C-反应蛋白及临床应用.ppt

c 反应蛋白及临床应用 proteinstructurecrp结构 c反应蛋白的生理和生化 在细胞因子il 6家族诱导下 crp在肝中合成迅速 正常合成率为l 10mg d 急性炎症时每天合成超过lg d 在急性相反应高峰时肝大量合成蛋白 其中20 是合成crp 当il 6刺激物缺乏时 在2 4h内合成率降至正常 循环中crp半衰期约19h 但一旦它与配体结合 可快速的被清除 肝外合成对血清水平影响作用很小 crp的生物学功能 crp的生物学功能 机理 结合坏死的内源性物质在钙离子存在的情况下 crp能结合坏死的内源性物质和效应细胞 当正常的脂质双层结构被破坏致使内部磷脂暴露时 crp可发生与宿主细胞的结合 在系统性红斑狼疮的鼠模型中 注射crp可改善sle的状况 人crp基因的多态性导致的低基础水平表达增加了发生系统性狼疮的风险 crp量的减少可能与sle发病机理有关 crp量的减少使结合的细胞碎片减少 crp的生物学功能 机理 结合外源性物质细菌 真菌 寄生虫中的细胞壁磷酸胆碱 crp具有保护机体抗细菌感染的能力 crp保护机体抵抗致命性的细菌脂多糖和各种炎症介子的能力 crp的生物学功能 机理 结合配体的crp激活下列生物系统 导致配体的消除 crp对补体系统的激活 crp结合iggfcr 增强自然杀伤细胞的活性 crp的调理性质 调理即刺激细胞吞噬作用 crp和血小板激活因子 paf 结合抑制paf刺激的血小板聚集 crp的生物学功能 机理 crp具有多效性的作用 当抑制干扰素的合成时 crp可诱导il 1受体拮抗剂而增加抗炎细胞因子il 10的释放 crp也可诱导炎症反应 crp向上 调节内皮细胞粘附分子的表达 刺激许多细胞释放il 8 增加血浆纤维蛋白酶原催化剂抑制剂 1的表达和活性 增加il 1 il 6 il 18 和肿瘤坏死因子的释放 crp诱导或抑制炎症反应依赖于环境 crp功能 识别和启动靶效应细胞及其产物并将其从组织中清除 吞噬溶解入侵微生物 急性相蛋白crp合成的生物调控 crp基因位于1号染色体短臂 只有一个内含子 其分离编码信号肽的区域 肝脏crp合成的调节主要发生在转录阶段 由il 6诱导 il 1可增加此作用 crp启动子最近区为stat3和rel蛋白的结合部位 这些因子的相互作用增加dna结合c ebp家属成员的稳定性 从而有效地诱导了crp基因的表达 神经元细胞 动脉硬化斑块 单核细胞和淋巴细胞也可以合成crp 在这些部位的调节机制还不清楚 修饰的crp m crp modified crp 目前认为m crp是原crp的单体 与天然crp不同 表现在分子大小 溶解度 抗原性 带电荷数等方面的差别 m crp具抗菌作用 m crp具有强大地诱发炎症的作用 方法灵敏度参考献试管内沉淀试验 jexpmed1930 52 561毛细管内沉淀试验10 20mg lamjmed1950 8 445改良平板双扩散法10 20mg lintarchallergy1962改良琼脂柱扩散法3 0mg lprocsocexpbiol1955改良单扩散法1 0mg lactapatholmicrobiolscand琼脂糖凝胶电泳法1 0mg lclinchimacta1969放射电免疫扩散法10 g ljclinlabinvest1973补体结合试验0 6mg lprocsocexpbiol1954胶乳凝集试验1 0mg lnature london 1961高敏乳胶增强浊度0 35mg mldadegermany2000荧光抗体法 nature london 1961放射免疫测定法3 g ljlabclinmed1976 检测方法 crp检测方法 免疫沉淀试验 检测crp原始方法 将兔抗crp血清吸入毛细管内 把它浸入被测血浆或血清内 因毛细管虹吸作用被吸入 与抗crp血清形成接触界面 这种方法较粗糙 取得结果时间较长 也不太正确可靠 crp检测方法 免疫浊度法 可溶性crp ag与可溶性抗crp ab反应 形成可见的网络状沉淀性ic复合物点 ic复合物对光具有散射作用 使溶液具有肉眼尚不可见的浊度 在被测样品中加抗血清后一定时间 测定反应系统散射光强度或浊度变化 可对被检物及其浊度加以检测 根据仪器的光学系统 浊度法分为散射浊度法和透射浊度法两类 许多自动化生化分析仪和自动化免疫测定仪都可crp测定项目 crp检测方法 胶乳凝集试验 lat 将强化的兔抗crp抗体固定于胶乳微粒上 加入被测样品后与crp在3分钟内形成肉眼可见的凝集物 胶乳强化浊度法的灵敏度优于传统浊度法 试剂稳定性佳 检测方法 标记免疫测定 elisa和免疫发光法和化学发光法等都可用于crp的测定 化学发光法的灵敏度和定量精确度可与ria媲美 而无同位素污染 试剂稳定 分析速度快 crp poct 床边试验 法 elisa干片法 把磷脂酰胆碱 pc 化学交联固定于载体 被测crp与载体的pc结合 被酶标记的抗crp单抗结合 可灵敏 特异性检测crp 约5分钟可得结果 检测方法 胶乳增强试验 shcrp 常规crp检验方法可在感染或组织损伤时检测出crp 10mg l 该检测方法具有较高的灵敏度 这个水平 0 1 10mg l 的c反应蛋白又被称为超敏c反应蛋白 hscrp crp检测的评估 1 半定量 胶乳凝集试验等已弃用 2 定量 散射免疫比浊法 透射免疫比浊法 是目前常用方法 检测限度为5 150mg l cv 5 胶乳增强试验 shcrp检测 很大程度提高了敏感度 酶免疫分析和荧光免疫分析 有潜在的灵敏度优势 胶乳增强试验 shcrp检测方法很大程度提高了敏感度 crp检测对标本的采集也无特殊要求 高浓度的类风湿因子可产生crp假性升高 crp筛查的费用远小于其他心血管检查的费用 临床应用 参考范围 临床意义 器质性疾病的筛选急性或慢性炎症如伴有细菌感染 自身免疫或免疫复合物病 组织坏死和恶性肿瘤 临床意义 感染的诊断与鉴别 crp在细菌感染发生后6 8h即开始升高 24 48h达到高峰 在感染消除后其含量急骤下降 一周内可恢复正常 crp在病毒感染时无显著升高 革兰阴性感染 可发生最高水平的crp 有时高达500mg l 革兰阳性菌感染和寄生虫感染 通常引起中等程度的反应 典型的是在100mg l左右 病毒感染 引起的反应最轻 通常不超过50mg l 极少超过100mg l 在细菌感染的急性期 crp显著升高 寡聚腺苷合成酶正常 在病毒感染时crp水平正常或轻微升高 寡聚腺苷合酶水平升高 临床意义 c反应蛋白是心血管疾病最强的危险指标 c反应蛋白水平可预测将来心肌梗塞及中风的危险性 c反应蛋白含量 2 1mg l的人与 1mg l者比较 将来发生心肌梗塞的危险性为后者的2 9倍 发生缺血性中风的危险性为后者的1 9倍 发生外周动脉血管性疾病的危险性为后者的4 1倍 在痛疼开始后数小时内 crp升高 3 4d达高峰 在ck mb回到正常后7 10d也降至正常 临床意义 自身免疫或免疫复合物病 系统性红斑狼疮 多肌炎 系统性硬化症crp无明显改变 所以可用于与风湿性疾病鉴别 若存在发热为并发感染而非疾病的恶化 临床意义 癌症 已升高或正在升高的crp预示着不良的预后及常提示转移 结肠癌是导致死亡人数第二多的癌症 研究显示 血液c 反应蛋白含量最高的那些人患结直肠癌的危险 是c 反应蛋白含量最低者的两倍 临床意义 评估疾病活动性和疗效监控crp为10 50mg l表示轻度炎症 crp升至100mg l表示较严重的疾病 它的严重程度在必要时需静脉注射 crp 100mg l表示严重的疾病过程并常表示细菌感染的存在 临床意义 抗生素的治疗监测 系列血浆crp的测定 可用来作为下列情况的治疗监测 在许多感染时最有效使用抗生素治疗 根据crp水平的变化来决定抗炎药物的剂量 在crp下降至正常时 中断抗菌素治疗 在高危人群缺少微生物学诊断时 为抗生素治疗的指引 临床意义 抗生素的治疗监测 临床意义 外科 患者施行手术后24 72h 血中crp水平明显升高 约在第5 7天恢复正常 凡骤升后持续高水平多预示合并感染 对中 大手术患者 在术前和术后3 7天各作常规检测一次 凡术后5 7天crp仍持续高水平者 理应怀疑合并感染 并配合治疗作随访监测 临床意义 内科 肺炎 crp 100mg l 强烈提示细菌感染 如化脓性支气管炎或肺炎 典型的病毒性肺炎不会超过50mg l 心血管病 在痛疼开始后数小时内 crp升高 3 4d达高峰 在ck mb回到正常后7 10d也降至正常 代谢综合征代谢综合征分组 根据crp水平可将为低危险组 3mg 临床意义 妇产科 盆腔炎和子宫附件炎 crp值升高盆腔肿块和子宫肌瘤通常多为阴性 诊断胎膜早破宫内感染 胎膜早破时 如母亲crp在产前6 19h超过50mg l可作为出现ais的标准 产后第一天出现的ais的crp将比正常分娩时高出2 3倍 无并发症的ct和ng感染不会引起crp升高 但扩散到盆腔可引起急时相反应 临床意义 儿科 新生儿浓毒血症 出生3天前crp 10mg l表示感染 如果crp在24h内没有超过10mg l 多无新生儿感染 小儿发热 患病超过12h crp显著 40mg l esr显著 30mm h应关注为细菌性感染 脑膜炎 crp 20mg l提示为细菌感染的可能 100mg l时具有细菌感染诊断价值 结脑crp在20 60mg l 成功的治疗可使crp在一周内降至正常 小结 crp是一五球体结构的高度保守的急时相蛋白 crp为一模式识别分子 与特殊的分子结构结合而发挥作用 为宿主先天性免