实验仪器使用规范实验报告.doc

专业综合实验报告本题目： 食品生物技术实验技能培训 形式： 系列实验 时间： 2011 年 11 月 01 日 2011 年 11月 25 日专 业： 食品科学与工程 班 级： 食科0803 学 号： 0103080307 学生姓名： 张均叶 指导教师： 王刚 （职称： 导师 ） 江南大学食品学院目录：1、 细胞破碎、PH计、天平2、 震荡器、水浴锅、磁力搅拌器、微生物实验室规章3、 接种和平板划线、显微镜、革兰氏染色4、 分光光度计、超声波清洗机、紫外光度计、无菌室及药品室规章5、灭菌锅、培养基、包培养皿6、旋转蒸发仪、循环水式真空泵、厌氧工作站7、蛋白电泳、移液枪8、酶标仪、洗板机、ELISA、分子实验室规章9、在线发酵罐、氮吹仪10、摇床、干燥箱、振荡水槽、生物安全柜11、离心机、冷冻干燥机12、PCR仪、核酸电泳、配缓冲液13、紫外投射仪、14、凝胶成像仪15、气相色谱仪16、超滤17、nanodrop18、液相色谱仪19、AKTApurifer层析仪20、常规柱子（分子筛）、自动收集器江南大学实验报告实验一：细胞破碎、PH计、天平仪器名称：细胞破碎工作原理：超声对细胞的作用主要有热效应，空化效应和机械效应。热效应是当超声在介质中传播时，摩擦力阻碍了由超声引起的分子震动，使部分能量转化为局部高热，因为正常组织的临界致死温度为45.7，而肿瘤组织比正常组织敏感性高，故在此温度下肿瘤细胞的代谢发生障碍，DNA、RNA、蛋白质合成受到影响，从而杀伤癌细胞而正常组织不受影响。空化效应是在超声照射下，生物体内形成空泡，随着空泡震动和其猛烈的聚爆而产生出机械剪切压力和动荡，使肿瘤出血、组织瓦解以致坏死。简单说就是将电能通过换能器转换为声能，这种能量通过液体介质而变成一个个密集的小气泡，这些小气泡迅速炸裂，产生的象小炸弹一样的能量，从而起到破碎细胞等物质的作用。操作步骤：超声波细胞破碎仪具有破碎组织、细菌、病毒、孢子及其它细胞结构，匀质、乳化、混合、脱气、崩解和分散、浸出和提取，加速反映等功能。仪器名称：pH计工作原理：pH计是通过pH电极在溶液里产生的电位差，经过高增益的放大器驱动仪表指示。操作步骤：pH玻璃电极的贮存：短期：贮存在pH4的缓冲溶液中；长期：贮存在pH7的缓冲溶液中。pH玻璃电极的清洗玻璃电极球泡受污染可能使电极响应时间加长。可用CCl4或皂液揩去污物，然后浸入蒸馏水一昼夜后继续使用。污染严重时，可用5HF溶液浸1020分钟，立即用水冲洗干净，然后浸入0.1N HCl溶液一昼夜后继续使用。玻璃电极老化的处理：玻璃电极的老化与胶层结构渐进变化有关。旧电极响应迟缓，膜电阻高，斜率低。用氢氟酸浸蚀掉外层胶层，经常能改善电极性能。若能用此法定期清除内外层胶层，则电极的寿命几乎是无限的。参比电极的贮存：银-氯化银电极最好的贮存液是饱和氯化钾溶液,高浓度氯化钾溶液可以防止氯化银在液接界处沉淀，并维持液接界处于工作状态。此方法也适用于复合电极的贮存。玻璃电极的一般检查方法（1）检查零电位：设置pH计在“mV”测量档，将玻璃电极和参比电极一起插入pH6.86的缓冲溶液中，仪器的读数应大约为5050mV；（2）检查斜率：再测pH=4.00或pH=9.18的缓冲溶液的mV值，计算电极的斜率，电极的相对斜率一般应复合技术指标。注意事项：玻璃电极插座应保持干燥、清洁，严禁接触酸雾、盐雾等有害气体，严禁沾上水溶液，保证仪器的高输入阻抗。不进行测量时，应将输入短路，以免损坏仪器。新电极或久置不用的电极在使用前，必须在蒸馏水中浸泡数小时。使电极不对称电位降低达到稳定，降低电极内阻。测量时，电极球泡应全部浸入被测溶液中。使用时，应使内参比电极浸在内参比溶液中，不要让内参比溶液倒向电极帽一端，使内参比悬空。使用时，应拔去参比电极电解液加液口的橡皮塞，以使参比电解液（盐桥）借重力作用维持一定流速渗透并与被测溶液相通。否则，会造成读数漂移。氯化钾溶液中应该没有气泡，以免使测量回路断开。应该经常添加氯化钾盐桥溶液，保持液面高于银/氯化银丝。仪器名称：天平工作原理：天平是实验室中常用的仪器。天平是一种衡器，是衡量物体质量的仪器。它依据杠杆原理制成，在杠杆的两端各有一小盘，一端放砝码，另一端放要称的物体，杠杆中央装有指针，两端平衡时，两端的质量（重量）相等。这些道理对学过物理学的人来说已经是老生常谈了。现代的天平，越来越精密，越来越灵敏，种类也越来越多。我们都知道，有普通天平、分析天平，有常量分析天平、微量分析天平、半微量分析天平，等等。操作步骤：要放置在水平的地方。游码要归零。调节平衡螺母(天平两端的螺母)调节零点直至指针对准中央刻度线。左托盘放称量物，右托盘放砝码。根据称量物的性状应放在玻璃器皿或洁净的纸上，事先应在同一天平上称得玻璃器皿或纸片的质量，然后称量待称物质。添加砝码从估计称量物的最大值加起，逐步减小。托盘天平只能称准到0.1克。加减砝码并移动标尺上的游码，直至指针再次对准中央刻度线。过冷过热的物体不可放在天平上称量。应先在干燥器内放置至室温后再称。物体的质量 =砝码+游码取用砝码必须用镊子，取下的砝码应放在砝码盒中，称量完毕，应把游码移回零点。称量干燥的固体药品时，应在两个托盘上各放一张相同质量的纸，然后把药品放在纸上称量。易潮解的药品，必须放在玻璃器皿上（如：小烧杯、表面皿）里称量。砝码若生锈，测量结果偏小；砝码若磨损，测量结果偏大。注意事项：要放置在水平的地方.使用前要使天平左右平衡（游码必须归“0”平衡螺母向相反方向调）。砝码不能用手拿,要用镊子夹取。千万不能把砝码弄湿、弄脏，游码也要用镊子拨动。被测物体的质量不能超过称量或低于感量.潮湿的物体和化学药品不能直接放在天平的盘中。称量时注意左物右码称量后要把游码归零,砝码用镊子放回砝码盒。实验二：震荡器、水浴锅、磁力搅拌器、微生物实验室规章仪器名称：震荡器工作原理：主要有由电容器和电感器组成的LC回路，通过电场能和磁场能的相互转换产程自由振荡。要维持振荡还要有具有正反馈的放大电路，LC振荡器又分为变压器耦合式和三点式振荡器，很多应用石英晶体的石英晶体振荡器，还有用集成运放组成的LC振荡器。由于器件不可能参数完全一致，因此在上电的瞬间两个三极管的状态就发生了变化，这个变化由于正反馈的作用越来越强烈，导致到达一个暂稳态。暂稳态期间另一个三极管经电容逐步充电后导通或者截止，状态发生翻转，到达另一个暂稳态。这样周而复始形成振荡。操作步骤：装入试验瓶，并保持平衡，如是双功能机型，设定振荡方式。接通电源，根据机器表面刻度设定定时时间，如需长时间工作，将定时器调至“常开”位置。打开电源开关，设定恒温温度：（1）将控制小开关置于“设定”段，此时显示屏显示的温度为设定的温度，调节旋钮，设置到您工作所需温度即可；（您设定的工作温度应高于环境温度，此时机器开始加热，黄色指示灯亮，否则机器不工作）（2）将控制部分小开关置于“测量”端，此时显示屏显示的温度为试验箱内空气的实际温度，随着箱内气温的变化，显示的数字也会相应变化；（3）当加热到您所需的温度时，加热会自动停止，绿色指示灯亮；当试验箱内的热量散发，低于您所设定的温度时，新的一轮加热又会开始。开启振荡装置：（1） 打开控制面板上的振荡开关，指示灯亮；（2） 调节振荡速度旋钮至所需的振荡频率。工作完毕切断电源，置调速旋钮与控温旋钮至最低点。清洁机器，保持干净。注意事项：器具应放置在较牢固的工作台面上，环境应清洁整齐，通风良好。用户提供的电源插座应有良好的接地措施。严禁在正常工作的时候移动机器。严禁物体撞击机器。严禁儿童接近机器，以防发生意外。更换熔断器前应先确保电源已切断。使用结束后请清理机器，不能留有水滴、污物残留。仪器名称：水浴锅工作原理：恒温水浴锅内水平放置不锈钢管状加热器，水槽的内部放有带孔的铝制搁板。上盖上配有不同口径的组合套圈，可适应不同口径的烧瓶。水浴锅左侧有放水管，恒温水浴锅右侧是电气箱，电气箱前面板上装有温度控制仪表、电源开关。电气箱内有电热管和传感器。该温度控制系统采用了优质电子元件，控温灵敏、性能可靠、使用方便。其工作原理：Cu50传感器将水槽内水的温度转换为电阻值，经过集成放大器的放大、比较后，输出控制信号，有效地控制电加热管的平均加热功率，使水槽内的水保持恒温。操作步骤：电子恒温水浴锅应放在固定平台上，先将排水口的胶管夹紧，再将清水注入水浴锅箱体内（为缩短升温时间，亦可注入热水）。接通电源，显示OFF的红色指示灯亮，旋转温度调节旋钮至设定的温度（顺时针升温，逆时针降温），水开始被加热，指示灯ON亮；当温度上升到设定温度时，指示灯OFF亮，水开始被恒温。水浴恒温后，将装有待恒温物品的容器放于水浴中开始恒温。恒温时为了保证恒温的效果，可在恒温容器于箱体接触的部位用硬纸板封严，恒温容器中的恒温物品应低于水浴锅的恒温水浴面。使用完毕后，取出恒温物，关闭电源，排除箱体内的水。并做好仪器使用记录。注意事项：水箱应放在固定的平台上，仪器所接电源电压应为220V，电源插座应采用三孔安装插座，并必须安装地线。加水之前切物接通电源，而且在使用过程中，水位必须高于不锈钢隔板，切勿无水或水位低于隔板加热，否则会损坏加热管。工作完毕，将温控旋钮、增减器置于最小值，切断电源。如果要锅内水温达100，作沸水蒸馏用时，可将调节旋钮调至终点。加水不可太多，以免沸腾时水量溢出锅外，锅内水量不可低于二分之一，不可使加热管露出水面，以免烧坏，造成漏水，漏电。使用时必须将三眼插座有效接地线。仪器名称：磁力搅拌器工作原理：利用磁性物质同性相斥的特性，通过不断变换基座的两端的极性来推动磁性搅拌仔转动。操作步骤：接通电源，开电源开关。调节调速旋钮，由慢至快调节到所需速度，不允许高速档起动，以免搅拌子因不可同步而跳子。需加热时，开加热开关，调节加热温度。需控温时，将温度传感器插头插入仪器后板插座内，传感器探头插入试验溶液中，调准温控仪的设定温度即进入温度自动控制工作状态。注意事项：搅拌时发现搅拌子跳动或不搅拌时，请切断电源检查一下烧杯底是否平、位置是否正、同时请您测一下，现用的电压是在220V10V 之间，否则将会出现以上情况。加热时间一般不宜过长，间歇使用延长寿命，不搅拌时不加热。中速运转可连续工作8小时，高速运转可连续工作4小时，工作时防止剧烈震动。 用电：电源插座应采用三孔安全插座，必须妥善接地。仪器应保持清洁干燥，严禁溶液流入机内，以免损坏机器，不工作时应切断电源。实验三：接种和平板划线、显微镜、革兰氏染色接种和平板划线仪器名称：接种环、酒精灯、培养皿工作原理：由接种环以菌操作沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。操作步骤：左手持皿用拇指、食指和中指将皿盖揭开越20-30度左右,角度越小遭空气污染的可能性越小,并靠近酒精灯附近操作。右手持接种环，先在酒精灯灭菌，然后取菌液，将沾菌接种环在培养基的边缘划原始线，而后使接种环在指力作用下作轻快的滑移动作，从培养皿的一个边缘滑向另一个边缘，滑动时用力要均匀，切勿将接种环嵌入培养基内。仪器名称：显微镜工作原理：光学显微镜主要由目镜、物镜、载物台和反光镜组成。目镜和物镜都是凸透镜，焦距不同。物镜相当于投影仪的镜头，物体通过物镜成倒立、放大的实像。目镜相当于普通的放大镜，该实像又通过目镜成正立、放大的虚像。反光镜用来反射，照亮被观察的物体。反光镜一般有两个反射面：一个是平面，在光线较强时使用；一个是凹面，在光线较弱时使用。操作步骤：利用自然光源镜检时，最好用朝北的光源，不宜3采用直射阳光；利用人工光源时，宜用日光灯的光源。镜检时身体要正对实习台，采取端正的姿态，两眼自然张开，左眼观察标本，右眼观察记录及绘图，同时左手调节焦距，使物象清晰并移动标本视野。右手记录、绘图。镜检时载物台不可倾斜，因为当在五套载物台倾斜时，液体或油易流出，既损坏了标本，又污染载物台，也影响检查结果。镜检时应将标本按一定方向移动视野，直至整个标本观察完毕，以便不漏检，不重复。显微镜的重光为对光，接物镜的转换及光线的调节。观察寄生虫标本时，光线调节甚为重要。因为所观察的标本如虫卵、包囊等，均为自然光状态的物体，有大有小，色泽有深有浅，有的无色透明，而低倍、高倍接物镜转换较多，故须随着镜检时对不同标本和要求，需要随时调节焦距和光线，这样才能使观察的物象清晰。在一般情况下，染色标本光线宜强，无色或未染色标本光线宜弱；低倍镜观察光线宜弱，高倍镜观察光线宜强。注意事项：防潮，如果室内潮湿，光学镜片就容易生霉、生雾。防尘，光学元件表面落入灰尘，不仅影响光线通过，而且经光学系统放大后，会生成很大的污斑，影响观察。灰尘、砂粒落入机械部分，还会增加磨损，引起运动受阻，危害同样很大。因此，必须经常保持显微镜的清洁。防腐蚀，显微镜不能和具有腐蚀性的化学试剂放在一起。如硫酸、盐酸、强碱等。防热，防热的目的主要是为了避免热胀冷缩引起镜片的开胶与脱落。仪器名称：革兰氏染色工作原理：通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇或丙酮脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。操作步骤：兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤。涂片固定。草酸铵结晶紫染1分钟。去离子水冲洗。加碘液覆盖涂面染约1分钟。水洗，用吸水纸吸去水分。加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20秒后水洗，吸去水分。蕃红或沙黄色液（稀）染2分钟后，去离子水冲洗。干燥，镜检。注意事项：在实验中经常会出现假阳性和假阴性的结果，假阳性主要是由于脱色不完全，可能是由于涂片过厚，或者是结晶紫染色过度，导致脱色不完全。假阴性可能是因为细胞固定过度，造成细胞壁通透性的改变，而出现假阴性结果；另外，细胞培养时间太长，可能已经有部分细胞发生死亡或者自溶，也导致细胞壁通透性的改变而出现假阴性结果。实验四：分光光度计、超声波清洗机、紫外光度计、无菌室及药品室规章仪器名称：分光光度计工作原理：分光光度法则是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析。常用的波长范围为：(1)200400nm的紫外光区,(2)400760nm的可见光区,(3)2.525m（按波数计为4000cm400cm）的红外光区。所用仪器为紫外分光光度计、可见光分光光度计（或比色计）、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。为保证测量的精密度和准确度，所有仪器应按照国家计量检定规程或本附录规定，定期进行校正检定。操作步骤：接通电源，打开仪器开关，掀开样品室暗箱盖，预热10分钟。将灵敏度开关调至“1”档（若零点调节器调不到“0”时，需选用较高档。）根据所需波长转动波长选择钮。将空白液及测定液分别倒入比色杯3/4处，用擦镜纸擦清外壁，放入样品室内，使空白管对准光路。在暗箱盖开启状态下调节零点调节器，使读数盘指针指向t=0处。盖上暗箱盖，调节“100”调节器，使空白管的t=100，指针稳定后逐步拉出样品滑竿，分别读出测定管的光密度值，并记录。比色完毕，关上电源，取出比色皿洗净，样品室用软布或软纸擦净。注意事项：该仪器应放在干燥的房间内，使用时放置在坚固平稳的工作台上，室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风，防止灯泡灯丝发亮不稳定。使用本仪器前，使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理，以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前，应该对仪器的安全性能进行检查，电源接线应牢固，通电也要良好，各个调节旋钮的起始位置应该正确，然后再按通电源开关。在仪器尚未接通电源时，电表指针必须于“0”刻线上，若不是这种情况，则可以用电表上的校正螺丝进行调节。仪器名称：超声波清洗机工作原理：将换能器，将功率超声频源的声能，并且要转换成机械振动，通过清洗槽壁使之将槽子中的清洗液辐射到超声波。由于受到辐射的超声波，使之槽内液体中的微气泡能够在声波的作用下从而保持振动。当声压或者声强受到压力到达一定程度时候，气泡就会迅速膨胀，然后又突然闭合。在这段过程中，气泡闭合的瞬间产生冲击波，使气泡周围产生1012-1013pa的压力及局调温，这种超声波空化所产生的巨大压力能破坏不溶性污物而使他们分化于溶液中，蒸汽型空化对污垢的直接反复冲击。一方面破坏污物与清洗件表面的吸附，另一方面能引起污物层的疲劳破坏而被驳离，气体型气泡的振动对固体表面进行擦洗，污层一旦有缝可钻，气泡立即“钻入”振动使污层脱落，由于空化作用，两种液体在界面迅速分散而乳化，当固体粒子被油污裹着而粘附在清洗件表面时，油被乳化、固体粒子自行脱落，超声在清洗液中传播时会产生正负交变的声压，形成射流，冲击清洗件，同时由于非线性效应会产生声流和微声流，而超声空化在固体和液体界面会产生高速的微射流，所有这些作用，能够破坏污物，除去或削弱边界污层，增加搅拌、扩散作用，加速可溶性污物的溶解，强化化学清洗剂的清洗作用。由此可见，凡是液体能浸到且声场存在的地方都有清洗作用，其特点适用于表面形状非常复杂的零件的清洗。尤其是采用这一技术后，可减少化学溶剂的用量，从而大大降低环境污染。注意事项：超声波清洗机电源及电热器电源必须有良好接地装置。超声波清洗机严禁无清洗液开机，即清洗缸没有加一定数量的清洗液，不得合超声波开关。 有加热设备的清洗设备严禁无液时打开加热开关。禁止用重物(铁件)撞击清洗缸缸底，以免能量转换器晶片受损。超声波发生器电源应单独使用一路220V/50Hz电源并配装2000W以上稳压器。清洗缸缸底要定期冲洗，不得有过多的杂物或污垢。每次换新液时，待超声波起动后，方可洗件。仪器名称：紫外分光光度计工作原理：紫外分光光度计基本工作原理和红外光谱仪相似，利用一定频率的紫外-可见光照射被分析的有机物质，引起分子中价电子的跃迁，它将有选择地被吸收。一组吸收随波长而变化的光谱，反映了试样的特征。在紫外可见光的范围内，对于一个特定的波长，吸收的程度正比于试样中该成分的浓度，因此测量光谱可以进行定性分析，而且根据吸收与已知浓度的标样的比较，还能进行定量分析操作步骤：紫外-可见光谱仪涉及的波长范围是0.20.8m（对应波数5000012500-1），它在有机化学研究中得到广泛的应用。通常用作物质鉴定、纯度检查，有机分子结构的研究。在定量方面，可测定结构比较复杂的化合物和混合物中各组分的含量，也可以测定物质的离解常数，络合物的稳定常数，物质分子量鉴别和微量滴定中指示终点以及在高效液相色谱中作检测器等。注意事项：使用的吸收池必须洁净，并注意配对使用。量瓶、移液吸管均应校正、洗净后使用。取吸收池时，手指应拿毛玻璃面的两侧，装盛样品以池体的4/5为度，使用挥发性溶液时应加盖，透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净，检视应无溶剂残留。吸收池放入样品室时应注意方向相同。用后用溶剂或水冲洗干净，晾干防尘保存。供试品溶液浓度除各该品种已有注明外，其吸收度以在0.30.7之间为宜。测定时除另有规定外，应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照，采用1cm石英吸收池，在规定的吸收峰2nm以内，测几个点的吸收度或由仪器在规定的波长附近自动扫描测定，以核对供试品的吸收峰位置是否正确，并以吸收度最大的波长作为测定波长，除另有规定外吸收度最大波长应在该品种项下规定的测定波长2nm以内。供试品应取2份，如为对照品比较法，对照品一般也应取2份。平行操作，每份结果对平均值的偏差应在0.5%以内。选用仪器的狭缝宽度应小于供试品吸收带的半宽度，否则测得的吸收度值会偏低，狭缝宽度的选择应以减少狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准，对于大部分被测品种，可以使用2nm缝宽。选用仪器的狭缝宽度应小于供试品吸收带的半宽度，否则测得的吸收度值会偏低，狭缝宽度的选择应以减少狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准，对于大部分被测品种，可以使用2nm缝宽。实验五：灭菌锅、培养基、包培养皿仪器名称：灭菌锅工作原理：用微电脑智能化全自动控制，控制灭菌压力、温度、时间；超温自动保护置：超过设定温度，自动切断加热电源；门安全连锁装置：内腔有压力，门盖无法打开，专利装置；低水位报警：缺水时能自动切断电源，声光报警，进口断水检测装置；漏电保护：配置漏电保护装置；温度动态数字显示，灭菌结束发出结束信号；升温、灭菌、排汽、干燥过程自动控制，无须人工监管；模式一：加热-灭菌-排汽；模式二：加热-灭菌-脉冲排汽；模式三：加热-灭菌-不排汽，模式四：自定义。操作步骤：在外层锅内加适量的水，将需要灭菌的物品放入内层锅，盖好锅盖并对称地扭紧螺旋。加热使锅内产生蒸气，当压力表指针达到 33.78kPa时，打开排气阀，将冷空气排出，此时压力表指针下降，当指针下降至零时，即将排气阀关好。继续加热，锅内蒸气增加，压力表指针又上升，当锅内压力增加到所需压力时，将火力减小，按所灭菌物品的特点，使蒸气压力维持所需压力一定时间，然后将灭菌器断电或断火，让其自然冷后再慢慢打开排气阀以排除余气，然后才能开盖取物。注意事项：待灭菌的物品放置不宜过紧。必须将冷空气充分排除，否则锅内温度达不到规定温度，影响灭菌效果。灭菌完毕后，不可放气减压，否则瓶内液体会剧烈沸腾，冲掉瓶塞而外溢甚至导致容器爆裂。须待灭菌器内压力降至与大气压相等后才可开盖。现在已有微电脑自动控制的高压蒸气灭菌锅，只需放去冷气后，仪器即可自动恒压定时，时间一到则自动切断电源并鸣笛，使用起来很方便。仪器名称：培养基工作原理：培养基能够满足产物最经济的合成。 发酵后所形成的副产物尽可能的少。 培养基的原料应因地制宜，价格低廉；且性能稳定，资源丰富，便于采购运输，适合大规模储藏，能保证生产上的供应。 所选用的培养基应能满足总体工艺的要求，如不应该影响通气、提取、纯化及废物处理等。操作步骤：培养基设计的基本步骤是：根据前人的经验和培养基成分确定时一些必须考虑的问题，初步确定可能的培养基成分通过单因子实验最终确定出最为适宜的培养基成分当培养基成分确定后，剩下的问题就是各成分最适的浓度，由于培养基成分很多，为减少实验次数常采用一些合理的实验设计方法。这些实验往往基于多因子实验，包含均匀设计、正交实验设计、响应面分析等。仪器名称：包培养皿操作步骤：用报纸把培养皿完整的包起来，然后用线缠紧固定。注意事项：不能有缝隙。保证报纸完整。实验六：旋转蒸发仪、循环水式真空泵、厌氧工作站仪器名称：旋转蒸发仪工作原理：通过电子控制，使烧瓶在最适合速度下,恒速旋转以增大蒸发面积。通过真空泵使蒸发烧瓶处于负压状态。蒸发烧瓶在旋转同时置于水浴锅中恒温加热，瓶内溶液在负压下在旋转烧瓶内进行加热扩散蒸发。旋转蒸发器系统可以密封减压至 400600毫米汞柱；用加热浴加热蒸馏瓶中的溶剂，加热温度可接近该溶剂的沸点；同时还可进行旋转，速度为50160转/分，使溶剂形成薄膜，增大蒸发面积。此外，在高效冷却器作用下，可将热蒸气迅速液化，加快蒸发速率。操作步骤：高低调节:手动升降,转动机柱上面手轮,顺转为上升,逆转为下降。电动升降,手触上升键主机上升,手触下降键主机下降。 冷凝器上有两个外接头是接冷却水用的,一头接进水,另一头接出水,一般接自来水,冷凝水温度越低效果越好。上端口装抽真空接头,接真空泵皮管抽真空用的。开机前先将调速旋钮左旋到最小,按下电源开关指示灯亮,然后慢慢往右旋至所需要的转速,一般大蒸发瓶用中,低速,粘度大的溶液用较低转速.烧瓶是标准接口24号,随机附500ml、1000ml两种烧瓶,溶液量一般不超过50%为适宜。注意事项：如真空抽不上来需检查：各接头,接口是否密封；密封圈,密封面是否有效；主轴与密封圈之间真空脂是否涂好；真空泵及其皮管是否漏气；玻璃件是否有裂缝,碎裂,损坏的现象。各磨口,密封面密封圈及接头安装前都需要涂一层真空脂。 加热槽通电前必须加水,不允许无水干烧。 拧入保险孔内保险,以免损坏烧瓶。玻璃零件接装应轻拿轻放,装前应洗干净,擦干或烘干。仪器名称：循环水式真空泵注意事项：真空泵主要用于容器抽真空及抽滤操作过程。如果使用时间较长需要用外接循环水，如果时间不长，则没必要开循环水。真空泵使用一段时间后要换水、清洗，否则内部零件使用寿命会降低。真空泵换水需使用去离子水，不可直接用自来水，避免内部零件生锈。仪器名称：厌氧罐操作步骤：把培养皿成摞放入防护台，再放入罐内；用250ml的烧杯装入5g焦性没食子酸、10g NaHCO3 固体以及200ml去离子水，溶解充分后放入罐内，目的是利用没食子酸与NaHCO3反应从而消耗O2；为防止平板倾倒，在罐内空余部分塞报纸，使平板更加稳固，盖上罐盖；用真空泵抽真空，真空度-0.85bar，一般就去-0.85bar，实验室的厌氧罐所带压力表的读数不准确，需要参照真空泵的压力表的读数；充N2使罐内真空度为零即可，但一般会多充一些反复上述抽真空及充气的操作3次后，将厌氧罐置于培养箱中进行培养。实验七：蛋白电泳、移液枪仪器名称：蛋白电泳工作原理：蛋白质电泳（一般指SDS-PAGE）一般使用的都是聚丙烯酰胺凝胶电泳，电泳的驱动力靠与蛋白质结合的SDS上所携带的负电荷。在SDS-PAGE中，SDS将蛋白质变性成直线分子并紧密包裹于其上，使得其所携带的电荷与蛋白分子量成了一定的比例。注意事项：固定玻璃板时，两边用力一定要均匀，防止夹坏玻璃板；凝胶配制过程要迅速, 催化剂TEMED要在注胶前再加入,否则凝结无法注胶，注胶过程最好一次性完成,避免产生气泡水封的目的是为了使分离胶上延平直，并排除气泡凝胶聚合好的标志是胶与水层之间形成清晰的界面；样梳需一次平稳插入,梳口处不得有气泡,梳底需水平要使锯齿孔内的气泡全部排出,否则会影响加样效果注射器不可过低,以防刺破胶体,也不可过高,在样下沉时会发生扩散为避免边缘效应,最好选用中部的孔注样剥胶时要小心,保持胶完好无损,染色要充分操作台上，部分物件可直接用手接触，但是试验台、胶版是要戴手套操作的，一定要注意实验安全。仪器名称：移液枪工作原理：移液枪的工作原理是活塞通过弹簧的伸缩运动来实现吸液和放液。在活塞推动下，排出部分空气，利用大气压吸入液体，再由活塞推动空气排出液体。使用移液枪时，配合弹簧的伸缩性特点来操作，可以很好地控制移液的速度和力度。操作步骤：在调节量程时，如果要从大体积调为小体积，则按照正常的调节方法，逆时针旋转旋钮即可；但如果要从小体积调为大体积时，则可先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度，再回调至设定体积，这样可以保证量取的最高精确度。在该过程中，千万不要将按钮旋出量程，否则会卡住内部机械装置而损坏了移液枪。在将枪头套上移液枪时，很多人会使劲地在枪头盒子上敲几下，这时错误的做法，因为这样会导致移液枪的内部配件（如弹簧）因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散，甚至会导致刻度调节旋钮卡住。正确的方法是将移液枪（器）垂直插入枪头中，稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合。如果是多道（如8道或12道）移液枪，则可以将移液枪的第一道对准第一个枪头，然后倾斜地插入，往前后方向摇动即可卡紧。枪头卡紧的标志是略为超过O型环，并可以看到连接部分形成清晰的密封圈。移液之前，要保证移液器、枪头和液体处于相同温度。吸取液体时，移液器保持竖直状态，将枪头插入液面下23。在吸液之前，可以先吸放几次液体以润湿吸液嘴（尤其是要吸取粘稠或密度与水不同的液体时）。这时可以采取两种移液方法。一是前进移液法。用大拇指将按钮按下至第一停点，然后慢慢松开按钮回原点。接着将按钮按至第一停点排出液体，稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残余的液体。最后松开按钮。二是反向移液法。此法一般用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体，其原理就是先吸入多于设置量程的液体，转移液体的时候不用吹出残余的液体。先按下按钮至第二停点，慢慢松开按钮至原点。接着将按钮按至第一停点排出设置好量程的液体，继续保持按住按钮位于第一停点（千万别再往下按），取下有残留液体的枪头，弃之。使用完毕，可以将其竖直挂在移液枪架上，但要小心别掉下来。当移液器枪头里有液体时，切勿将移液器水平放置或倒置，以免液体倒流腐蚀活塞弹簧。注意事项：要根据需要选择合适的量程，不要超过最大量程，并且根据量程选择合适的枪头；把移液枪插入枪头中，只需稍用力左右旋转即可，千万不可上下使劲剁，小心把移液枪内部精细部件损坏了；吸取溶液时，吸头浸入角度控制在倾斜20度之内，保持竖直为佳，吸取时要缓慢吸取；定期检查移液器的密封状况，一旦发现密封老化或出现漏液，须及时更换密封圈；移液枪不可用火烧，不可放入灭菌锅进行灭菌，只能用酒精棉擦拭；使用完毕，应将移液枪调整至最大量程，目的是使枪内弹簧处于松弛状态，防止处于压缩状态弹性下降；吸取了液体的移液枪不可平放，更不可倒置，使用完毕需要将移液枪挂在枪架上。实验八：酶标仪、洗板机、ELISA、分子实验室规章仪器名称：酶标仪工作原理：酶标仪实际上就是一台变相的专用光电比色计或分光光度计，其基本工作原理与主要结构和光电比色计基本相同。光源灯发出的光波经过滤光片或单色器变成一束单色光，进入塑料微孔极中的待测标本。该单色光一部分被标本吸收，另一部分则透过标本照射到光电检测器上，光电检测器将这一待测标本不同而强弱不同的光信号转换成相应的电信号.电信号经前置放大、对数放大、模数转换等信号处理后送入微处理器进行数据处理和计算,最后由显示器和打印机显示结果。 微处理机还通过控制电路控制机械驱动机构X方向和Y方向的运动来移动微孔板，从而实现自动进样检测过程.而另一些酶标仪则是采用手工移动微孔板进行检测,因此省去了X，Y方向的机械驱动机构和控制电路，从而使仪器更小巧，结构也更简单。操作步骤：打开酶标仪后部的电源开关，仪器开始自检并预热1min打开电脑启动菜单中的“Laboratory Transmit”软件。点击“File/Connect”,将酶标仪与电脑相连。在菜单“Setting”里选择所需波长的滤光片、读书方式等参数。点击“Measure”按钮，酶标仪开始测量数据。点击“Display”按钮，显示读数结果。测量完毕，关闭酶标仪，套上防尘罩，关闭电脑的显示器开关，勿关闭电脑主机。注意事项：使用加液器加液，加液头不能混用。洗板要洗干净。如果条件允许，使用洗板机洗板，避免交叉污染。严格按照试剂盒的说明书操作，反应时间准确。在测量过程中，请勿碰酶标板，以防酶标板传送时挤伤操作人员的手。请勿将样品或试剂洒到仪器表面或内部，操作完成后请洗手。如果使用的样品或试剂具有污染性、毒性和生物学危害，请严格按照试剂盒的操作说明，以防对操作人员造成损害。如果仪器接触过污染性或传染性物品，请进行清洗和消毒。不要在测量过程中关闭电源。对于因试剂盒问题造成的测量结果的偏差，应根据实际情况及时修改参数，以达到最佳效果。使用后盖好防尘罩。出现技术故障时应及时与厂家联系，切勿擅自拆卸酶标仪。仪器名称：洗板机工作原理：一般洗涤微滴板的步骤依次为吸于反应液、将洗涤液注满微滴孔、浸泡一定时间、吸走孔内液，上述步骤重复几次。如果有未结合物和干扰物未被冲洗干净，或者冲洗不均匀，就会直接影响检测结果的准确性和重复性。自动洗板机一般用双头真空压力泵作真空压力源，在管路上还设置一电磁阀，以实现自动吸液、注液功能。微滴板驱动单三完成走板功能，以实现微滴板的逐排冲洗。清洗头升降单元则在吸液过程中，将清洗头可靠地降入到微滴孔的适当位置，吸干液体，然后升高。所有这些操作都通过微电脑控制，键盘和显示屏完成洗板参数的选择和输入。注意事项：程序卡的两面分别代表不同的清洗程序：一个是“5 WASH,8 HEAD”,另一个也是清洗5次，但头数不同，用哪个程序那面就朝上插入槽中。不锈钢台面要保证干燥、清洁后方可使用。使用前要检查硫酸是否充足。要及时倒掉废液防止废液回流造成机器故障。操作界面有一列1-12的数字按钮，对应地顶板的各行，若全部清洗课直接按Start开始清洗，若要清洗指定的某几行，则可按下相应数字按钮。ELISA原理：ELISA，酶联免疫吸附法。又分为“双抗体夹心法”和“间接免疫吸附测定法”。双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法，操作步骤如下： 1.将特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体：洗涤除去未结合的抗体及杂质。2.加受检标本：使之与固相抗体接触反应一段时间，让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合，形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。3.加酶标抗体：使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量正相关。 4.加底物：夹心式复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量。根据同样原理，将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结合物，即可用双抗原夹心法测定标本中的抗体。实验九：在线发酵罐、氮吹仪仪器名称：在线发酵罐(生物反应罐)规格：5L、2L构成：控温部分、搅拌部分、通气部分、进出料口、测量系统、控制系统及数据处理系统。控温部分：外夹套作为传热装置，通冷水课冷却灭菌后的发酵罐，启动电热丝课使水升温。外夹套的进出水管皆为硅胶管，区别于橡胶管的是硅胶管可高温灭菌。长管为进水管，短管为出水管，这样可以保证内部空气的排出。搅拌部分：安装在一根轴上的多个涡轮式搅拌桨。通气部分：无菌空气或氧气从发酵罐的底部通入，从顶部排出。通入之前空气要除油、除水，由篮管子进入气体流量计，再连接滤膜过滤掉细菌。进出料、补料装置：进出料口都在罐的顶部，测量系统：pH电极：装有棕黄色溶液的透明管子，用于测量发酵液的pH。溶解氧电极：银色金属棒，下方浸泡在电解液中。下部旋开后课看到有iceng膜，可与氧气反应。上部是银针。注意：勿用手触碰膜，若银针因时间长变黑，课用滤纸稍微打磨一下，在发酵一到两批后要补加1-2滴电解液。温度电极：连在白线上，之前要先滴几滴甘油于进口处作为导热介质，再把电极插入罐内。液位电极：由FROM的一根灰白色电线引出红黑两个电极。操作步骤：清洗发酵罐倒入培养基灭菌设置发酵参数接种通无菌空气发酵仪器名称：氮吹仪工作原理：氮吹仪是采用惰性气体对加热样液进行吹扫，使待处理样品迅速浓缩，达到快速分离纯化的效果的一种常用实验仪器。在挥发有机溶剂的同时可防止样品与氧气接触。构成：底盘、中心杆、样品定位架、配气系统等。试管由定位架弹簧和托盘固定，样品位有数字标识。气体通过可调流量计到达配气系统，再经弹性软管到各样品位针阀管，针阀管可根据试管尺寸和溶剂量分别上下调整，最后气体由针头吹向溶液表面，致使溶剂快速蒸发。性能特点：采用无色无味透明硅胶管、不锈钢、镀铬铜、硬铝材料最大样品位数：12，可控范围：112试管尺寸1029，样品容量150ml圆形结构，转动自如，操作方便针阀管上下调节自如，锁紧方便适用于试管、锥形瓶、离心管温度在室温-99数显，可配温度计监测针阀控制各样品位氮气流速及开关氮气流量针阀控制，轻松自如，010L/min，压力小于200kPa圆形水浴，数控，加热平缓标配9#80针头实验十：摇床、干燥箱、振荡水槽、生物安全柜仪器名称：摇床工作原理：在实验室内通过摇动来培养微生物或细胞，培养细胞时需要同时进行二氧化碳控制。一般多为悬浮细胞可以用摇床培养。比起传统的培养方法，摇床培养出来的细胞活性更高，密度/量更大。细胞培养摇床一台功能完善的细胞培养摇床需要具备温度控制、湿度控制、二氧化碳控制、光照控制以及高性能的保温密封功能及可消毒灭菌的功能。仪器名称：干燥箱注意事项：实验室干燥箱有两种用途。其中温度设定为80的干燥箱主要用于清洗过的器皿的干燥，注意塑料制品和橡胶制品不得放入。另外一种用于灭菌后的培养皿板及试管。仪器名称：振荡水槽注意事项：实验室水浴恒温振荡器，又称水浴恒温摇床，温度控制采用提前系统，LED显示。控温精度高，温度调节方便、示值准确直观，性能优越可靠。水浴恒温振荡器的工作平面不能过度平滑（例如瓷砖等）；调速应从低速向高速慢慢起动；装入试验瓶，并保持平衡；水浴恒温振荡器在高速振荡时可能会有一定的移位，因此在使用时应有人看管。生物安全柜是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时，用来保护操作者本人、实验室环境以及实验材料，使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的。仪器名称：生物安全柜注意事项：实验室生物安全柜是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时，用来保护操作者本人、实验室环境以及实验材料，使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的。使用时先开启紫外灭菌5min，再开风吹风15min，之后再开照明灯。生物安全柜如果使用不当，其防护作用就可能大大受到影响。 生物安全柜中不需要紫外灯。如果使用紫外灯的话，应该每周进行清洁，以除去可能影响其杀菌效果的灰尘和污垢。 在生物安全柜内所形成的几乎没有微生物的环境中，应避免使用明火。 实验室中要张贴如何处理溢出物的实验室操作规则，每一位使用实验室的成员都要阅读并理解这些规程。 在安装时以及每隔一定时间以后，应由有资质的专业人员按照生产商的说明对每一台生物安全柜的运行性能以及完整性进行认证，以检查其是否符合国家及国际的性能标准。由于剩余的培养基可能会使微生物生长繁殖，因此在实验结束时，包括仪器设备在内的生物安全柜里的所有物品都应清除表面污染，并移出安全柜。 生物安全柜在移动以及更换过滤器之前，必须清除污染。 在使用生物安全柜时应穿着个体防护服。实验十一：离心机、冷冻干燥机仪器名称：离心机工作原理：离心机的工作原理是依靠离心机内部的转子高速运转产生强大的离心力，离心力使得液体物质中的粒子又沉淀在一起变成运转，然后由于液体中粒子颗粒的沉降系数的不同和浮力、密度的不同被分离出来，然后将他们分别收集。操作步骤：接通离心机电源，打开机器开关，等待机器自检完毕。按“open”键，打开机器盖根据使用需要选择合适的转子，将转子轻轻套在旋转轴上，用六角螺丝刀旋转转子上的螺母，将转子固定。根据转子选择适合的离心管，将样品装入一对离心管后，在托盘天平上调节使它们适量相等，然后对称的放入转子中，先将转子的盖子旋紧，然后盖上机器盖根据需要乙烯设置离心所需要的温度、运行程序、转速、离心时间，设置结束后按“开始”运行机器。离心结束后，转子会逐渐地停下来，“open”键指示灯亮起，按此键打开离心室，旋开转子盖，取出样品。将离心管处理干净，倒置在小张滤纸上使其干燥，以便下次使用。注意事项：使用各种离心机时，必须事先在天平上精密地平衡离心管和其内容物，平衡时重量之差不得超过各个离心机说明书上所规定的范围，每个离心机不同的转头有各自的允许差值，转头中绝对不能装载单数的管子，当转头只是部分装载时，管子必须互相对称地放在转头中，以便使负载均匀地分布在转头的周围。装载溶液时，要根据各种离心机的具体操作说明进行，根据待离心液体的性质及体积选用适合的离心管，有的离心管无盖，液体不得装得过多，以防离心时甩出，造成转头不平衡、生锈或被腐蚀，而制备性超速离心机的离心管，则常常要求必须将液体装满，以免离心时塑料离心管的上部凹陷变形。每次使用后，必须仔细检查转头，及时清洗、擦干，转头是离心机中须重点保护的部件，搬动时要小心，不能碰撞，避免造成伤痕，转头长时间不用时，要涂上一层上光腊保护，严禁使用显著变形、损伤或老化的离心管。若要在低于室温的温度下离心时。转头在使用前应放置在冰箱或置于离心机的转头室内预冷。离心过程中不得随意离开，应随时观察离心机上的仪表是否正常工作，如有异常的声音应立即停机检查，及时排除故障。每个转头各有其最高允许转速和使用累积限时，使用转头时要查阅说明书，不得过速使用。每一转头都要有一份使用档案，记录累积的使用时间，若超过了该转头的最高使用限时，则须按规定降速使用。仪器名称：冷冻干燥机工作原理：冷冻干燥是利用升华的原理进行干燥的一种技术，是将被干燥的物质在低温下快速冻结，然后在适当的真空环境下，使冻结的水分子直接升华成为水蒸气逸出的过程。操作步骤：开机 1.打开机箱左侧的总电源开关，气压数显为大气压110kPa。2.按住控制面板上的总开关键三秒钟以上，温度数显为冷阱的实际温度。3.启动制冷机，预冷30分钟以上。4.将