药理学设计性实验.doc

药理学设计性实验实验一、石菖蒲的镇静作用【目的】 1、应用小动物自主活动学习镇静药物的实验方法。2、应用小动物自主活动仪，研究地西泮、石菖蒲对小鼠自发活动的影响。【原理】小动物自主活动仪的原理：在活动箱内，将一束或几束光线照射到对侧光电感应器上，动物在箱内每活动一次，感应电流发生改变，经过放大装置，使电脉冲驱使继电器启动，通过记录器记录动物活动次数。地西泮是镇静催眠的代表药。石菖蒲具有宁心安神作用，其挥发油对中枢有广泛的抑制作用。本实验以小鼠自发活动次数为指标，观察药物的镇静作用。【动物】小鼠6只，实验前禁食12h。【药品】0.05%地西泮溶液，石菖蒲水煎液，生理盐水【主要器材】动物自主活动仪1台，电子称1台，1ml注射器2支，烧杯2杯。【方法】将6只动物随机分为甲乙丙组，甲组灌胃生理盐水，乙组灌胃石菖蒲水煎液（连续两天），丙组灌胃地西泮1次，0.2ml/10。给药后1小时各组动物放入小动物自主仪，先适应2分钟，再记录5分钟内小鼠自主活动次数。【结果】地西泮、石菖蒲对小鼠自主活动的影响。（结果见表1）表1 地西泮、石菖蒲对小鼠自主活动的影响组别动物数自主活动次数生理盐水组地西泮组石菖蒲组【注意事项】1、实验室要尽量保持安静，以免惊动动物使自主活动次数增多。 2、实验室温度应在20-25之间。参考文献：1 胡锦官，顾健，王志旺.石菖蒲及其有效成分对神经系统作用的药理研究J.中药药药理与临床.1999.15（30：192 刘新民.石菖蒲的研究现状J.中医药研究.1992.（4）：573 吴启端，吴清和，石菖蒲的药理学研究进展J.2006,17（6）:477-480实验二、石菖蒲对记忆障碍小鼠模型的改善作用【目的】1、学习小鼠跳台原理和操作，正确运用跳台实验仪器对小鼠进行学习记忆能力行为学测试。2、观察石菖蒲对小鼠记忆获得障碍的疗效作用。【原理】鼠跳台实验装置由DT-200小鼠跳台测试箱和DT-200小鼠跳台测试仪组成。测试箱由6个小房间构成，一次可同时试验6只动物，每个小房间有一橡皮台，箱底是可通电的铜栅，在训练期通电小鼠跳下平台在箱底不断被电击，这个过程中小鼠获得记忆，24 h后测试时观察小鼠第一次跳下平台的时间和5 min内跳下平台的次数，比较各组老鼠记忆保持的能力。 戊巴比妥钠能造成小鼠学习记忆障碍。石菖蒲具有开窍醒神，宁心安神的作用，能够促进学习记忆。本实验以小鼠跳下潜伏期及5min内错误次数作为指标，观察药物对小鼠学习记忆能力影响作用。【动物】小鼠6只【药品】生理盐水、0.08g/ml盐酸多奈齐、石菖蒲挥发油乳浊液、0.5%戊巴比妥钠溶液【主要器材】小鼠跳台仪1台，电子称1台，1ml注射器2支。烧杯2只。【方法】按小鼠跳台法筛选6只合格小鼠（260s）。将6只小鼠随机分为甲乙丙组，分别灌胃生理盐水、盐酸多奈齐、石菖蒲挥发油乳浊液，每天一次，0.1mg/ml，连续14天。第15天给药1h后，分别腹腔注射0.1mg/g，15min后将6只小鼠分别放入反射箱内，先适应3min，然后通电。训练5min并记录5min内跳下的错误次数。24h后重新测试，重测时把小鼠放到跳台上，记录小鼠第1次跳下时在跳台上的停留时间，即为潜伏期，并记录5min内的出错次数。测试时若小鼠停留在平台上超过3min，其潜伏期按180s计。【结果】盐酸多奈齐、石菖蒲对记忆障碍小鼠模型的改善作用。（结果见表2）表2 盐酸多奈齐、石菖蒲对记忆障碍小鼠模型的改善作用组别动物数潜伏期训练时5min内出错次数测试时5min内出错次数生理盐水组盐酸多奈齐石菖蒲挥发油乳浊液参考文献：1 徐叔云,卡如濂,陈修.药理实验方法学(第三版).北京:人民卫生出版社,2002,413-550.2 胡锦官，顾健，王志旺.石菖蒲及其有效成分对学习记忆的实验研究.中药材J，1999,22（11）：584-5853 程秀娟，等.脑血管扩张剂-尼莫地平、硝苯吡啶和长春胺对大鼠和小鼠记忆障碍的改善作用J.药学学报，1986,21（10）：731 实验三、石菖蒲的抗癫痫作用【目的】1.学习癫痫药物的实验方法2.研究石菖蒲水煎液对戊四唑（PTZ）所致癫痫小鼠的作用【原理】一般认为 石菖蒲的挥发油抗癫痫的作用最强，其中化学成分较多-细辛醚是其主要有效成分之一，用于急性传染病、麻醉药及巴比妥类药物中毒时引起的呼吸抑制、急性循环衰竭。大量可致惊厥。【动物】小鼠, 18 20g, 雄性实验前禁食12h【药品】0.07%戊四唑,石菖蒲醇溶液，生理盐水【主要器材】注射器，灌胃针头，烧杯，天平。【方法】用PTZ腹腔注射小鼠，连续5天，建立癫痫小鼠模型。将小鼠随机分成2组, 每组2 只。受试药物组以石菖蒲醇溶液（10g/kg）灌胃3d, 每天2 次(上、下午各一次) , 对照组给予生理盐水（10g/kg）, 第4d 上午给药一次( 给药前精确称重) , 末次给药30min 后开始实验, 腹腔戊四唑（PTZ）（40mg/kg），记录小鼠癫痫潜伏期、癫痫持续时间、死亡率和死亡时间等指标。【结果】石菖蒲对戊四唑所致惊厥小鼠的影响。（结果见表3）表3石菖蒲对戊四唑所致惊厥小鼠的影响药物动物数（n）剂量（g/kg）癫痫潜伏期死亡时间石菖蒲醇溶液生理盐水参考文献：1 吴启端, 吴清和, 石菖蒲的药理研究进展 J. 中药新药与临床药理2006.17(6)：477-4802 陈莉，廖卫平，等，石菖蒲水煎液抗癫痫动物模型的药效学J.广州医学院学报.2002,30（3）：133 周大兴，包祖晓，吴雄生，等.石菖蒲醇提取物的抗癫痫作用J.中国现代应用药学杂志，1999,16（2）：19