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外界因素对酶活性的影响一 实验目的1 了解外界因素对酶活性及酶促反应速度的影响 2 加深对酶特性的认识 二 实验原理酶的化学本质是蛋白质 它极易受外界条件的影响而改变它的构象及性质 因而也必然会影响到它的催化活性 酶对温度 pH 酶浓度及某些离子浓度等变化很敏感 一 pH值对酶活性的影响酶的活性受环境pH的影响极为显著 通常各种酶只有在一定的pH范围内才能表现它的活 一种酶表现其最高活性时的pH值称为该酶的最适pH 高于或低于最适pH值时 酶的活性降低 酶的最适pH值受酶的纯度 底物的种类和浓度 缓冲液的种类和浓度以及环境温度等条件影响 二 温度对酶活性的影响每种酶都有其最适温度 高于或低于此温度酶的活性都降低 一般而言 酶处于过高的温度环境中 会使酶活性永久地丧失 而处于极低温度的环境中只会使酶活性受到抑制 一旦温度适宜 酶又会全部或部分地恢复其活性 三 酶浓度对酶促反应速度的影响在其它条件不变的情况下 若反应物浓度大大高于酶浓度时 则反应速度随酶浓度增加而增加 两者间成正比关系 即 V k E 但若反应底物浓度较低 而且酶的浓度足够高时 增加酶浓度 反应速度基本不变 四 离子对酶活性的影响就唾液淀粉酶而言 低浓度Cl一可以增加酶活性 高浓度的Cl一或者低浓度的Cu2 则会抑制酶的活性 而低浓度的Na SO42 等对酶活性没有影响 不同的酶对不同的离子具有不同的效应 三 实验操作 一 pH对酶活性的影响1 缓冲溶液的配制取6只洁净的三角烧瓶 按表1编号和加试剂 表1 磷酸氢二钠一柠檬酸缓冲溶液的配制 2 pH对酶活性的影响取6支洁净试管 分别编号后 按表2操作 表2pH对酶活性的影响 二 温度对酶活性的影响取3支洁净试管 按表3操作 表3温度对酶活性的影响 三 酶浓度对酶活性的影响1 取3支洁净试管 编号 按表4加入淀粉液 缓冲液 加毕后放人37 恒温水浴中保温5min 表4酶浓度对酶活性的影响 2 保温后 快速加不同浓度的稀释唾液 摇匀 立即放入37 恒温水浴中 计时 并每隔1min从各管中取出1滴 用碘液检验 记录从加进酶液至碘液检验为橙黄色所需时间 四 离子对酶活性的影响取3支洁净试管 编号后按表5操作 表5离子对酶活性的影响 五 实验建议 1 因各人的唾液淀粉酶活性有所差异 若某一碘液检验结果为全部变为淡黄色 或无一变为淡黄色 则需增大或减少唾液稀释倍数 或者改变酶作用时间 2 配制缓冲液时 吸量要准确 3 检验离子对酶活性影响时 切勿吸错或污染了试剂 六实验报告及作业1 以反应速度为纵坐标 pH值 温度或酶浓度为横坐标 作出反应速度和pH 温度或酶浓度的关系图 2 唾液淀粉酶的最适pH和最适温度是多少 如何进一步确定 3 温度为0 和100 两支试管中反应液遇碘呈蓝色 其原因有何不同 若恢复最适温度 其结果为什么有差异 4 如何确定氯化钠中氯离子是激活剂 硫酸铜中铜离子是抑制剂 5 什么是酶的最适温度 最适pH 有何实践意义 温度 p
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