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十艾滋病机会性感染及性病实验室检查 2018/4/26褚云卓1艾滋病机会性感染及性病实验室检查艾滋病机会性感染及性病实验室检查中国医大一院检验科褚云卓中国医大一院检验科褚云卓2018/4/26褚云卓2讲授内容 一、机会性感染病原学检查 二、性病实验室检查检查讲授内容 一、机会性感染病原学检查 二、性病实验室检查检查2018/4/26褚云卓3 一、机会性感染病原学检查 1、病毒感染 2、细菌感染 3、真菌感染 4、原虫感染 1、病毒感染 2、细菌感染 3、真菌感染 4、原虫感染2018/4/26褚云卓 41、病毒感染CMV感染?细胞学检查从尿液、脑脊液或受感染的肝、肺、胃等组织标本中，用姬姆萨或瑞氏染色法进行染色，可见核内和（或）胞质内含包涵体的巨大细胞，其周围有一条明亮带。 细胞学检查从尿液、脑脊液或受感染的肝、肺、胃等组织标本中，用姬姆萨或瑞氏染色法进行染色，可见核内和（或）胞质内含包涵体的巨大细胞，其周围有一条明亮带。 2018/4/26褚云卓5?病毒分离CMV病毒分离是诊断CMV感染最直接的方法，CMV具有种属特异性。 采取新鲜尿液、唾液、子宫分泌液、肝活检或尸检标本、外周血白细胞等，将标本接种于人胚肺二倍体传代细胞株上，培养24h后染色可见包涵体，而细胞病变需2病毒分离CMV病毒分离是诊断CMV感染最直接的方法，CMV具有种属特异性。 采取新鲜尿液、唾液、子宫分泌液、肝活检或尸检标本、外周血白细胞等，将标本接种于人胚肺二倍体传代细胞株上，培养24h后染色可见包涵体，而细胞病变需26周才能查见。 虽然病毒的分离能证明有CMV感染的存在，但并不一定能证明与疾病有病原学联系。 6周才能查见。 虽然病毒的分离能证明有CMV感染的存在，但并不一定能证明与疾病有病原学联系。 1、病毒感染CMV感染2018/4/26褚云卓6?抗体检测补体结合试验（CF）、间接血凝试验（PHA）、免疫荧光试验（IF）、免疫印迹试验（IB）、酶联免疫吸附试验（ELISA）及放射免疫试验（RIA）等。 全自动快速微粒子酶免疫检测法（MEIA）可对IgG和IgM作出定量分析。 抗体检测补体结合试验（CF）、间接血凝试验（PHA）、免疫荧光试验（IF）、免疫印迹试验（IB）、酶联免疫吸附试验（ELISA）及放射免疫试验（RIA）等。 全自动快速微粒子酶免疫检测法（MEIA）可对IgG和IgM作出定量分析。 1、病毒感染CMV感染2018/4/26褚云卓7?IgM阳性提示患者为现症感染或处于CMV感染活动期。 IgM阳性提示患者为现症感染或处于CMV感染活动期。 ?IgG阳性提示既往感染或潜伏感染。 ?IgG抗体滴度呈4倍或4倍以上增长时，表示有近期CMV感染。 IgG抗体滴度呈4倍或4倍以上增长时，表示有近期CMV感染。 ?严重的艾滋病患者血清抗CMV抗体可能阴性，故对艾滋病患者来说，CMV血清学检查阴性不能排除CMV感染。 严重的艾滋病患者血清抗CMV抗体可能阴性，故对艾滋病患者来说，CMV血清学检查阴性不能排除CMV感染。 2018/4/26褚云卓8?抗原检测早期抗原免疫荧光检查（DEAFF）将肺泡灌洗液、血液白细胞、尿液沉积物、活检或尸检样本接种于成纤维细胞，培养24小时后用荧光标记的单克隆抗体直接测定CMV的和蛋白，该法不仅快速而且敏感性和特异性均较高。 抗原检测早期抗原免疫荧光检查（DEAFF）将肺泡灌洗液、血液白细胞、尿液沉积物、活检或尸检样本接种于成纤维细胞，培养24小时后用荧光标记的单克隆抗体直接测定CMV的和蛋白，该法不仅快速而且敏感性和特异性均较高。 1、病毒感染CMV感染2018/4/26褚云卓9?CMV白细胞抗原血症检测用免疫细胞化学的方法在外周血白细胞核中对65kDa低基质磷蛋白（65kDalow-matrix phosphoprotein，pp65）进行检测，或利用流式细胞仪荧光标记的单克隆抗体测定白细胞中的CMV抗原，计数细胞病毒抗原的百分比，能提供定量数据。 该方法可在症状出现前检测到CMV病毒，可定量，以预测和区分CMV活动期和无症状感染。 可评价抗病毒治疗的效果以及检测中枢神经系统感染的艾滋病患者的脑脊液白细胞中CMV，其检测结果与用白细胞或血浆中CMV DNA扩增结果一致。 使早期免疫受抑制或艾滋病患者的活动性CMV感染的诊断成为可能，该方法简便、快速且敏感性高。 CMV白细胞抗原血症检测用免疫细胞化学的方法在外周血白细胞核中对65kDa低基质磷蛋白（65kDalow-matrix phosphoprotein，pp65）进行检测，或利用流式细胞仪荧光标记的单克隆抗体测定白细胞中的CMV抗原，计数细胞病毒抗原的百分比，能提供定量数据。 该方法可在症状出现前检测到CMV病毒，可定量，以预测和区分CMV活动期和无症状感染。 可评价抗病毒治疗的效果以及检测中枢神经系统感染的艾滋病患者的脑脊液白细胞中CMV，其检测结果与用白细胞或血浆中CMV DNA扩增结果一致。 使早期免疫受抑制或艾滋病患者的活动性CMV感染的诊断成为可能，该方法简便、快速且敏感性高。 2018/4/26褚云卓10?免疫组化检查将外周血白细胞用抗CMV单克隆抗体进行免疫组化染色也可快速作出诊断。 免疫荧光检测标本中的CMV早期抗原，阳性时提示CMV活动性感染。 免疫组化检查将外周血白细胞用抗CMV单克隆抗体进行免疫组化染色也可快速作出诊断。 免疫荧光检测标本中的CMV早期抗原，阳性时提示CMV活动性感染。 1、病毒感染CMV感染2018/4/26褚云卓11?CMV核酸检测检测和定量CMV DNA以及mRNA提取外周血白细胞、血浆、血清中CMV DNA，采用套式PCR可诊断活动型MCV感染，利用逆转录PCR技术检测外周血白细胞中MCV mRNA，能够测出完整的病毒复制周期，特异性较普通PCR检测DNA高。 CMV核酸检测检测和定量CMV DNA以及mRNA提取外周血白细胞、血浆、血清中CMV DNA，采用套式PCR可诊断活动型MCV感染，利用逆转录PCR技术检测外周血白细胞中MCV mRNA，能够测出完整的病毒复制周期，特异性较普通PCR检测DNA高。 1、病毒感染CMV感染2018/4/26褚云卓12艾滋病患者、器官移植者当处于CMV感染的活动期时，体内含有较高水平的CMV DNA，伴随着临床症状的出现和用药治疗的失败CMV DNA的拷贝数会快速升高。 因此，Rasmussen等用外周血白细胞中的CMV DNA含量来确定艾滋病患者的视网膜炎是否由CMV感染引起。 但是，用PCR方法检测CMV DNA还不能判定患者是处于活动期、无症状期还是潜伏期，不能精确评估疾病的进程和用药治疗的效果。 艾滋病患者、器官移植者当处于CMV感染的活动期时，体内含有较高水平的CMV DNA，伴随着临床症状的出现和用药治疗的失败CMV DNA的拷贝数会快速升高。 因此，Rasmussen等用外周血白细胞中的CMV DNA含量来确定艾滋病患者的视网膜炎是否由CMV感染引起。 但是，用PCR方法检测CMV DNA还不能判定患者是处于活动期、无症状期还是潜伏期，不能精确评估疾病的进程和用药治疗的效果。 2018/4/26褚云卓13?形态学检查取标本涂片，以姬姆萨和瑞氏染色，镜检可见多核巨细胞和核内嗜酸性包涵体。 形态学检查取标本涂片，以姬姆萨和瑞氏染色，镜检可见多核巨细胞和核内嗜酸性包涵体。 1、病毒感染HSV-1和HSV-2感染2018/4/26褚云卓14?病毒分离在感染最初几天取病损处的水泡液或刮片拭子或组织标本接种于HSV敏感的细胞中，常用的细胞为人胚肾、兔肾细胞、Hela细胞等。 接种4896小时后，如发现有细胞肿胀、变圆、细胞融合等细胞病变现象和特征性的核内包涵体便可作出诊断。 病毒分离在感染最初几天取病损处的水泡液或刮片拭子或组织标本接种于HSV敏感的细胞中，常用的细胞为人胚肾、兔肾细胞、Hela细胞等。 接种4896小时后，如发现有细胞肿胀、变圆、细胞融合等细胞病变现象和特征性的核内包涵体便可作出诊断。 1、病毒感染HSV-1和HSV-2感染2018/4/26褚云卓15?免疫学检测HSV抗原检测主要是用HSV特异性单克隆抗体，以免疫荧光或ELISA方法直接检测病人组织或分泌物细胞中的HSV抗原，若为阳性则诊断为近期感染HSV。 HSV抗体检测虽然是临床上最常用检测HSV感染的一种手段，但艾滋病患者通常会出现假阴性反应。 免疫学检测HSV抗原检测主要是用HSV特异性单克隆抗体，以免疫荧光或ELISA方法直接检测病人组织或分泌物细胞中的HSV抗原，若为阳性则诊断为近期感染HSV。 HSV抗体检测虽然是临床上最常用检测HSV感染的一种手段，但艾滋病患者通常会出现假阴性反应。 1、病毒感染HSV-1和HSV-2感染2018/4/26褚云卓16?核酸检测采用PCR技术，扩增HSV基因组中一段特异性的基因序列，是目前检测速度最快且敏感性最高的方法，但是阴性不能排除含有HSV的可能，因为临床早期获得的某些样本用PCR检测是阴性的，另外在样本中也可能存在PCR反应的抑制剂。 在临床诊断较困难时，HSVPCR仍将发挥作用，例如可通过PCR在艾滋病患者的玻璃体液和皮肤黏膜病损中检测到HSVDNA。 核酸检测采用PCR技术，扩增HSV基因组中一段特异性的基因序列，是目前检测速度最快且敏感性最高的方法，但是阴性不能排除含有HSV的可能，因为临床早期获得的某些样本用PCR检测是阴性的，另外在样本中也可能存在PCR反应的抑制剂。 在临床诊断较困难时，HSVPCR仍将发挥作用，例如可通过PCR在艾滋病患者的玻璃体液和皮肤黏膜病损中检测到HSVDNA。 1、病毒感染HSV-1和HSV-2感染2018/4/26褚云卓17诊断HHV-6和HHV-7感染?培养可采取病人血液、唾液、体腔液或疱疹液。 ?特异性病毒抗体间接免疫荧光法或ELISA法检测。 但是由于健康人群中血清抗HHV-6和抗HHV-7抗体阳性率均超过85%，因此血清学检测的临床意义不大。 但是由于健康人群中血清抗HHV-6和抗HHV-7抗体阳性率均超过85%，因此血清学检测的临床意义不大。 ?分子生物学方法分子杂交或PCR方法直接检测标本中的病毒核酸。 分子生物学方法分子杂交或PCR方法直接检测标本中的病毒核酸。 1、病毒感染HHV- 6、HHV-7和HHV-8感染2018/4/26褚云卓18?血清HHV-8潜伏蛋白(latent protein)抗体Kaposis肉瘤和B淋巴细胞瘤患者阳性，艾滋病患者血清抗HHV-8潜伏蛋白抗体阳性常预示病人即将发生Kaposis肉瘤和B淋巴细胞瘤患者阳性，艾滋病患者血清抗HHV-8潜伏蛋白抗体阳性常预示病人即将发生Kaposis肉瘤。 ?血清抗HHV-8可溶性抗原（lytic antigen）的抗体几乎所有Kaposis肉瘤病人和90%男性同性恋HIV感染者为阳性，而正常人群阳性率为25%。 s肉瘤病人和90%男性同性恋HIV感染者为阳性，而正常人群阳性率为25%。 1、病毒感染HHV- 6、HHV-7和HHV-8感染2018/4/26褚云卓19?疱疹基底部的组织碎片进行涂片及瑞氏或姬姆萨染色，查找嗜酸性核内包涵体，或用电子显微镜直接检查水疱液中的典型疱疹病毒。 疱疹基底部的组织碎片进行涂片及瑞氏或姬姆萨染色，查找嗜酸性核内包涵体，或用电子显微镜直接检查水疱液中的典型疱疹病毒。 ?采用PCR方法检测标本中病毒核酸，方法灵敏、准确。 采用PCR方法检测标本中病毒核酸，方法灵敏、准确。 ?血清学检查多应用ELISA法，于发病2个月内查特异性IgG和IgM抗体，有诊断价值。 血清学检查多应用ELISA法，于发病2个月内查特异性IgG和IgM抗体，有诊断价值。 1、病毒感染V-Z感染2018/4/26褚云卓20?间接荧光抗体试验（IFA）和酶联免疫试验（EIA）最理想的EB病毒血清学检测组分是VCA-IgG、EA-IgG和EBNA，这种组合，单份血清即可给90%95%的患者进行精确诊断分类。 最理想的EB病毒血清学检测组分是VCA-IgG、EA-IgG和EBNA，这种组合，单份血清即可给90%95%的患者进行精确诊断分类。 ?嗜异性抗体和EB病毒特异性抗体IgG嗜异性凝集效价从1501224均具有临床价值，EB病毒特异性抗体IgG滴度180即有诊断价值。 嗜异性凝集效价从1501224均具有临床价值，EB病毒特异性抗体IgG滴度180即有诊断价值。 ?检测EB病毒的核酸常用的方法有冷冻切片和石蜡切片的原位杂交试验、细胞悬液的杂交、点杂交和Southern印迹杂交等常用的方法有冷冻切片和石蜡切片的原位杂交试验、细胞悬液的杂交、点杂交和Southern印迹杂交等 1、病毒感染V-Z感染2018/4/26褚云卓 212、细菌感染机会性细菌感染是艾滋病的主要致死因素，艾滋病患者因反复发生细菌感染而多次住院治疗。 凡是医院及社区人群感染的细菌均可引起艾滋病患者感染，常见的细菌有机会性细菌感染是艾滋病的主要致死因素，艾滋病患者因反复发生细菌感染而多次住院治疗。 凡是医院及社区人群感染的细菌均可引起艾滋病患者感染，常见的细菌有金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肠球菌、肺炎链球菌、假单胞菌、肠杆菌、流感嗜血杆菌和分枝杆菌金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肠球菌、肺炎链球菌、假单胞菌、肠杆菌、流感嗜血杆菌和分枝杆菌等。 尤其是正常免疫人群很少感染的细菌如非结核分枝杆菌等，常引起艾滋病患者机会性感染。 等。 尤其是正常免疫人群很少感染的细菌如非结核分枝杆菌等，常引起艾滋病患者机会性感染。 2018/4/26褚云卓22铜绿假单胞菌（P.aeruginosa)革兰阴性，长短不一，单鞭毛。 生长温度25革兰阴性，长短不一，单鞭毛。 生长温度2542。 氧化酶阳性。 还原硝酸盐、分解尿素、精氨酸酶阳性。 氧化酶阳性。 还原硝酸盐、分解尿素、精氨酸酶阳性。 2018/4/26褚云卓23铜绿假单胞菌（P.aeruginosa)2018/4/26褚云卓24?标本直接检查涂片染色镜检抗酸染色和荧光染色核酸检测MTD试验AMPLICOR MTB方法标本直接检查涂片染色镜检抗酸染色和荧光染色核酸检测MTD试验AMPLICOR MTB方法?分离培养体培养法和液体培养法 2、细菌感染结核分枝杆菌2018/4/26褚云卓25?鸟分枝杆菌菌体呈杆状，有时亦呈球杆状或丝状。 卵黄培养基表现为淡黄色，在油酸卵蛋白琼脂培养基上菌落呈光滑无色素透明样的菌落，菌落中心较厚。 鸟型分枝杆菌特异性抗原检测，或用频率脉冲电子捕获气液色谱法检测细菌中的“结核硬脂酸”，或用特异性RNA或DNA探针进行杂交试验，或用PCR等方法鉴定标本中的鸟型分枝杆菌。 鸟分枝杆菌菌体呈杆状，有时亦呈球杆状或丝状。 卵黄培养基表现为淡黄色，在油酸卵蛋白琼脂培养基上菌落呈光滑无色素透明样的菌落，菌落中心较厚。 鸟型分枝杆菌特异性抗原检测，或用频率脉冲电子捕获气液色谱法检测细菌中的“结核硬脂酸”，或用特异性RNA或DNA探针进行杂交试验，或用PCR等方法鉴定标本中的鸟型分枝杆菌。 2、细菌感染非结核分枝杆菌2018/4/26褚云卓26?龟分枝杆菌菌体呈多态性，可表现为细而长或短而粗的菌体，幼龄菌呈强酸性，陈旧培养物可渐渐失去抗酸性。 此菌为快速生长菌，培养要求不高，在血琼脂培养基及麦康凯培养基上均生长良好，通常13天即可长出12mm直径的菌落，菌落表面光滑、湿润、有光泽、乳白色或淡黄色。 龟分枝杆菌菌体呈多态性，可表现为细而长或短而粗的菌体，幼龄菌呈强酸性，陈旧培养物可渐渐失去抗酸性。 此菌为快速生长菌，培养要求不高，在血琼脂培养基及麦康凯培养基上均生长良好，通常13天即可长出12mm直径的菌落，菌落表面光滑、湿润、有光泽、乳白色或淡黄色。 2、细菌感染非结核分枝杆菌2018/4/26褚云卓27?偶发分枝杆菌菌体呈棒状、球状或细丝状，偶尔菌体亦可呈念珠状或表现为膨胀的菌体。 在液体培养基中菌体分叉状。 此菌为快速生长型菌，5天即可长出肉眼可见的菌落，菌落呈平滑、柔软、奶油状，菌落亦可呈半球状、蜡样分裂叶状，亦常出现暗淡、粗糙、中心呈堆叠的菌落。 在孔雀绿培养基上菌落可呈绿色，在玉米粉琼脂培养基上，菌落粗糙呈致密索状。 光滑型菌落其周围有宽阔的网状物。 偶发分枝杆菌菌体呈棒状、球状或细丝状，偶尔菌体亦可呈念珠状或表现为膨胀的菌体。 在液体培养基中菌体分叉状。 此菌为快速生长型菌，5天即可长出肉眼可见的菌落，菌落呈平滑、柔软、奶油状，菌落亦可呈半球状、蜡样分裂叶状，亦常出现暗淡、粗糙、中心呈堆叠的菌落。 在孔雀绿培养基上菌落可呈绿色，在玉米粉琼脂培养基上，菌落粗糙呈致密索状。 光滑型菌落其周围有宽阔的网状物。 2、细菌感染非结核分枝杆菌2018/4/26褚云卓28真菌感染卡氏肺孢子虫感染?病原学检查可从患者的痰液、支气管肺泡灌洗液或肺活检组织中查到卡氏肺孢子虫。 常用的染色方法有六亚甲基四胺银（GMS）染色包囊壁被染成褐色，囊壁可见特征性括弧样结构；亚甲胺蓝（TBO）染色包囊壁呈深紫色，无特征性括弧样结构；荧光染色法包囊呈现明亮蓝绿色光环，包囊括弧样结构清晰可见。 病原学检查可从患者的痰液、支气管肺泡灌洗液或肺活检组织中查到卡氏肺孢子虫。 常用的染色方法有六亚甲基四胺银（GMS）染色包囊壁被染成褐色，囊壁可见特征性括弧样结构；亚甲胺蓝（TBO）染色包囊壁呈深紫色，无特征性括弧样结构；荧光染色法包囊呈现明亮蓝绿色光环，包囊括弧样结构清晰可见。 2018/4/26褚云卓29?特异性DNA检测用原位杂交技术和PCR方法检测血液、痰、支气管肺泡灌洗液及肺活检组织中的卡氏肺孢子虫DNA敏感性高，特异性好，PCR可检出10个拷贝的靶DNA。 特异性DNA检测用原位杂交技术和PCR方法检测血液、痰、支气管肺泡灌洗液及肺活检组织中的卡氏肺孢子虫DNA敏感性高，特异性好，PCR可检出10个拷贝的靶DNA。 真菌感染卡氏肺孢子虫感染2018/4/26褚云卓30?直接涂片镜检将标本悬于生理盐水或10%20%的氢氧化钾中，镜下可见卵圆形芽胞及假菌丝，革兰染色芽胞及假菌丝呈蓝色。 直接涂片镜检将标本悬于生理盐水或10%20%的氢氧化钾中，镜下可见卵圆形芽胞及假菌丝，革兰染色芽胞及假菌丝呈蓝色。 ?分离培养将标本接种于沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂及显色培养基，3037培养2448小时，在沙氏培养基上出现乳白色、光滑、中等大小的菌落，在显色培养基上菌落为绿色，即可确定为白假丝酵母。 分离培养将标本接种于沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂及显色培养基，3037培养2448小时，在沙氏培养基上出现乳白色、光滑、中等大小的菌落，在显色培养基上菌落为绿色，即可确定为白假丝酵母。 真菌感染白假丝酵母感染2018/4/26褚云卓31?墨汁染色或刚果红水溶液染色:新型隐球菌呈圆形或椭圆形的厚壁孢子或芽生孢子，外有一层宽厚荚膜，边缘清楚整齐，有时可见单个出芽的细胞。 新型隐球菌呈圆形或椭圆形的厚壁孢子或芽生孢子，外有一层宽厚荚膜，边缘清楚整齐，有时可见单个出芽的细胞。 ?胶乳凝集试验:即新型隐球菌乳胶凝集试验，检测病人CSF或血清中新型隐球菌荚膜多糖抗原，其特异性和敏感性均较高，可简便快速有效诊断隐球菌性脑膜炎。 即新型隐球菌乳胶凝集试验，检测病人CSF或血清中新型隐球菌荚膜多糖抗原，其特异性和敏感性均较高，可简便快速有效诊断隐球菌性脑膜炎。 ?分离培养:采用自动微生物系统和API鉴定。 真菌感染新型隐球菌感染2018/4/26褚云卓322018/4/26褚云卓332018/4/26褚云卓34?痰涂片的直接镜检:可见到大量的分隔菌丝，而对疑为侵袭性曲霉病患者，推荐支气管灌洗液标本检查.痰涂片的直接镜检:可见到大量的分隔菌丝，而对疑为侵袭性曲霉病患者，推荐支气管灌洗液标本检查.?分离培养:可见白色丝形菌落，随着孢子产生而转变为绿色或暗绿色。 产生的孢子柄可长达500m以上，柄的顶端为穹形包囊，囊表面有长串孢子攀丝。 膨大的典型分生孢子柄和攀丝是曲霉菌的特点。 分离培养:可见白色丝形菌落，随着孢子产生而转变为绿色或暗绿色。 产生的孢子柄可长达500m以上，柄的顶端为穹形包囊，囊表面有长串孢子攀丝。 膨大的典型分生孢子柄和攀丝是曲霉菌的特点。 真菌感染曲霉菌感染2018/4/26褚云卓352018/4/26褚云卓362018/4/26褚云卓372018/4/26褚云卓382018/4/26褚云卓392018/4/26褚云卓402018/4/26褚云卓41?直接涂片瑞氏染色:可见到典型圆形或卵形有明显横隔的细胞，常在巨噬细胞内。 可见到典型圆形或卵形有明显横隔的细胞，常在巨噬细胞内。 ?分离培养马尔尼菲青霉为双相真菌，25培养呈青霉相，37呈酵母相，无红色色素产生。 马尔尼菲青霉为双相真菌，25培养呈青霉相，37呈酵母相，无红色色素产生。 ?组织病理学检查在单核巨噬细胞系统之外的组织中常引起化脓性反应；在单核巨噬细胞系统器官为肉芽肿性反应；在巨噬细胞内外有酵母样菌体，呈圆形、椭圆形或腊肠形，有横隔。 在单核巨噬细胞系统之外的组织中常引起化脓性反应；在单核巨噬细胞系统器官为肉芽肿性反应；在巨噬细胞内外有酵母样菌体，呈圆形、椭圆形或腊肠形，有横隔。 真菌感染马尔尼菲青霉感染2018/4/26褚云卓42?外周血涂片瑞氏、姬姆萨或过碘酸染色为小的卵圆形出芽细胞（常群聚于巨噬细胞内），如临床标本中可见大的厚壁细胞。 外周血涂片瑞氏、姬姆萨或过碘酸染色为小的卵圆形出芽细胞（常群聚于巨噬细胞内），如临床标本中可见大的厚壁细胞。 ?分离培养荚膜组织胞浆菌属于双相真菌，25沙堡弱培养基（SDA）为霉菌相，血琼脂37培养可转为酵母相，大约有30%的菌株在25SDA培养可见特征性的大分生孢子，直径814m，表面有指状突起，还有的菌株产生椭圆形小分生孢子，直径24m，从菌丝生出锐角的小梗上，有时可以出芽似哑铃状。 分离培养荚膜组织胞浆菌属于双相真菌，25沙堡弱培养基（SDA）为霉菌相，血琼脂37培养可转为酵母相，大约有30%的菌株在25SDA培养可见特征性的大分生孢子，直径814m，表面有指状突起，还有的菌株产生椭圆形小分生孢子，直径24m，从菌丝生出锐角的小梗上，有时可以出芽似哑铃状。 真菌感染荚膜组织胞浆菌感染2018/4/26褚云卓43荚膜组织胞浆菌，25培养2018/4/26褚云卓44荚膜组织胞浆菌（X400）2018/4/26褚云卓45荚膜组织胞浆菌（X1000）2018/4/26褚云卓46荚膜组织胞浆菌（X1000）2018/4/26褚云卓47?直接涂片可见特征性的圆形、厚壁（2m）的球形体，直径1080m。 不出芽，内含内孢子，直径25m。 球壁破裂，则有内生孢子游离在外。 每个内孢子可延长为关节菌丝，关节菌丝裂为关节孢子，后者发展为小球体。 在肺空洞病例，痰标本可见菌丝及小球体。 直接涂片可见特征性的圆形、厚壁（2m）的球形体，直径1080m。 不出芽，内含内孢子，直径25m。 球壁破裂，则有内生孢子游离在外。 每个内孢子可延长为关节菌丝，关节菌丝裂为关节孢子，后者发展为小球体。 在肺空洞病例，痰标本可见菌丝及小球体。 真菌感染球孢子菌感染2018/4/26褚云卓48?分离培养因该菌易于播散，吸入肺中，有高度的传染性，培养操作应该在有专门条件的实验室进行。 经2530培养27天即可获得可鉴定的菌丝型菌落，呈白色绒毛状菌落，以后变灰白色，中央有丛状菌丝，经3740特殊的转换培养基可产生球形体。 分离培养因该菌易于播散，吸入肺中，有高度的传染性，培养操作应该在有专门条件的实验室进行。 经2530培养27天即可获得可鉴定的菌丝型菌落，呈白色绒毛状菌落，以后变灰白色，中央有丛状菌丝，经3740特殊的转换培养基可产生球形体。 ?组织病理检查发现原发性皮肤球孢子菌病组织学改变主要为慢性肉芽肿，播散性皮肤球孢子菌病主要表现为化脓性肉芽肿，极少数情况可见到菌丝成分。 组织病理检查发现原发性皮肤球孢子菌病组织学改变主要为慢性肉芽肿，播散性皮肤球孢子菌病主要表现为化脓性肉芽肿，极少数情况可见到菌丝成分。 真菌感染球孢子菌感染2018/4/26褚云卓49?病原学检查可见弓形虫滋养体和假囊，滋养体较小，常位于细胞核内。 可见弓形虫滋养体和假囊，滋养体较小，常位于细胞核内。 ?免疫学检查循环抗原（Cag）的检测血清抗体的检测循环抗原（Cag）的检测血清抗体的检测?PCR检测弓形虫DNA原虫感染弓形虫感染2018/4/26褚云卓50?通常用硫酸锌或蔗糖悬浮沉淀法浓缩病人粪便，经Kinyoum抗酸染色法或碘液染色后，在相差显微镜下可观察到浅粉红色或深红色、直径约26m大小的隐孢子虫卵囊。 也可采取病人肠粘膜活检标本，经姬姆萨染色后，从组织标本中的微绒毛层中检出14m的隐孢子虫滋养体。 通常用硫酸锌或蔗糖悬浮沉淀法浓缩病人粪便，经Kinyoum抗酸染色法或碘液染色后，在相差显微镜下可观察到浅粉红色或深红色、直径约26m大小的隐孢子虫卵囊。 也可采取病人肠粘膜活检标本，经姬姆萨染色后，从组织标本中的微绒毛层中检出14m的隐孢子虫滋养体。 原虫感染隐孢子虫感染2018/4/26褚云卓51讲授内容 一、机会性感染病原学检查 二、性病实验室检查检查 一、机会性感染病原学检查 二、性病实验室检查检查2018/4/26褚云卓52 二、性病实验室检查检查 1、梅毒 2、淋病 3、非淋菌性尿道炎 4、尖锐湿尤 1、梅毒 2、淋病 3、非淋菌性尿道炎 4、尖锐湿尤2018/4/26褚云卓53梅毒概况梅毒是最常见的一种性病，在20世纪之前与淋病、软下疳、性病淋巴肉芽肿、腹股沟肉芽肿合称为经典性病。 梅毒起源于欧洲，十六世纪初传入我国。 长期以来，人们无法区分淋病与梅毒，直到1905年Schandim和Hoffman发现了梅毒的病原体梅毒螺旋体（Treponema Pallidum，TP）。 梅毒是最常见的一种性病，在20世纪之前与淋病、软下疳、性病淋巴肉芽肿、腹股沟肉芽肿合称为经典性病。 梅毒起源于欧洲，十六世纪初传入我国。 长期以来，人们无法区分淋病与梅毒，直到1905年Schandim和Hoffman发现了梅毒的病原体梅毒螺旋体（Treponema Pallidum，TP）。 2018/4/26褚云卓54梅毒的临床分期梅毒螺旋体通过粘膜或有破损的皮肤进入人体后，经淋巴系统及血液循环播散到全身，几乎可以侵犯全身各脏器和组织。 临床表现多种多样，且时显时隐，病程较长。 梅毒的病程分三期梅毒螺旋体通过粘膜或有破损的皮肤进入人体后，经淋巴系统及血液循环播散到全身，几乎可以侵犯全身各脏器和组织。 临床表现多种多样，且时显时隐，病程较长。 梅毒的病程分三期2018/4/26褚云卓55?一期梅毒:主要表现为生殖器形成硬下疳,即使未经治疗也可自然愈合，梅毒螺旋体进入血液而潜伏于体内，约经23月隐伏期后进入第二期。 一期梅毒:主要表现为生殖器形成硬下疳,即使未经治疗也可自然愈合，梅毒螺旋体进入血液而潜伏于体内，约经23月隐伏期后进入第二期。 ?二期梅毒主要表现为全身皮肤黏膜出现梅毒疹，即使不加治疗症状也常在3个月以内消退。 二期梅毒主要表现为全身皮肤黏膜出现梅毒疹，即使不加治疗症状也常在3个月以内消退。 ? 一、二期梅毒并称为早期梅毒。 梅毒的临床分期2018/4/26褚云卓56?三期梅毒二期梅毒未经正规治疗，经5年或更久有50%左右病人会发展为三期梅毒，此时病变可累及全身各器官、组织，常见的有神经系统、心血管系统等，严重的可导致死亡。 三期梅毒二期梅毒未经正规治疗，经5年或更久有50%左右病人会发展为三期梅毒，此时病变可累及全身各器官、组织，常见的有神经系统、心血管系统等，严重的可导致死亡。 ?此外，隐性梅毒患者虽没有临床症状，但却是重要的传染源。 胎传梅毒（先天梅毒）则可引起胎儿全身感染，并在出生后（710岁）出现皮肤梅毒、骨髓炎、楔状齿等。 此外，隐性梅毒患者虽没有临床症状，但却是重要的传染源。 胎传梅毒（先天梅毒）则可引起胎儿全身感染，并在出生后（710岁）出现皮肤梅毒、骨髓炎、楔状齿等。 梅毒的临床分期2018/4/26褚云卓57梅毒的传播途径梅毒主要通过性交传播，也可通过胎盘传染下一代，极少数患者通过其他途径传染。 梅毒主要通过性交传播，也可通过胎盘传染下一代，极少数患者通过其他途径传染。 ?性接触未经治疗的病人，在感染后的第一年内最具有传染性，这些病人的皮肤、黏膜损害表面有大量梅毒螺旋体。 因此，凡和这些病人有接触（包括同性恋），皮肤和黏膜接触到病人损害处，都可传染上梅毒。 随着病期的延长，梅毒的传染性逐渐减少，到感染4年后，通过性接触几乎无传染性。 性接触未经治疗的病人，在感染后的第一年内最具有传染性，这些病人的皮肤、黏膜损害表面有大量梅毒螺旋体。 因此，凡和这些病人有接触（包括同性恋），皮肤和黏膜接触到病人损害处，都可传染上梅毒。 随着病期的延长，梅毒的传染性逐渐减少，到感染4年后，通过性接触几乎无传染性。 2018/4/26褚云卓58?胎传梅毒孕妇血中的梅毒螺旋体，可通过胎盘及脐带血传到胎儿体内，胎儿一般于6个月后才对螺旋体的感染发生反应。 未经治疗的晚期（病程超过4年）梅毒妇女，虽然经过性接触已无传染性，但怀孕后仍可传染胎儿，但传染性比早期梅毒低。 病期越长，传染性越小。 胎传梅毒孕妇血中的梅毒螺旋体，可通过胎盘及脐带血传到胎儿体内，胎儿一般于6个月后才对螺旋体的感染发生反应。 未经治疗的晚期（病程超过4年）梅毒妇女，虽然经过性接触已无传染性，但怀孕后仍可传染胎儿，但传染性比早期梅毒低。 病期越长，传染性越小。 梅毒的传播途径2018/4/26褚云卓59?其他途径极少数患者经性接触以外的途径感染。 直接接触的有接吻、哺乳、输血以及新生儿经过产道而感染等。 间接接触的有接触病人的日常用品，如剃刀、餐具、烟嘴、坐式便器、医疗器械等。 医务人员在接触梅毒螺旋体的标本时不小心也可以感染其他途径极少数患者经性接触以外的途径感染。 直接接触的有接吻、哺乳、输血以及新生儿经过产道而感染等。 间接接触的有接触病人的日常用品，如剃刀、餐具、烟嘴、坐式便器、医疗器械等。 医务人员在接触梅毒螺旋体的标本时不小心也可以感染梅毒的传播途径2018/4/26褚云卓60梅毒在全球的流行状况?1900年世界卫生组织把梅毒列为世界上最流行的50种疾病之一。 梅毒的发病率在性传播疾病中列第4位。 估计全世界每年约有300万新发病例。 1900年世界卫生组织把梅毒列为世界上最流行的50种疾病之一。 梅毒的发病率在性传播疾病中列第4位。 估计全世界每年约有300万新发病例。 ?90年代末，世界上每天有100万人感染性病，每年产生淋病病人6200万，梅毒人感染性病，每年产生淋病病人6200万，梅毒病人1200万，其它性传病原体感染病人1.5个亿，发展中国家是性病和梅毒的重灾区。 ，其它性传病原体感染病人1.5个亿，发展中国家是性病和梅毒的重灾区。 2018/4/26褚云卓61?梅毒从16世纪初由印度传入我国广东，至今已流行400余年，解放前梅毒的发病率为所有性病之首。 20世纪60年代初期，我国基本消灭了梅毒。 梅毒从16世纪初由印度传入我国广东，至今已流行400余年，解放前梅毒的发病率为所有性病之首。 20世纪60年代初期，我国基本消灭了梅毒。 ?改革开放后，梅毒再次从国外传入我国。 近年来，梅毒增长幅度明显加快。 自1979年再次报告梅毒后，报病数逐年增多，特别是1993年后，全国许多地区梅毒呈现大幅上升，至1999年全国梅毒报病数为改革开放后，梅毒再次从国外传入我国。 近年来，梅毒增长幅度明显加快。 自1979年再次报告梅毒后，报病数逐年增多，特别是1993年后，全国许多地区梅毒呈现大幅上升，至1999年全国梅毒报病数为80406例，是1993年的40倍。 梅毒在国内的流行状况（一）2018/4/26褚云卓62?1979-1987年全国梅毒报告病例不超过1000例；1988-1992年间每年报病数不超过2000例（1990年除外）；1993-1999年则成倍增长，年均增长85%。 有的地区梅毒发病率超过1979-1987年全国梅毒报告病例不超过1000例；1988-1992年间每年报病数不超过2000例（1990年除外）；1993-1999年则成倍增长，年均增长85%。 有的地区梅毒发病率超过150/10万，足见其严重性。 梅毒在国内的流行状况（一）2018/4/26褚云卓63梅毒在国内的流行状（二）8.028.045.383.372.081.130.460.20.20.190.260.20.090.050.140.0xx34567891985198619871988198919901991199219931994199519961997199819992000万梅毒在中国的病例报告数(19852000)2018/4/26褚云卓64?2000年梅毒报病数位于前10位的省份为广东（10383例）、江苏（8500例）、辽宁2000年梅毒报病数位于前10位的省份为广东（10383例）、江苏（8500例）、辽宁（8097例）、浙江（7950例）、上海（6573例）、福建（5980例）、黑龙江（3854例）、安徽（3407例）、吉林（3312例）和广西（3106例），仍然分布在珠江三角洲、长江三角洲和东北三省。 、浙江（7950例）、上海（6573例）、福建（5980例）、黑龙江（3854例）、安徽（3407例）、吉林（3312例）和广西（3106例），仍然分布在珠江三角洲、长江三角洲和东北三省。 梅毒在国内的流行状（三）2018/4/26褚云卓65?发病率位于前10位的省份为上海（49.83/10万）、辽宁发病率位于前10位的省份为上海（49.83/10万）、辽宁（19.365/10万）、海南（18.29/10万）、浙江（17.69/10万）、福建（17.67/10万）、北京（16.08/10万）、广东（14.27/10万）、吉林（12.38/10万）、江苏（11.70/10万）和黑龙江（10.12/10万）。 、海南（18.29/10万）、浙江（17.69/10万）、福建（17.67/10万）、北京（16.08/10万）、广东（14.27/10万）、吉林（12.38/10万）、江苏（11.70/10万）和黑龙江（10.12/10万）。 梅毒在国内的流行状（三）2018/4/26褚云卓662000年梅毒报告病例位于前10位的省份10383850080977950657359803854340733123106020004000600080001000012000020004000600080001000012000广东江苏辽宁浙江上海福建黑龙江安徽吉林广西2018/4/26褚云卓67发病率(1/10万）位于前10位的省份为49.8319.3718.29917.6917.6716.0814.2712.3811.710.120510152025303540455005101520253035404550上海辽宁海南浙江福建北京广东吉林江苏黑龙江2018/4/26褚云卓68?由于各种原因，全国各地存在大量的梅毒漏诊和漏报，我国专家估计，实际患病人数是报告数的由于各种原因，全国各地存在大量的梅毒漏诊和漏报，我国专家估计，实际患病人数是报告数的6-10倍6-10倍或以上。 ?男性梅毒病例以一期最多，女性则以二期最多。 女性的二期梅毒和隐性梅毒均多于男性，胎传梅毒的发生率也随之增高。 男性梅毒病例以一期最多，女性则以二期最多。 女性的二期梅毒和隐性梅毒均多于男性，胎传梅毒的发生率也随之增高。 梅毒在国内的流行状（四）2018/4/26褚云卓69?2000年全国有26个省份报告了胎传梅毒，共359例，较1999年增长了30.36%。 其中报告病例数较多的省份为广东91例、福建81例、浙江59例、上海55例、黑龙江31例、辽宁2000年全国有26个省份报告了胎传梅毒，共359例，较1999年增长了30.36%。 其中报告病例数较多的省份为广东91例、福建81例、浙江59例、上海55例、黑龙江31例、辽宁29例、广西17例、江苏16例和安徽11例等。 xx年，胎传梅毒数仍呈明显上升的趋势。 、广西17例、江苏16例和安徽11例等。 xx年，胎传梅毒数仍呈明显上升的趋势。 梅毒在国内的流行状（四）2018/4/26褚云卓70?2000年全国各性病监测点梅毒不同型别的分析分型发病数构成（%）去年同期数年增长率（%）一期梅毒490642.705432-9.68二期梅毒489542.606048-19.06三期梅毒690.6089-22.47胎传梅毒790.6982-3.65隐性梅毒154113.41135114.06合计11490100.0013002-11.63分型发病数构成（%）去年同期数年增长率（%）一期梅毒490642.705432-9.68二期梅毒489542.606048-19.06三期梅毒690.6089-22.47胎传梅毒790.6982-3.65隐性梅毒154113.41135114.06合计11490100.0013002-11.63梅毒在国内的流行状（五）2018/4/26褚云卓71梅毒在国内的流行状（六）?未经治疗的梅毒对妊娠结果的影响妊娠结果早期梅毒（%）晚期梅毒（%）所有梅毒（%）死产251222新生儿死亡14912先天梅毒儿41233非梅毒儿207733妊娠结果早期梅毒（%）晚期梅毒（%）所有梅毒（%）死产251222新生儿死亡14912先天梅毒儿41233非梅毒儿2077332018/4/26褚云卓72?梅毒和一些其他性病均与艾滋病密切相关，从社会学角度来看，凡人群中梅毒发病率高，意味着人群中性乱现象严重，提供了艾滋病流行的条件；从医学角度来说，患有梅毒的人，因有局部溃疡，可明显增加带有CD4受体信息的目标细胞，故对HIV感染的易感性增加210倍。 同样，HIV感染者伴有梅毒，其生殖道排出的HIV的量要比仅有HIV感染者排出的量大得多。 梅毒和一些其他性病均与艾滋病密切相关，从社会学角度来看，凡人群中梅毒发病率高，意味着人群中性乱现象严重，提供了艾滋病流行的条件；从医学角度来说，患有梅毒的人，因有局部溃疡，可明显增加带有CD4受体信息的目标细胞，故对HIV感染的易感性增加210倍。 同样，HIV感染者伴有梅毒，其生殖道排出的HIV的量要比仅有HIV感染者排出的量大得多。 ?在HIV感染者中，梅毒血清学反应有时会出现难于解释的现象，因此对于临床怀疑梅毒感染而血清学试验又表现为阴性者，建议考虑HIV检查。 在HIV感染者中，梅毒血清学反应有时会出现难于解释的现象，因此对于临床怀疑梅毒感染而血清学试验又表现为阴性者，建议考虑HIV检查。 梅毒在国内的流行状况（七）2018/4/26褚云卓73?人类对梅毒无先天免疫性，尚无疫苗接种进行人工免疫，仅能在受感染后产生感染性免疫。 已完全治愈的早期梅毒患者仍可以再感染。 人类对梅毒无先天免疫性，尚无疫苗接种进行人工免疫，仅能在受感染后产生感染性免疫。 已完全治愈的早期梅毒患者仍可以再感染。 ?感染梅毒后，首先产生IgM型抗梅毒螺旋体抗体，感染2周后即可测出，早期梅毒抗梅治疗39个月后或晚期梅毒治疗2年后，大部分病人IgM可转阴性，再感染时又出现阳性，故IgM型抗体的存在是活动性梅毒的表现。 感染梅毒后，首先产生IgM型抗梅毒螺旋体抗体，感染2周后即可测出，早期梅毒抗梅治疗39个月后或晚期梅毒治疗2年后，大部分病