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文档简介

医学免疫学实验 实验二小鼠脾细胞的分离制备及其活力检测 材料器材 离心机 手术剪 镊子 平皿 10ml离心管 5ml注射器等动物 昆明小鼠 25g左右 雄性 试剂 碘伏 红细胞裂解液 Hank s液 0 4 台盼兰染液 方法取小鼠一只 置于蜡盘上 颈椎脱臼处死 用碘伏消毒小鼠腹部后 打开腹腔 取出脾 去除周围的结缔组织 放入含有5mlHank s的平皿中用眼科剪将脾一端剪一小口后 将含有5mlHank s液的注射器从脾的另一端刺入脾 缓缓注入Hank s液 即可见脾细胞悬液流入平皿 注意在注射Hank s液同时不断转动针头方向 直至脾变苍白为止 用干净吸管吸取细胞液到10ml离心管中 平衡后 离心 1500rpm10min 将离心管盖子打开 快速弃上清液 往管底的细胞中加入1ml的红细胞裂解液 充分混匀20秒 立即加入9ml的Hank s液 混匀 离心 1500rpm10min 弃上清 将细胞定容到1ml 吸取0 1ml的细胞悬液到干净的试管中 加入等量的0 4 台盼兰染液 混匀 吸取1滴的细胞液到玻片上 加上盖片 显微镜观察 死亡细胞染成蓝色
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