（优质课件）夏建川生物治疗及在临床肿瘤治疗中的应用

结直肠癌 患者女70岁住院号 127551介入科入院诊断 直肠癌 肝转移2003 7 20第一次入院行直肠癌Dixon切除术 手术后三周第二次住院 对肝脏的病灶进行射频消融 射频消融后2003 8 16 2004 12 16进行8次CIK细胞免疫治疗 出院情况 80分 第三次入院 2004 1 25 2004 3 26行4次自体NK细胞治疗 目前一般情况好 肝肾功能正常 小便正常 KPS90分 到目前为此 共做30次细胞免疫治疗 2011年8月24号复查未见复发 患者每年到我们医院接受6 8次细胞免疫治疗 1 乳腺癌 病例一 病人 女 69岁 左乳腺癌术后患者 患者因左乳腺肿物3年于2004 7 29行左乳癌改良根治术 用环磷酰胺 阿霉素 5 氟脲嘧啶方案化疗2程 2004 10 22至2004 12 17行NK细胞回输6次 2005年4 9月行CIK细胞回输6次 每年接受8次体细胞免疫治疗 2007 11 20PET CT示未见复发 2011 10 18PET CT检查未见复发 目前 患者每年接受6 8次细胞免疫治疗 2 病人女50岁2009 3 17PET CT提示左乳肿物2009 3 20左乳区段切除 左腋窝淋巴结清扫术术后病理 大小为2x1 5x1 5cm 浸润性导管癌 级 ER PR Her 2 术后分期 T1N1M0 A期2009 4 10 09 8 7行剂量密集型 AC T 化疗各4程2009 8 31 09 10 14左乳 左锁骨上放疗2009 6 10 8细胞免疫治疗共24次 其中NK8次 D CIK12次 CIK4次 疗程间无长时间间隔 2011 8至今病情稳定 一般情况良好 乳腺癌 病例二 3 病人男50岁盲肠癌 Duke sD 肝转移 200 12CEA升高 肠镜病理 腺癌 级 PET CT 盲肠癌并肝转移瘤采用手术和化疗 生物治疗的综合治疗方案 术前新辅助化疗3次 术后辅助化疗9次 手术化疗期间均配合C225及细胞免疫治疗 之后进行以细胞免疫治疗为主的治疗 具体过程 08 1 7 08 2 4XELOX化疗3次2008 2 22右半肝切除术 肝内一个转移瘤切除术 区域淋巴结清扫术2008 3 11肝内另一个转移瘤射频消融治疗2008 3 18 08 7 8CR 5Fu化疗1次 FOLFIRI化疗8次2008 1 09 1细胞免疫治疗22次 其中NK6次 D CIK5次 CIK10次 D T1次2009 1 至今病情暂稳定 4 肺癌 病例一 患者男70岁住院号 151182综合科入院诊断 左上肺腺癌第一次住院行诱导化疗 后先后行gamma刀治疗及射频消融治疗 并于2005 12 6 2007 6 21共行CIK治疗 26次 DC CIK治疗 15次 出院时一般情况好 肿瘤标志物无升高 脑无占位 肺部病灶及纵隔淋巴结均无活性 到现在无瘤生存已36个月 这个病人是综合治疗的范例 5 男 76岁 非小细胞肺癌术后2009年7月右侧胸腔出现胸水2009年8月开始链式 CIK细胞免疫治疗8月3日第一次抽血 病人50 60ml 8月10日开始第一程链式 CIK回输到12月2日 共抽血培养9次 回输27次每次回输细胞数量8 23 107 4 8 1082009年10月16日CT证实胸水明显减少 病人一般情况良好 自觉较前改善 肺癌 病例二 6 女 65岁 非小细胞肺癌2009年8月开始链式 CIK细胞免疫治疗8月3日第一次抽血 病人50 60ml 8月10日开始第一程链式 CIK细胞免疫回输 静脉 皮下 到12月2日 共抽血培养8次 回输24次每次回输细胞数量5 107 2 108目前病灶稳定 似较前略有缩小 病人一般情况良好 自觉较前改善 肺癌 病例三 7 肿瘤细胞 恶性增殖 免疫逃逸 三 肿瘤的免疫基因治疗Immuno genetherapyofcancer 从广义上讲 根据免疫学的理论技术而建立的基因治疗方案 均属免疫基因治疗 Immunegenetherapy或Immunogenetherapy 8 I 493项I II 160项II 118项II III 7项III 19项 肿瘤的免疫基因治疗 抗原180项细胞因子247项 500项 9 美国FDA批准Provenge sipuleucel T 一种治疗晚期前列腺癌的患者免疫活性细胞 这标志进入新癌症治疗 自身免疫活性细胞治疗 2010 4 29 PROVENGE由自身外周血单核细胞组成 包括在确定的培养期间用一种重组人蛋白 PAP GM CSF已被活化的抗原提呈细胞 APCs 前列腺酸性磷酸酶 PAP 在前列腺癌组织中高表达的一种抗原 连接至免疫细胞激活剂粒 巨噬细胞集落刺激因子 GM CSF组成 刺激自体的T淋巴细胞 将这些经体外刺激的细胞回输给前列腺癌患者 从而达到治疗前列腺癌患者的目的 Sipuleucel T成为FDA历史上第一个批准上市的肿瘤疫苗 10 发病率高 病情进展缓慢 肿瘤相关抗原表达 化疗疗效有限 非必需 组织 前列腺癌细胞免疫治疗获得成功的原因 PSA PAP等 内分泌治疗无效的患者 此时肿瘤负荷较小 机体具有一定的抗肿瘤能力 NatRevImmunol 2010 10 580 593 11 肿瘤侵润性T细胞受体免疫基因治疗 免疫基因治疗在的肿瘤临床中的应用 12 Science 2006Oct6 314 5796 126 9 Epub2006Aug31 13 经基因修饰的自体DC细胞激活的T淋巴细胞的制备 T淋巴细胞 成熟DC细胞 DC细胞刺激的自体T淋巴细胞 DC T 肿瘤抗原 PBMNC 80 100ml 共培养 TNF IL 4GM CSF IL 2 负载肿瘤抗原的AAV感染 14 负载CEA抗原的DC刺激的T淋巴细胞的表型 15 一些抗原与肿瘤的发生发展密切相关 Viralantigens Primaryhepaticcarcinoma HepatitisBvirus HepatitisCvirusCervicalcancer Humanpapillomavirus E6 E7 2 Self antigens Lungcancer k19 Her 2 neu etc Primaryhepaticcarcinoma FP Breastcancer Her 2 neu BA46 etc Prostatecancer PSA PSMA 16 自体DC T淋巴细胞在恶性肿瘤治疗中的策略 肿瘤患者外周血 80 100ml 体外诱导DC T淋巴细胞 回输DC T淋巴细胞给术后的患者 一个月2次 特异性杀伤肿瘤细胞 抑制肿瘤的复发和转移 17 18 19 前列腺癌 患者 男 年龄 68岁2007年4月 常规体检时 发现PSA显著升高 100ng L穿刺活检提示 前列腺癌 Gleason评分 10分 胸部CT 未见异常 行内分泌治疗 诺雷德Zoladex goserelin 康士得 Casodex Bicalutamide PSA迅速下降 9个月后降至0 2以下 继续维持9个月后 选择了间断治疗 停用这两种药物 PSA迅速上升 6个月后升至16 继续内分泌治疗 PSA迅速降至0 16 以后就逐步上升 倍增时间14 16周 自2010年9月开始出现全身骨痛 以左髋部明显 胸腹部CT 椎体及髂骨广泛转移灶 全身骨扫描 中轴骨广泛转移 左髋臼及多处肋骨转移 2011 2 13 PSA 1376ng ml 2011 3 28开始进行生物治疗 回输两次DC T 2011 4 25PSA 737ng ml 2011 5 25回输四次DC T 负载PSA抗原的DC刺激的自体T淋巴细胞 一星期后检测PSA561ng ml 现在患者感觉精神改善 无明显副反应 生活能够完全自理 能够自由下床活动 左髋部不适改善 疼痛不明显 无需止痛药物 饮食可 精神可 20 DC T细胞免疫治疗 用负载前列腺癌细胞高表达抗原PSA和PSMA负载自体DC刺激的自体T淋巴细胞对前列腺癌患者治疗后 外周血中PSA水平明显下降 PSA 1376ng ml PSA561ng ml 21 根据不同肿瘤的生物学特性 肿瘤类型 分期和肿瘤的免疫源性 患者的遗传背景 是否具有家族倾向 目前的病情状况 体质 免疫状况 前期治疗方法 年龄等 在传统肿瘤治疗模式的基础上 制定出适合病人的个体化体细胞免疫治疗方案 三 如何制定出适合病人的个体化体细胞免疫治疗方案 22 肿瘤体细胞免疫治疗与常规治疗有机结合的治疗策略 恶性肿瘤 手术治疗 放化疗敏感 常规放化疗 疾病稳定期 专科治疗 不能手术 期 期 复发者 可手术 放化疗不敏感 细胞免疫治疗 化疗敏感化疗后 细胞免疫治疗联合专科治疗 靶向治疗 细胞免疫治疗联合内分泌或靶向治疗 细胞免疫治疗 微创介入 卵巢癌 乳腺癌 小细胞肺癌等 放化疗间隙联合细胞免疫治疗 肾癌 前列腺癌 黑色素瘤等 乳腺癌 卵巢癌 神经母细胞瘤 小细胞肺癌等 化疗不敏感 原发性肝癌 肾癌 前列腺癌等 疾病稳定期 23 一 针对老年肿瘤晚期患者 体质弱 免疫功能极度低下采取抽少量血多次回输的治疗方案 抽血30ml 第1天 先抽血30ml进行下个疗程治疗 同时进行第3次CIK回输 第1次CIK回输 第2次CIK回输 第4天 第8天 第12天 第14天 第16天 开始下一个疗程的治疗 24 二 细胞免疫治疗与化疗有机结合 化疗前1天抽血 免疫细胞分离培养 第一周 第二周 7天 开始化疗 第2次开始化疗 回输CIK NK D CIK等细胞 化疗前1天抽血 免疫细胞分离培养 25 三 体细胞免疫治疗联合放疗的增效方案 放疗前抽静脉血50ml 上午 放疗 放疗 放疗 上午放疗后 下午回输免疫细胞 第2天周二 第3天周三 第1天周一 第4天周四 第6天周六 第7天周日 第5天 周五下午回输培养的CIK NK D CIK等细胞 休息 休息 26 四 抗肿瘤效应细胞交替使用方案 第一周NK 第二周D CIK 第三周NK 第四周D CIK 抽血30ml 回输第三周NK 抽血50ml 抽血30ml 回输第一周NK 抽血50ml 回书第二周D CIK 第五周 第六周 回输第四周D CIK 27 五 体细胞免疫治疗联合抗肿瘤的细胞因子 抗肿瘤抗体 生物分子靶向药物增强疗效的方案 Thresholdfortumorregression Immunestimulation inflammation Spontaneousreleaseofimmunemodulatorsbytumorcells Spontaneousregression responsetotherapy Tumorprogression Antigen specificImmunization 生物靶向药物 抗肿瘤抗体和小分子化合物 NKcells CIKcells D CIK IL 2 IFN 28 采用的治疗方案 Thresholdfortumorregression Immunestimulation inflammation Spontaneousreleaseofimmunemodulatorsbytumorcells Spontaneousregression responsetotherapy Tumorprogression Antigen specificImmunization 生物靶向药物 C225 Iressa NKcells CIKcellsIL 2 IFN 29 恶性肿瘤发生转移的示意图 30 Inductionofanti tumorimmunizationinhumanwithDCVaccination 31 体细胞治疗在临床肿瘤治疗中的作用 1 恶性肿瘤综合治疗的一部分 常规治疗后的巩固治疗 2 一些免疫原性较强的恶性肿瘤 如肾癌 恶性黑色素瘤 恶性神经胶质瘤 或对化疗和放疗不敏感肿瘤 原发性肝癌 在手术或介入微创治疗 使肿瘤负荷降低后可直接进行细胞免疫治疗 3 通常在进行体细胞免疫治疗前 要降低肿瘤负荷 4 体细胞免疫治疗联合抗肿瘤的细胞因子 抗肿瘤抗体 生物靶向药物能取得更好的疗效 因此 肿瘤患者在综合治疗原则下辅以个体化的细胞免疫治疗 能取得更好的预后 32 ChesterSoutham 在五十年代首次给志愿者注射活的癌细胞 结果 注射的癌细胞在健康人体内不生长 注射的癌细胞在癌症病人体内可长成大肿瘤 结论 癌症病人体内失去健康人所具有广谱抗癌活性 研究项目受到伦理学及法律的极大挑战 研究结果为抗癌界带来极大提示 1968年被推选成全美抗癌学会主席 Science 1957年一月125 158 160 首次证明人体内天然抗癌活性的存在 五 人体免疫与肿瘤的发生 33 非粒细胞单核细胞 粒细胞 血浆 红细胞 人体白细胞分离 离心 人体粒细胞抗肿瘤的研究 34 中性粒细胞 嗜碱性粒细胞 嗜酸性粒细胞 淋巴细胞 单核细胞 巨噬细胞 人体内白细胞分类 粒细胞 非粒细胞 35 接触病原 自然免疫 自然杀伤细胞巨噬细胞中性粒细胞补体 需要几小时或几天 获得免疫 B淋巴细胞 抗体 T淋巴细胞 需要几星期 免疫系统的两大分支 36 12 5 25 0 37 5 50 0 75 0 62 5