明胶。2、 与荧光假单胞菌的鉴别：两者菌落形态相似，区别是恶臭假单胞菌不能液化明胶。第十二章 莫拉菌属一、莫拉菌属介绍莫拉菌属（Moraxella）现有2个亚属，即莫拉菌亚属和布兰汉亚属。莫拉菌属莫拉亚属包括腔隙莫拉菌、犬莫拉菌、非液化莫拉菌、亚特兰大莫拉菌、林肯莫拉菌、奥斯陆莫拉菌和苯丙酮酸莫拉菌7个种。本属菌为条件致病菌，可引起人类肺炎、脑脓肿或脑膜炎、心内膜炎、败血症、中耳炎、眼结膜炎等。二、生物学特性莫拉亚属为革兰阴性球杆菌，有时可呈多形性，成双或短链状。无芽孢和鞭毛，但有些菌株有荚膜。需氧，多数菌株在普通培养基上能生长。在血琼脂平板上生长成光滑的半透明菌落，直径为0.1-0.5mm，48h 后菌落直径可达1.0mm，不溶血。氧化酶和触酶试验阳性，不分解任何糖类，不产生吲哚，在65g/L氯化纳肉汤中不生长。三、鉴别要点1、 本菌特征：氧化酶试验阳性，不分解任何糖类，无动力。2、 与产碱杆菌属细菌的鉴别：前者无动力，后者有动力。3、 与不动杆菌属的鉴别：前者氧化酶试验阳性，后者氧化酶试验阴性。4、 与奈瑟菌属的鉴别：前者不分解任何糖类，大多数奈瑟菌属细菌可分解葡萄糖等糖类。5、 本菌属各菌种间的鉴别见表表 莫拉菌属各菌种的生物学特性菌种麦康凯尿素酶苯丙氨酸明胶液化硝酸盐还原DNA酶腔隙莫拉菌-d+-非液化莫拉菌-+-犬莫拉菌+-+林肯莫拉菌-/-奥斯陆莫拉菌d-d-亚特兰大莫拉菌+-苯丙酮酸莫拉菌d+-d-注：d 为反应不定。第十三章 肠杆菌科一、肠杆菌科介绍肠杆菌科是一群生物学性状相似的革兰阴性杆菌，大多菌株寄居在人和动物肠道中，可随着人和动物的排泄物广泛分布于水、土壤和腐败的物质中。除鼠疫耶尔森菌、伤寒沙门菌和痢疾志贺菌等少数细菌对人类有较强的致病作用，大多数是肠道的正常菌群，但当机体状态改变或细菌进入肠道以外的部位，也可作为条件致病菌而引起感染，如菌血症、脑膜炎、肺炎、肾盂肾炎或伤口感染等。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌、粘质沙雷菌和枸橼酸杆菌等是引起院内感染的最重要肠杆菌科细菌。二、生物学特性革兰阴性杆菌，大小为（0.3-1.0）um（1.0-6.0）um、无芽孢、多数菌种有鞭毛，对营养要求不高，绝大多数菌种在普通培养基和麦康凯琼脂上生长良好。兼性厌氧，发酵葡萄糖产酸或产酸产气。氧化酶试验阴性，触酶试验阳性，还原硝酸盐为亚硝酸盐。三、鉴定目前，肠杆菌科内有30多个菌属。虽然本科与其他菌科生物学性状有所不同，但仍有交叉，因此，在鉴定时，首先应注意与其他菌科的鉴别。肠杆菌科细菌鉴定应按科 属 种顺序进行。根据苯丙氨酸脱氨酶及葡萄糖酸盐试验可将肠杆菌科的常见菌属分为3大群。（1） 苯丙氨酸阳性、葡萄糖酸盐阴性：此群包括变形杆菌属、普罗威登斯菌属和摩根菌属，3个属可通过硫化氢、鸟氨酸和枸橼酸盐3个试验加以区别。（2） 苯丙氨酸阴性、葡萄糖酸盐阳性：此群包括克雷伯菌属、肠杆菌属、沙雷菌属和哈夫尼亚菌属，各菌之间可通过动力、山梨醇、DNA酶、棉子糖等试验加以区别。（3） 苯丙氨酸和葡萄糖酸盐均阴性：此群包括埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属、枸橼酸杆菌属、爱德华菌属和耶尔森菌属，各菌之间可通过硫化氢、动力、枸橼酸盐、吲哚、赖氨酸、尿素酶等试验加以区别。第一节 埃希菌属一、埃希菌属介绍本属包括大肠埃希菌、赫尔曼埃希菌、创伤埃希菌、费格森埃希菌和蟑螂埃希菌5种。代表菌株为大肠埃希菌，该菌为临床常见分离菌之一。二、生物学特性埃希菌属大多数菌株能发酵乳糖产酸或产酸产气，产生吲哚，甲基红试验阳性，V-P试验阴性，不分解尿素、不利用枸橼酸盐、肌醇、苯丙氨酸脱氨和葡萄糖酸盐等试验均为阴性。一般不产生硫化氢。大肠埃希菌某些菌株动力可为阴性，迟缓发酵或不发酵乳糖，不产气，通常称为大肠埃希菌不活泼株，易与志贺菌相混淆。大肠埃希菌某些血清型可引起人类腹泻，如致病性大肠埃希菌、产肠毒素大肠埃希菌、侵袭性大肠埃希菌、肠出血性大肠埃希菌和肠聚集性大肠埃希菌。血清型的区别主要靠血清学试验、肠毒素检测等。（1） 致病性大肠埃希菌（EPEC）：是流行性婴儿腹泻的病原菌，多发于夏秋季节，具有高度传染性。临床常见发热、呕吐、水样便等症状，通常便中有粘液而无血。以O55、O111、O119、O126、O128、O142血清型最常见。（2） 产肠毒素大肠埃希菌（ETEC）：是引起旅游者腹泻和发展中国家婴幼儿急性腹泻的病原菌。主要通过食入污染的食物和水而感染。临床表现主要有恶心、腹部痉挛疼痛，低热和突然发作、大量的水样便等。ETEC可产生两种肠毒素，一种是耐热肠毒素（ST），另一种是不耐热肠毒素（LT）。最多见的血清型有O6、O8、O15、O25、O78、O115和O128。（3） 肠侵袭性大肠埃希菌（EIEC）：EIEC与志贺菌相似，不发酵或缓慢发酵乳糖，发酵葡萄糖不产气，不产生赖氨酸脱羧酶，动力试验阴性。临床症状与细菌性痢疾相似。常见的血清型有O12、O28、O29、O112、O115、O124、O136、O143、O144、O152、O164。（4） 肠出血性大肠埃希菌（EHEC）：EHEC血清型超过50种，而最重要的是O157：H7，其次为O26：H11。人类感染大肠埃希菌O157：H7主要由于食用消毒不彻底的牛奶、肉类等而引起爆发性出血性结肠炎，也可散发，少数病例可并发溶血性尿毒综合征。（5） 聚集性大肠埃希菌EaggEC：EaggEC曾命名为肠粘附性大肠埃希菌（EAEC）。EaggEC可引起慢性腹泻，患儿可有水样腹泻、呕吐、脱水，偶有腹痛、发热和血样便等症状。第二节 志贺菌属一、志贺菌属介绍志贺菌属（Shigella）是人类主要肠道病原菌之一，主要引起人类细菌性痢疾，其中福氏和宋内志贺菌最为常见，一年四季均可发病，以夏秋季发病率最高。该菌属通常随饮水、食物等经消化道感染，侵犯肠粘膜而引起溃疡，粪便呈脓血粘液状，并含有大量脓细胞。该属分为4个血清群和38个血清型。二、生物学特性革兰阴性杆菌，无鞭毛、无芽孢、无荚膜。需氧或兼性厌氧。最适生长温度为37，最适pH7.2-7.4。对营养要求不高，普通培养基上生长良好。液体培养基中呈均匀混浊生长。血琼脂平板上形成灰白色、半透明、表面光滑湿润、边缘整齐、中等大小菌落，不溶血。在麦康凯、SS等选择性培养基上可形成无色透明的中等大小菌落。宋内志贺菌菌落较大，由于迟缓分解乳糖，菌落可呈淡粉红色。志贺菌属一般只有菌体（O）抗原，而无鞭毛（H）抗原。根据菌体抗原的不同，可将志贺菌