第二章鉴别试验.ppt

Contents 概述 药物的鉴别试验 identificationtest 目的 判断药物的真伪 是药品质量检验的首项任务药典收载的鉴别试验 均为用来证实贮藏的药物是否为其所标示的药物这些方法有一定的专属性 但不能赖以鉴别未知物对于原料药 还应结合性状项下的外观和物理常数进行综合判断 鉴别试验的项目 性状 description 鉴别 identification 鉴别 identification 性状 反映了药物特有的物理性质1 外观 聚集状态 晶型 色泽以及臭 味等性质2 溶解度3 物理常数 相对密度 熔点 比旋度 吸收系数等 晶型药物的多晶型现象极为普遍 晶型不同 它们的物理性质如密度 熔点 硬度 外观 溶解度和溶出速度等方面均有显著性差异 从而影响药物稳定性 生物利用度 毒副反应等P39鉴别晶型主要是依据不同晶型具有不同的理化特性及光谱学特性 采用熔点法 热分析法 红外分光光度法及X 射线衍射法等进行鉴别 熔点定义固体 液体的温度 1 0 1 5 min 熔融同时分解的温度 2 5 3 0 min 初熔至全熔的一段温度ChP收载的方法第一法 测定易粉碎的固体药品第二法 测定不易粉碎的固体药品第三法 测定凡士林或其他类似物要求报告初熔和终熔 比旋度 tD是手性药物特性及其纯度的主要指标在一定波长 589 3nm 与温度 20 下 偏振光透过长1dm 含旋光性物质1g 1mL的溶液时测得的旋光度 称为比旋度 注意 溶剂 pH 浓度等对比旋度的影响 吸收系数在给定波长 溶剂和温度等条件下 吸光物质在单位浓度 C 单位液层厚度 L 时的吸光度 称为吸收系数 E1 1cm E1 1cm 中国药典收载的方法是指在一定波长下 溶液浓度为1 W V 厚度为1cm是的吸光度 一般鉴别试验 依据某一类药物的化学结构或理化性质的特征 通过化学反应来鉴别药物的真伪 无机药物阴 阳离子的特殊反应 有机药物典型的官能团反应 阴 阳离子的特殊反应 例 钠盐 钾盐 钙盐的焰色反应 取铂丝 盐酸湿润 蘸取供试品 无色火焰中燃烧 火焰显各离子的特征色 钠离子 钾离子 钙离子 典型官能团反应丙二酰脲类 托烷生物碱类 芳香第一胺类 有机氟化物类 水杨酸盐 枸橼酸盐 乳酸盐等鉴别反应例 有机氟化物鉴别 氟离子的茜素氟蓝比色法 有机氟化物经氧瓶燃烧法破坏 被碱性溶液吸收成为无机氟化物 与茜素氟蓝 硝酸亚铈在pH4 3溶液中形成蓝紫色络合物 专属鉴别试验根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学特性不同 选用某些特有的灵敏的定性反应 来鉴别药物的真伪 是证实某一种药物的依据例 巴比妥类药物甾体激素类药物 三 鉴别方法 常用的方法有 化学法 光谱法 色谱法要求 专属 再现 灵敏 操作简便 快速1 化学鉴别法 呈色 沉淀 荧光 气体 三氯化铁 酚羟基 紫色 重氮化 偶合 芳伯胺基 橙红 茜素氟蓝法 有机氟化物 蓝紫色 双缩脲 氨基醇结构 蓝紫色 Vitali反应 托烷生物碱类 深紫色 四氮唑 肾上腺皮质激素类 红色或蓝色 茚三酮 类似氨基酸结构 蓝紫色 沉淀 荧光反应 硝酸银 丙二酰脲类 氯化物 微C银镜反应 异烟肼氧化亚铜 葡萄糖铜盐 磺胺类三氯化铁 苯甲酸盐重金属离子 利多卡因生物碱沉淀剂 氮杂环类 在硫酸性溶液中本身有荧光 硫酸奎宁于适当试剂反应产生荧光 维B1的硫色素反应 气体反应 强碱处理 氨气强酸处理 硫化氢气体直火加热 碘蒸气硫酸水解 加乙醇 醋酸乙酯香味 使试剂褪色 如维C的二氯靛酚反应 司可巴比妥钠与溴 碘试液的反应测定生成物熔点 操作繁 费时 应用少 其它反应 光谱鉴别法1 紫外光谱法 UV 1 测定最大吸收波长 或同时测定最小吸收波长 2 测定一定浓度的供试液在最大吸收波长处的吸光度 3 规定吸收波长和吸光度比值法 4 经化学处理后 测定其反应产物的吸收光谱特性 应用举例地蒽酚的鉴别试验 取含量测定项下的溶液扫描240 400nm范围 在257 289与356nm的波长处有最大吸收 规定 A257 A289应为1 06 1 10A356 A289应为0 90 0 94 对于一个药物多个吸收峰的峰值相差较大时 采用单一浓度不易观察到全部吸收峰 可采用两种浓度的供试液分别测定其最大吸收波长 红外光谱法 IR IR是一种专属性强 应用广 固体 液体 气体样品 的鉴别方法 主要用于组分单一 结构明确的原料药 特别适合用于其他方法不易区分的同类药物 如磺胺类 甾体激素类和半合成抗生素类药品测定方法 标准图谱对照法 ChP 对照品比较法 USP 中国药典试样制备方法用于固体 溴化钾 压片法 糊法用于液体 膜法 溶液法测定前应录制聚苯乙烯薄膜光谱图 并与标准谱图对照 应检查仪器性能 注意问题 1 规定样品前处理方法 2 当未规定药用晶型时 可采用对照品 并用适当溶剂进行重结晶 3 已规定药用晶型的 则应采用相应药用晶型的对照品依法比对制剂的红外鉴别 1 品种正文中规定预处理方法 2 辅料无干扰 与原料药的标准图比对 3 如辅料干扰不能完全消除 在指纹区可规定3 5个待测成份的特征吸收峰 cm 1 其误差应小于0 5 一些新的鉴别方法近红外光谱法 12800 4000cm 1 核磁共振法 NMR 亚硝酸戊酯的NMR法鉴别 USP法 亚硝酸戊酯 AmylNitrite 是3 甲基 1 丁醇和2 甲基 1 丁醇亚硝酸酯的混合物X射线粉末衍射法例如 氨苄西林四种固体的粉末X 射线衍射图谱P33 色谱 TLC HPLC GC 鉴别法利用物质各自的特征色谱行为 Rf值或tR值 进行鉴别试验采用与对照品在相同条件下进行色谱分离 根据两者保留行为和检测结果是否一致来验证药品的真伪 鉴别试验条件 影响因素被测物浓度试剂的用量溶液的温度溶液pH反应时间共存的干扰物质等鉴别试验必须在规定条件下完成 否则将会影响结果的判断 鉴别试验的专属性要求空白试验 阴性对照 在与供试品鉴别试验完全相同的条件下 除不加供试品外 或以等量溶剂代替供试液 其它试剂均同样加入而进行的试验对照试验 阳性对照