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紫外线杀菌试验 生物科学121 李萍12640112一、实验目的1、了解紫外线的杀菌作用原理。2、学习紫外线杀菌试验方法。二、实验原理1)紫外线杀菌属于射线杀菌的一种 ;2)杀菌波长240nm-280nm,265nm-266nm范围最强,此范围与DNA吸收光谱一致;3)其杀菌机制:短波的紫外线引起细胞核酸变性导致微生物死亡。不同的菌,紫外线的杀菌时间不同 ,杀菌的效果不同。不同的菌,紫外线的杀菌时间不同,对于一般的细菌只要很短的时间,对于有芽孢的菌,它本身抗逆性非常强,因此杀灭的时间会相对更长一些4)特点:杀菌作用强、穿透能力很弱、适用于空间消毒和表面消毒三、实验材料和用具 培养24-48h的大肠杆菌 5皿牛肉膏蛋白胨琼脂培养基 接种环 酒精灯 紫外灯四、实验步骤(1) 制平板-取无菌平皿5个,将已熔化并冷却至50左右的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基按无菌操作法倒入平皿中,使冷凝成平板。(2) 标记-在平板底部标记姓名、日期、班级、实验室号及紫外照射时间(30s,60s,90s,120s,150s)。(3) 接种-用接种环取细菌密集接种于培养基上。(4)紫外线处理-将紫外灯光开灯预热3min。再将上述平皿置于紫外灯下, 将平板按照时间顺序在紫外灯下方摆成一排,并用平皿盖遮住细菌涂布面的一半。(5)培养-每隔30s取出一块平皿,放入37温箱中孵育18-24h,注意事项1.在使用过程中,应保持紫外灯表面的清洁。2紫外线对皮肤和眼睛有损伤作用,应注意防护。五、预期结果:1.盖子盖住的琼脂表面,可见大肠杆菌形成的菌落。2.直接暴露于紫外线下的琼脂表面无菌生长或只有少量菌生长,且随着照射时间的延长,杀菌效果越好,残余菌越少。六、实验结果及分析 大肠杆菌 无皿盖 有皿盖 30s 60s 90s 120s 150s 结果分析:紫外线对微生物有强烈的致死作用,其杀菌机制是短波的紫外线引起细胞核酸变性导致微生物死亡。五皿培养皿左半边为无皿盖,右半边为有皿盖,由图可知,从30s-150s,所长菌从多到少,但长得都较多。紫外灯照射时间不同,效果不同,30s下,紫外灯照射对菌生长无明显影响,长的菌都较多。随着时间增加,紫外灯照射对菌生长有了抑制作用,起到的杀菌效果增强。从设置的时间上看,90s后效果开始明显。对比有盖和无盖,当紫外灯照射相同时间,无皿盖的菌长的比有皿盖少。说明有盖能减弱紫外线对菌的杀菌作用,但从150s下的那个皿可以看出,紫外灯对菌杀菌作用即使在有皿盖保护情况下,也会随着时间增加而增强。总而言之,紫外线杀菌,且随着照射时间的延长,杀菌效果越好,残余菌越少。加皿盖能削弱紫外线对菌的杀菌作用。不足点:1、 虽然已
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