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文档简介
专题九现代生物科技专题 第1讲基因工程 细胞工程 知识网络构建 核心考点突破 真题预诊1 2011年高考浙江卷 将ada 腺苷酸脱氨酶基因 通过质粒pet28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶 下列叙述错误的是 a 每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒b 每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点 c 每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个adad 每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子解析 选c 大肠杆菌成功表达出腺苷酸脱氨酶 说明这些大肠杆菌都至少含有一个重组质粒 a项正确 作为载体的条件为至少含有一个或多个酶切位点 所以作为载体的质粒至少含有一个限制性核酸内切酶识别位点 b项正确 作为基因表达载体应包括目的基因 启动子 终止子 标记基因四部分 但并不是每个酶切位点都至少插入一个ada c项错误 由于这些目的基因成功表达 所以每个ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子 d项正确 查漏补缺基因工程的基本操作程序1 目的基因的获取途径 1 可以从自然界中已有的物种中分离出来 如可从基因组文库或cdna文库中获取 2 人工合成目的基因 3 利用pcr技术扩增目的基因 通过pcr技术对已获取的目的基因进行扩增 可获取大量目的基因 2 基因表达载体的构建 1 基因表达载体的组成 目的基因 启动子 终止子 标记基因 2 基因表达载体的构建方法 3 将目的基因导入受体细胞 4 目的基因的检测与鉴定 真题预诊2 2011年高考江苏卷 下列有关植物组织培养的叙述 正确的是 a 愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞b 二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株 c 用人工薄膜将胚状体 愈伤组织等分别包装可制成人工种子d 植物耐盐突变体可通过添加适量nacl的培养基培养筛选而获得解析 选d 愈伤组织是一团排列疏松而无规则 高度液泡化的 呈无定形状态的 具有分生能力的薄壁细胞 不具有特定的结构和功能 a项错误 二倍体植株的花粉中只含一个染色体组 培养得到的个体为单倍体 高度不育 只有幼苗用秋水仙素处理后得到的植株才能稳定遗传 b项错误 人工种子中包裹的是再分化形成的胚状体或不定芽 顶芽和腋芽等 但不能是愈伤组织 c项错误 用特定的选择培养基可筛选出所需的突变体类型 如植物耐盐突变体的筛选可利用加适量nacl的培养基进行 d项正确 查漏补缺1 植物组织培养与动物细胞培养的比较 2 植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 特别提醒 在诱导剂的作用下进行细胞融合 形成的杂种细胞有三种 aa型 bb型和ab型 只有ab型才是我们所需的杂种细胞 因此需要用选择培养基进行筛选 名师高考导航 体验赛场高考热点聚焦 2011年高考海南卷 回答有关基因工程的问题 1 构建基因工程表达载体时 用不同类型的限制酶切割dna后 可能产生黏性末端 也可能产生 末端 若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接 则应选择能使二者产生 相同 不同 黏性末端的限制酶 2 利用大肠杆菌生产人胰岛素时 构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等 其中启动子的作用是 在用表达载体转化大肠杆菌时 常用 处理大肠杆菌 以利于表达载体进入 为了检测胰岛素基因是否转录出了mrna 可用标记的胰岛素基因片段作探针与mrna杂交 该杂交技术称为 为了检测胰岛素基因转录的mrna是否翻译成 常用抗原 抗体杂交技术 3 如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞 先要将目的基因插入农杆菌ti质粒的 中 然后用该农杆菌感染植物细胞 通过dna重组将目的基因插入植物细胞的 上 标准解析 1 限制酶能识别特定的dna序列 并在特定位点上切割dna 形成黏性末端或平末端 要使目的基因和质粒直接进行连接 应使用同一种限制酶进行切割 使二者产生相同的黏性末端 2 启动子为dna序列 其具有rna聚合酶结合位点 能启动转录 合成rna 将基因表达载体导入大肠杆菌时 常用ca2 处理 检测目的基因时 常用分子杂交技术检测目的基因或相应的mrna 或采用抗原 抗体杂交技术鉴定相应的蛋白质 3 用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞时 首先将目的基因导入农杆菌ti质粒的t dna中 再利用农杆菌侵染植物细胞 通过dna重组将目的基因插入植物细胞的染色体的dna上 答案 1 平相同 2 rna聚合酶识别和结合的位点 有了它才能驱动基因转录出mrna 最终获得所需要的蛋白质ca2 dna分子杂交技术人胰岛素 3 t dna染色体的dna 规律总结 1 一般使用同一种限制酶切割目的基因和载体 载体上带有标记基因 特殊情况下 只要切下的末端相同 也可使用不同的限制酶 2 目的基因导入受体细胞不是基因工程成功的标志 基因工程是否成功表现在目的基因是否成功表达 瞄准考向命题趋势预测2011年高考对本专题知识的考查可归纳如下 絮凝性细菌分泌的具有絮凝活性的高分子化合物 能与石油污水中的悬浮颗粒和有机物等形成絮状沉淀 起到净化污水的作用 为进一步提高对石油污水的净化效果 将絮凝性细菌和石油降解菌融合 构建目的菌株 其流程图如下 据图回答 1 溶菌酶的作用是 2 peg的作用是 3 经处理后 在再生培养基上 未融合的a b难以生长 图中ab融合菌能生长和繁殖的原因是 4 目的菌株的筛选 筛选既能分泌具有絮凝活性的化合物 又能在含有 的培养基上生长的ab融合菌 选择效果最好的作为目的菌株 5 为探究目的菌株不同发酵时间发酵液的絮凝效果 将目的菌株进行发酵培养 定时取发酵液 加入石油污水中 同时设置 为对照组 经搅拌 静置各3分钟后 分别测定上层水样的石油浓度和cod值 cod值越高表示有机物污染程度越高 计算石油去除率和cod去除率 结果如下图 6 目的菌的种群增长曲线呈 型 在40 44小时 发酵液对石油污水的净化效果最好 其原因是 解析 1 细胞融合是两个细胞原生质体的融合 细菌细胞膜外具有细胞壁 需要用溶菌酶除去细胞壁后才能进行融合 2 peg为聚乙二醇 其作用是诱导原生质体融合 3 未融合的a b失活部位不同 即活性部位不同 不能在培养基上生存 而融合后细菌的活性部位可互补 因而能够存活 4 由题意可知 目的菌株是将絮凝性细菌和石油降解菌融合后建立的 因此该菌株既能分泌具有絮凝活性的化合物 又能在含有石油的培养基上生存 5 该实验的目的是探究目的菌株不同发酵时间发酵液的絮凝效果 故需要设置不加发酵液的石油污水作为对照 从而确定目的菌株的絮凝效果 6 非理想条件下的种群数量增长曲线大多数呈s型 由图可知 cod去除率及石油去除率随目的菌相对数量的增加而增加 而去污效果取决于絮凝活性物质 故可判定40 44小时 发酵液净化效果最好的
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