生防真菌球毛壳菌(Chaetomium globosum)的原生质体制备条件优化与外源基因表达.doc

从健康毛白杨枝条上分离出的优势菌种球毛壳菌ND35是一种广谱拮抗性真菌。经检测，它对立枯丝核菌、瓜果腐霉、苹果树腐烂病菌和杨树腐烂病菌等多种林果病原菌有拮抗作用，特别是对树皮腐烂病菌的抗生作用明显，具有在枝干溃疡、果树腐烂及苗木立枯等林果病害的生物防治中开发应用的潜力。生防真菌球毛壳菌(Chaetomium globosum)的原生质体制备条件优化与外源基因表达【摘要】：正球毛壳菌作为一种有效的生防真菌,能对多种植物病原真菌产生拮抗作用。有文献报道,毛壳菌可预防谷物秧苗的枯萎病、甘蔗猝倒病,降低由镰刀菌引起的番茄枯萎病、黑星菌引起的苹果斑点病等的发病率,且对立枯病丝核菌、甘蓝格链孢、拟茎点霉属、毛盘孢属、葡萄孢属等病原菌的生长有一定的抑制作用, 对山杨根腐病(Fusarium acuminatum)、小麦斑枯病(Cochliobolus sativus)也有明显的拮抗作用。对于这种重要的生防真菌,历年来研究重点主要集中于其抗生性物质的合成及活性方面,而对其转基因方面的报道鲜少见到。而原生质体则（这一部分不完整，没法下载）球毛壳ND35菌株的促生、抗病和抗旱作用及机制初探内生真菌球毛壳（ ）是从一株健康毛白杨（ ）中分离得到的优势内生真菌菌株。表现出对多种病原真菌的拮抗活性，其次 生代谢物质对多种植物有较好的促生作用，并且能增强其抗病性和抗旱性。本文研究了 球毛壳对拟南芥，板栗、核桃的部分促生效果；检测了球毛壳发酵液中的 促进植物生长发育的生长调节物质；测试了麦角甾醇和赤霉素对黄瓜苗期生长的促生效 果。研究了球毛壳对立枯丝核菌黜侵染的杨树组培苗防御酶活性的变化；初 步研究了在干旱胁迫下，球毛壳对黄瓜苗生长和部分抗旱生理指标的影响。试验 结果如下： 球毛壳的促生试验显示，球毛壳处理的拟南芥根长提高，侧根 数提高。核桃在播种时接种球毛壳后，一年生的核桃苗高比未接种的植株 平均高出，而地径比未接种的植株平均高出；早实板栗在接种球毛壳 三年后，处理组地径比对照组高；光化板栗在接种球毛壳二年后， 处理组地径比对照组高。 高效液相色谱检测到球毛壳菌株发酵液中存在麦角甾醇（）、赤霉 素（）、玉米素（）及吲哚丁酸（）等促进植物生长发育的生长调节物质。 检测赤霉素和麦角甾醇促生效果，结果显示：球毛壳发酵液提取物赤霉素和麦角 甾醇对黄瓜促生效果显著，而且在对根长的促生效果上，赤霉素提取物明显要高于标准 品；在对苗高的促生效果上，麦角甾醇提取物明显要高于标准品。 球毛壳接种杨树组培苗两天后，再用强致病性的立枯丝核菌黜菌株挑战 接种，对寄主植物的防御酶活性产生显著影响。单独接种球毛壳后的第三、四天 的酶比活力开始高于对照组及单独接种组，单独接种凡和同时接种球毛壳 和的处理组自第五天起的酶比活力开始上升，在第六天达到最高，且同时接 种球毛壳和风在第五、六天分别比单独接种黜的处理组高和； 单独接种球毛壳处理组只比对照组的酶比活力高，在接种风第五天开始 活性明显上升，到达第七天时，同时接种球毛壳和黜的处理组比单独接 种的处理组活性高；单独接种球毛壳两天后的酶比活力 开始显著高于对照组及单独接种黜组，同时接种球毛壳和黜一的处理组在第 球毛壳菌株的促生、抗病和抗旱作用及机制初探 五天达到峰值。球毛壳对强致病性的立枯丝核菌的拮抗效果为，说 毛壳对提高杨树组培苗的抗病性有一定作用。 球毛壳对黄瓜抗旱作用的影响，设定五个水分梯度，分别为最大持水 ，和。检测处理后黄瓜的根长、苗高、鲜重及丙二醛， 酸，等指标。结果显示：接种球毛壳后在最大持水量为时苗高、 表现出显著差异，根长在最大持水量为和