自身免疫性疾病相关检测PPT课件

自身免疫性疾病相关检测 自身免疫性疾病相关检测 QingmaoGeng 自体免疫性疾病 Autoimmunedisease 亦作自体免疫问题 是一种人体内自己的免疫系统攻击自己身体正常细胞 组织 器官的疾病 就是正常的免疫能力下降 而异常的免疫能力却突显的一种问题 自身免疫病的特点 多数病因不明 常呈自发性或特发性 多数病程较长 多呈反复发作和慢性迁延过程 某些具有遗传倾向 多数疾病女性多于男性 多数患者血清中可以检测到抗核抗体或其它自身抗体 自身免疫性疾病 分类 系统性 组织器官特异性 目前主要的疾病包括 主要疾病 涉及的科室 风湿免疫科 皮肤科 呼吸内科 血液科 肾内科 消化科 骨科 保健科 神经内科等 自身免疫性疾病相关检测 传统定义 针对细胞核成分的自身抗体的总称 广义定义 针对细胞内所有抗原成分的自身抗体的总称 对ANA的理解不再局限于核成分 而是指核酸和核蛋白抗体的总称ANA的靶抗原分布 细胞核整个细胞 包括细胞核 细胞浆 细胞骨架 细胞分裂周期蛋白等 ENA 抗可提取核抗原 包括RNP Sm Sm SSA SSB Scl 70和Jo 1等六种靶抗原 抗核抗体的定义 自身免疫性疾病相关检测 抗核抗体主要检测方法 间接免疫荧光法 最经典 金标准 酶联免疫吸附试验 ELISA 可定量免疫印迹法 WB 特异性非常好线性酶免 兼顾特异性 敏感度放射免疫法 灵敏度好 抗核抗体的主要检测方法 自身免疫性疾病相关检测 美国风湿学会 ACR 立场声明 HEp 2细胞包含大约100至150种自身抗原其它初筛方法仅具有少量自身抗原 8 10 大约35 SLE患者和IFT ANA阳性患者在其它初筛实验中为阴性结果 建议 IFT ANA仍然为ANA检测的金标准 自身免疫性疾病相关检测 ANA检测间接免疫荧光法 IFT 抗原谱完整 细胞核 细胞浆 检测ANA的金标准 具有很高的敏感性和特异性 基质组合 HEp 2细胞 灵长类肝 自身免疫性疾病相关检测 根据产生的荧光模型 靶抗原的分布分类如下 ANA 核均质型 DNA 组蛋白和核小体等 核膜型 板层素 gp210等 核颗粒型 核仁型 Scl 70 RNA多聚酶 PM Scl和原纤维蛋白等 核浆点型 着丝点 核点等 胞浆颗粒型 线粒体 Jo 1 核糖体等 胞浆纤维型 波形蛋白 原肌球蛋白和肌动蛋白等 分裂期细胞阳性 纺垂体 中间体 中心粒等 核糖核蛋白 Sm nRNP SS A SS B 细胞核 细胞浆 Ku 细胞周期蛋白 I型 PCNA 和II型 抗核抗体荧光结果 自身免疫性疾病相关检测 自身免疫性疾病相关检测 荧光结果滴度的解读 自身免疫性疾病相关检测 SLE诊断标准 ACR2009年修订 自身免疫性疾病相关检测 ANA检测的临床意义 系统性红斑狼疮活动期非活动期药物诱导的红斑狼疮混合性结缔组织病 MCTD Sharp综合征 类风湿性关节炎进行性系统性硬化症多发性肌炎及皮肌炎干燥综合征慢性活动性肝炎溃疡性结肠炎其它风湿病正常人 95 10080 10010010020 4020 5085 9530 5070 8030 40265 10 自身免疫性疾病相关检测 抗核抗体谱项目介绍 自身免疫性疾病相关检测 欧蒙印迹法 实验原理 实验原理将抗原包被在固相膜片上 然后将膜片固定在合成膜条上 若样本阳性 血清 浆中的特异性抗体与固相上的抗原结合 结合的抗体与碱性磷酸酶标记的抗人抗体结果 加入色原 底物液产生颜色反应 依据所包被的抗原 可在相同条件下同时检测多种抗体 自身免疫性疾病相关检测 ANA 3G检测项目 自身免疫性疾病相关检测 ANA 3G各项自身抗体的临床意义 自身免疫性疾病相关检测 SLE SjS Scl MCTD PBC PM DM 自身免疫性疾病相关检测 自身免疫性疾病相关检测 话题 ANA全抗原检测与特异性检测 自身免疫性疾病相关检测 全抗原检测与特异性检测 HEp 2cells primateliver ANApro 自身免疫性疾病相关检测 协和医院的临床研究 自身免疫性疾病相关检测 协和医院的临床研究 SSAand orRo52 n 11 Histone n 1 Scl 70 n 1 Jo 1 n 1 M2 n 1 自身免疫性疾病相关检测 协和医院的临床研究 自身免疫性疾病相关检测 最新研究 IFT为阴性时 LIA的符合率为74 8 LIA为阳性时 IFT的符合率为81 1 自身免疫性疾病相关检测 最新研究 IFT为阴性 而LIA为阳性的206例患者中 自身免疫性疾病相关检测 最新研究 原文中的讨论 自身免疫性疾病相关检测 最新研究 最终的结论 自身免疫性疾病相关检测 ACR的申明 自身免疫性疾病相关检测 荧光阳性而靶抗原阴性 如果所有的已知靶抗原都是阴性 那做荧光检测的意义是什么 自身免疫性疾病相关检测 案例分析 自身免疫性疾病相关检测 47岁的中年妇女 临床症状提示可能SLE 但ANA靶抗原检测全部阴性 由于受到血清学检测结果的干扰 最终得出的诊断为皮肤结节性多动脉炎专家提出质疑 要求用IFT方法重新检测ANA 发现为强阳性 根据ANA IFT的阳性结果 最终修正结果为SLE 由于正确的诊断 患者得到了良好的治疗结论 不明靶抗原的ANA荧光阳性 是具有诊断意义的 案例分析 自身免疫性疾病相关检测 SLE诊断标准 ACR2009年修订 自身免疫性疾病相关检测 慢性炎症性结缔组织病 CICTD 慢性炎症性结缔组织病 CICTD SystemischerLupusErythematodes SLE 干燥综合征 SS 系统性硬化症 SSc RheumatoideArthritis RA 多肌炎 皮肌炎 PM DM 类风湿性关节炎 RA 系统性红斑狼疮 SLE ANCA相关性血管炎 MPOandPR3 自身免疫性疾病相关检测 慢性炎症性结缔组织病 CICTD 慢性炎症性结缔组织病 CICTD SystemischerLupusErythematodes SLE 干燥综合征 SS 系统性硬化症 SSc RheumatoideArthritis RA 多肌炎 皮肌炎 PM DM 类风湿性关节炎 RA 系统性红斑狼疮 SLE ANCA相关性血管炎 MPOandPR3 自身免疫性疾病相关检测 侵犯皮肤和多脏器的一种全身性自身免疫病 某些不明病因诱导机体产生多种自身抗体 如抗核抗体等 导致 自身抗体与相应自身抗原结合为循环免疫复合物 通过III型超敏反应而损伤自身组织和器官 抗血细胞自身抗体与血细胞表面抗原结合 通过II型超敏反应而损伤血细胞 系统性红斑狼疮 SLE 临床发病特点发病率 40 100 000 北欧 200 100 000 非洲 250 000 美国 患者寿命 4年 50 1950 15 80 当前 20岁诊断 35岁死亡几率1 6 自身免疫性疾病相关检测 SLE 各器官的表现 自身免疫性疾病相关检测 关于SLE的诊断经历了很长时间 其标准也不断修正和完善 基本上存在4个标准 SLE标准 自身免疫性疾病相关检测 颊部红斑 固定红斑 扁平或高起 在两颧突出部位 不累及鼻唇沟 盘状红斑 片状高起的红斑 粘附有角质脱屑和毛囊栓 老的病变可发生萎缩性瘢痕 光过敏 对日光有不寻常的反应引起皮疹 从病史得知或医生观察到 口腔溃疡 经医生观察到的口腔或鼻咽部溃疡 一般无痛性 关节炎 非糜烂性关节炎 累及2个或更多的外周关节 特征为压痛 肿胀 积液 浆膜炎 a 胸膜炎 明确的胸膜炎性疼痛史 经医生听到摩擦音或有胸腔积液 b 心包炎 心电图 ECG 记录 或心包摩擦音 或心包积液的证据 1982年标准 自身免疫性疾病相关检测 肾脏病变 a 持续性蛋白尿 尿蛋白的定量每日超过0 5g或定性实验 b 细胞管型 可为红细胞 血红蛋白 颗粒管型等或混合性 神经病变 a 癫痫 没有诱发药物或已知的代谢紊乱 如尿毒症 酮症酸中毒或电解质紊乱 b 精神病 没有药物影响或已知的代谢紊乱 如尿毒症 酮症酸中毒或电解质紊乱 血液学改变 a 溶血性贫血 伴有网织红细胞增多 b 白细胞减少 2次或多次低于4 0 109 L c 淋巴细胞减少 2次或多次低于1 5 109 L d 血小板减少 在没有药物影响下低于100 109 L 1982年标准 自身免疫性疾病相关检测 免疫学异常 a 阳性LE细胞反应 b 抗DNA抗体和抗天然DNA抗体滴度异常 c 抗Sm抗体阳性 存在抗Sm核抗原的抗体 d 假阳性梅毒血清试验 至少持续6个月 并经梅毒螺旋体固定试验或荧光螺旋抗体吸收试验证实 抗核抗体 在任何恰当时间和在没有用药诱发 药物性狼疮 综合征的情况下 免疫荧光或其它相应的试验检测出抗核抗体滴度的改变 用于临床研究鉴别病人 在任何观察期间 如上述11条标准中有4条以上同时出现 可以认为病人有系统性红斑狼疮 1982年标准 自身免疫性疾病相关检测 临床标准急性或亚急性皮肤狼疮表现 慢性皮肤狼疮表现 口腔或鼻咽部溃疡 脱发炎性滑膜炎 有 2个外周关节肿痛或压痛伴晨僵 浆膜炎 肾脏病变 尿蛋白 0 5g 24h 或有RBC管型 神经病变 癫痫发作或精神失常 多发性单神经炎 脊髓炎 外周或颅神经病变 脑炎溶血性贫血WBC 4X109 L至少一次 或淋巴细胞 1X109 L至少一次 血小板 100X109 L至少一次 2009年标准 自身免疫性疾病相关检测 免疫学诊断标准ANA滴度高于正常值 抗dsDNA高于参考值 抗Sm抗体 抗磷脂抗体阳性 即狼疮抗凝物阳性 梅毒血清学试验假阳性 抗心磷脂抗体水平升高 补体降低 包括C3 C4和CH50 直接抗人球蛋白 Comb s 实验阳性 非溶血性贫血状态 2009年标准 自身免疫性疾病相关检测 确诊条件 肾活检证实为LN 免疫荧光技术 肾小球基底膜广泛的Ig C3 C4 C1q沉积 满堂亮 满足以上4条标准 包括至少一条临床标准和至少一条免疫学标准 与以前标准的差别 明确分为两类标准 临床标准和免疫学标准增加了自身抗体的种类和比重 2009年标准 自身免疫性疾病相关检测 SLE相关自身抗体 高特异性抗体 自身免疫性疾病相关检测 核均质型HEp 2 Cells Primateliver EUROIMMUN 自身免疫性疾病相关检测 检测方法 IIFT Farr 法 RIA ELISAorBlot 抗dsDNA自身抗体 自身免疫性疾病相关检测 高度特异性抗体70 患者阳性滴度与疾病活动性相关抗体滴度上升但临床症状不明显的患者 抗体检测后5年内80 患者进入活动期 抗dsDNA抗体与SLE 用两种或两种以上的方法进行检测 靶抗原 dsDNA 组蛋白 复合物的构象决定簇方法 IIFA ELISA Blot临床意义 SLE 阳性率50 95 特异性 接近100 抗核小体抗体与SLE ANuA与疾病的活动性相关性强 SLEDAIscore Suetal ClinImmunol122 115 120 2007 抗核小体抗体与SLE 自身免疫性疾病相关检测 抗核小体抗体与SLE 自身免疫性疾病相关检测 抗核小体抗体与狼疮性肾炎 LNTP lupusnephritisrequiringrenaltransplantationLN biopsyprovenlupusnephritisCON SLEpatientswithoutnephritis 狼疮肾炎是SLE的一种潜在的严重并发症 高达50 1 2 需要进行肾移植的患者有狼疮肾炎 伴有狼疮肾炎的严重SLE的生物标记物 Stintonetal Lupus15 394 400 2007 自身免疫性疾病相关检测 U1 nRNPandSm Anti Sm Anti U1RNP MCTD 95 100 SLE 15 40 SLE 5 30 Anti SmandSLE ElizabethBenito Garciaetal ArthritisCare Research51 6 2004 1030 1044 自身免疫性疾病相关检测 Anti RNPandSLE ElizabethBenito Garciaetal ArthritisCare Research51 6 2004 1030 1044 核糖体60S亚单位的3个蛋白 P0 P1 P2 在羧基末端有相同的免疫反应表位 核糖体P抗原的五聚体复合物 抗核糖体P蛋白抗体 systemicsclerosis Sj gren ssyndrome dermato polymyositis 抗核糖体P蛋白抗体与SLE 对SLE接近100 特异性 9 4 阳性率 自身免疫性疾病相关检测 抗核糖体P蛋白抗体与SLE 对SLE接近100 特异性 5 4 阳性率 自身免疫性疾病相关检测 细胞周期蛋白I型 PCNA 靶抗原 细胞周期依赖性表达 S 期 三聚体 36kDa 是DNA多聚酶的辅因子并参与DNA修复调控检测 IIFT Blot临床意义 SLE高特异性 阳性率3 7 特异性接近100 与肾脏和CNS及血小板减少相关 自身免疫性疾病相关检测 全抗体检测实验 间接免疫荧光法 IIFT 抗核抗体 单抗体检测实验 ELISA或Blot实验 dsDNA Sm U1 RNP 核小体 核糖体P蛋白 PCNA C1q等 SLE相关抗体检测 自身免疫性疾病相关检测 慢性炎症性结缔组织病 CICTD 慢性炎症性结缔组织病 CICTD SystemischerLupusErythematodes SLE 干燥综合征 SS 系统性硬化症 SSc RheumatoideArthritis RA 多肌炎 皮肌炎 PM DM 类风湿性关节炎 RA 系统性红斑狼疮 SLE ANCA相关性血管炎 MPOandPR3 自身免疫性疾病相关检测 干燥综合征 SjS 干燥综合症又名舍格伦综合症 英文名称为Sj gren ssyndrome 国内调查证实 人群中患病为0 29 0 77 西方国家人群中患病率在风湿性疾病中占第二位 女性占90 以上 多在中年以后发病 是自免疫疾病的一种 具体来讲是自身的免疫细胞攻击并破坏自身功能正常的分泌腺 主要以侵犯泪腺 唾液腺等外分泌腺为主 又称为自身免疫性外分泌腺体病 自身免疫性疾病相关检测 干燥综合征 主要表现为干燥性角膜 结膜炎 口腔干燥症或伴发类风湿性关节炎等其它风湿性疾病 它可累及其他系统如呼吸系 消化系 泌尿系 血液系 神经系以及肌肉 关节等造成多系统 多器官受损 本病可以单独存在 亦可出现在其他自身免疫病中 单独存在者为原发性干燥综合征 pSS 而继发于类风湿性关节炎 系统性硬皮病 系统性红斑狼疮等其他自身免疫病者为继发性干燥综合征 sSS 自身免疫性疾病相关检测 SS常见症状 口鼻干 吞咽馒头之类的食物困难 舌面干燥 溃疡或光滑如镜面 眼干泪少 异物感 眼睑反复化脓性感染 甚至视力下降 龋齿 多个不易控制的龋齿 牙齿变黑 小片脱落 腮腺 颌下腺反复肿大 疼痛 全身乏力 低热 肌肉关节痛 肌无力 阴道 皮肤干燥 瘙痒 紫癜样皮疹 结节性红斑 本病是一种预后较好的自身免疫病 仅有少数患者有合并淋巴瘤的危险 有内脏损害者经恰当治疗 大多可缓解 及早发现 正确治疗 可预防因长期干燥造成的口眼干燥及肾 肺 肝脏等脏器的损害 ClassificationcriteriaforSS 眼部症状 组织病理学 唾液腺 口腔症状 自身抗体 眼部指标 自身免疫性疾病相关检测 ClassifationforSS 自身免疫性疾病相关检测 SS诊断 新修订的干燥综合征诊断标准要求同时存在迹象 病征及实验室检验结果才能确诊 病人报告的病征必须同时包括眼部及口腔的病理现象 例如每天眼睛干燥并持续三个月以上 以及需要喝水才能咽下食物等 客观的取证则包括前面提到的泪液分泌试验以及玫瑰色染色法 或类似的其它染色法 同时组织病理学的检查也应该显示出小唾液腺焦点淋巴浸润德情况 实验室血清学诊断 即应该检测出SS A和 或SS B自身抗体 在诊断时 需要排除以下情况 曾对头部及颈部进行过放射疗法 处于淋巴癌早期 患有丙型肝炎 艾滋病 结节病或者移植器官排斥等疾病 使用抗胆碱药物后未超过其四倍代谢时间等 自身免疫性疾病相关检测 SSantibody 自身免疫性疾病相关检测 抗SSA SSB抗体 自身免疫性疾病相关检测 SS A SS BandRo 52 SS AandRo 52 Boireetal 1995 Ro 52抗体不与SS A抗原结合 纯化的SS A抗原不包含Ro 52抗原 Anti Ro52 Ro52在SS中阳性率较高 疾病特异性较差 在很多自免疾病中都出现 指示作用 Meyer Schlumbergeretal 4thAsianCongressonAutoimmunity Singapore Sep 2009 自身免疫性疾病相关检测 Anti Ro52 不同组别中均可出现 具有一定的提示意义 自身免疫性疾病相关检测 全抗体检测实验 间接免疫荧光法 IIFT 抗核抗体 单抗体检测实验 ELISA或Blot实验 SS A和SS B SS实验室诊断 自身免疫性疾病相关检测 慢性炎症性结缔组织病 CICTD 慢性炎症性结缔组织病 CICTD SystemischerLupusErythematodes SLE 干燥综合征 SS 系统性硬化症 SSc RheumatoideArthritis RA 多肌炎 皮肌炎 PM DM 类风湿性关节炎 RA 系统性红斑狼疮 SLE ANCA相关性血管炎 MPOandPR3 自身免疫性疾病相关检测 系统性硬化症 系统性硬化症 硬皮病 是一种以皮肤各系统胶原纤维硬化为特征的结缔组织疾病 本病在结缔组织病中仅次于红斑狼疮而居第二位 患者以女性较多 女性与男性之比约为3 1 发病年龄以20 50岁多见 自身免疫性疾病相关检测 常见症状 表皮硬化 指端硬化 爪型手 面具脸 嘴周边出现皱纹 嘴唇变薄 毛细血管扩张 表面血管永久性扩张 表皮钙质沉着 血管壁与皮肤钙化 自身免疫性疾病相关检测 临床分类 分为两大类 在进行诊断时 应将实验室结果和临床表现结合 自身免疫性疾病相关检测 SSc自身抗体 自身免疫性疾病相关检测 抗着丝点抗体HEp 2 Cells Primateliver 自身免疫性疾病相关检测 抗着丝点抗体 靶抗原 着丝点 DNA联合蛋白 CENP A B C D 检测方法 IIFT ELISA Blot临床意义 局限性PSS CREST Syndrome 经常出现在 硬皮病 PBC 重叠综合症 自身免疫性疾病相关检测 抗Scl70抗体HEp 2 Cells Primateliver 自身免疫性疾病相关检测 抗Scl 70抗体 靶抗原 DNA 拓扑异构酶I 100kDa DNA双螺旋复制和转录检测方法 IIFA ELISA Blot临床意义 弥散性硬皮病的诊断标志 50 75 预后 较着丝点阳性的患者病情更严重 自身免疫性疾病相关检测 anti CenpBandanti Scl 70autobody 只检测Scl 70会导致35 93 漏诊 58 3 的Scl患者分别出现Scl 70或CenpB阳性 同时检测有利于提高阳性率 自身免疫性疾病相关检测 抗RNA聚合酶I抗体HEp 2 Cells Primateliver EUROIMMUN 自身免疫性疾病相关检测 抗原纤维蛋白抗体HEp 2 Cells Primateliver EUROIMMUN 自身免疫性疾病相关检测 抗PM Scl抗体HEp 2 Cells Primateliver 自身免疫性疾病相关检测 Anti PM Scl 靶抗原 PM Scl 11到16个多肽复合物在rRNA和一些U snRNAs剪接中起作用检测方法 IIFT ELISA Blot临床意义 重叠综合症的诊断标志 表现为肌炎和硬皮病症状 阳性率50 70 自身免疫性疾病相关检测 SSc自身抗体研究 患者血清 129份SSc血清和202份对照血清 50PM DM 50SLE 42RA 60HD 所有抗原的血清命中率为85 3 自身免疫性疾病相关检测 SSc自身抗体检测 1 全抗原检测实验 间接免疫荧光法 抗核抗体 2 纯抗原检测实验 ELISA或印迹 抗Scl 70 CENPA CENPB RP11 RP155 Fibrillin NOR 90 Th T1 PM Scl Ku PDGFR抗体 自身免疫性疾病相关检测 慢性炎症性结缔组织病 CICTD 慢性炎症性结缔组织病 CICTD SystemischerLupusErythematodes SLE 干燥综合征 SS 系统性硬化症 SSc RheumatoideArthritis RA 多肌炎 皮肌炎 PM DM 类风湿性关节炎 RA 系统性红斑狼疮 SLE ANCA相关性血管炎 MPOandPR3 自身免疫性疾病相关检测 多肌炎 皮肌炎 PM DM 属自身免疫性肌肉炎症性疾病 机体产生多种抗肌肉组织的自身抗体 为系统性结缔组织疾病 临床表现为肌肉炎症和特征性皮炎 主要有多肌炎和皮肌炎两种 本病并不少见 发病率低于系统性红斑狼疮和进行性系统性硬化症 但比结节性多动脉炎高 男女之比为1 2 任何年龄组的人都可以发病 但发病率最高的是40 60岁者 或为5 15岁的儿童 自身免疫性疾病相关检测 典型症状 症状 肌肉疼痛 肌无力 比如肩膀 骨盆 皮肤症状 红斑 膝盖 手指关节处皮肤异变 皮肤褪色 自身免疫性疾病相关检测 实验室抗核抗体检测 抗核抗体和细胞浆抗体LE细胞约10 阳性 抗核抗体约1 5 1 3病例阳性 核型主要为微小斑点型 抗J0 1抗体 抗原为组胺酰tRNA全成酶 抗胞浆抗体 PM中阳性率为30 40 DM中 5 儿童型DM中罕见 亦可见于重叠综合征尤其伴有干燥综合征患者 其间质性肺部疾患密切关联 抗Mi 2抗体 Mi 2抗原为一核蛋白 约8 病例阳性 儿童型DM及伴恶性肿瘤的DM偶见 抗PM 1 PM Scl抗体 抗原为核仁蛋白 阳性率为8 12 亦可见于与硬皮病重叠的病例 自身免疫性疾病相关检测 实验室抗核抗体检测 抗PL 7抗体 即抗苏氨酰tRNA合成酶抗体 肌炎患者中阳性率为3 4 抗PL 12抗体 即抗丙氨酰tRNA合成酶抗体 阳性率为3 在非肌炎患者中抗PL 7和PL 12抗体均属罕见 两者与J0 1抗体相关的疾患为同一亚类肌炎 肌炎患者中发现的其他细胞浆抗体有 1 Fer抗体 2 Mas抗体 两者均属罕见 3 Ro SS A抗体和La SS B抗体 肌炎患者的阳性率通常为7 8 常见于与其他结缔组织病重叠的病例 4 抗U1SmRNP抗体 在DM PM患者中阳性率为10 15 自身免疫性疾病相关检测 PM DMauto antibody 自身免疫性疾病相关检测 抗Jo 1抗体HEp 2 cells Primateliver 自身免疫性疾病相关检测 AntiJo 1 靶抗原 Jo 1 组胺酰 tRNA合成酶 检测方法 IIFA ELISA Blot临床意义 对多肌炎具有高度特异性 阳性率25 35 Jo 1 病情严重的标志 常与肺纤维化有关 70 自身免疫性疾病相关检测 氨酰基 tRNA 合成酶 自身免疫性疾病相关检测 抗Mi 2抗体HEp 2 Cells Primateliver 自身免疫性疾病相关检测 AntiMi 2 靶抗原 多组分系统 与组蛋白乙酰基转移酶和核小体重塑活性有关的主要抗原 218kDa 临床意义 肌炎5 15 主要是皮肌炎 自身免疫性疾病相关检测 抗Ku抗体HEp 2 Cells Primateliver 自身免疫性疾病相关检测 AntiKu P70 P80 靶抗原 DNA结合的非组蛋白和DNA依赖的蛋白酶异源二聚体分析方法 IIFA Blot临床意义 PM Scl 重叠综合症30 55 SLE5 10 自身免疫性疾病相关检测 其他与肌炎相关的抗体 Anti SRP Anti PL 12 自身免疫性疾病相关检测 肌炎相关抗体 1 R nnelidetal AutoimmunRev 2009 患者血清 153份肌炎患者血清 其中50DM 89PM 4juvenileDM 10IBM 77份对照血清 26SjS 26SLE 25SSc 所有抗原的血清学命中率 26 自身免疫性疾病相关检测 肌炎相关抗体 2 Ghirardelloetal AutoimmunRev 2009 患者血清 208份肌炎患者血清 214份对照血清 50HD 65SLE 34SSc 21SjS 13非自身免疫性肌病 23CTD 相关性肌炎 8关节病 所有抗原的血清学命中率 37 自身免疫性疾病相关检测 全抗体检测实验 IIFT 抗核抗体 单抗体检测实验 ELISA或Blot Jo 1 Mi 2 Ku PL 7 PL 12 SRP等 肌炎相关抗体检测 自身免疫性疾病相关检测 慢性炎症性结缔组织病 CICTD 慢性炎症性结缔组织病 CICTD SystemischerLupusErythematodes SLE 干燥综合征 SS 系统性硬化症 SSc RheumatoideArthritis RA 多肌炎 皮肌炎 PM DM 类风湿性关节炎 RA 系统性红斑狼疮 SLE ANCA相关性血管炎 MPOandPR3 自身免疫性疾病相关检测 ANCA抗中性粒细胞胞浆抗体 ANCA Anti NeutrophilCytoplasmAutoantibodies william2009 Fiftyyearsofantineutrophilcytoplasmicantibodies ANCA 自身免疫性疾病相关检测 AAV 自身免疫性疾病相关检测 相关疾病IIF染色型特异性靶抗原抗体韦格纳氏肉芽肿 WG c p 少见 PR3 85 MPO 10 显微型多动脉炎 MPA c pPR3 30 MPO 70 坏死性新月体肾小球肾炎p c 少见 PR3 25 MPO 65 NCGN 过敏性肉芽肿性血管炎 CSS p c 少见 PR3 10 MPO 60 结节性多动脉炎 PAN 低阳性率PR3 5 MPO 15 抗肾小球基底膜疾病pMPO 30 抗GBM病 ANCA临床意义 1 原发性系统性小血管炎 自身免疫性疾病相关检测 相关疾病IIF染色型特异性靶抗原抗体炎症性肠病溃疡性结肠炎 UC 60 80 p aBPI lamina 其它克罗恩病 Crohn s病 10 20 p aBPI lamina 其它自身免疫性肝病原发性硬化性胆管炎 PSC 70 88 p aactin BPI 其它原发性胆汁性肝硬化 PBC 3 18 p aactin BPI 其它自身免疫性肝炎 AIH p aactin BPI 其它结缔组织病系统性红斑狼疮 SLE p aLF CG MPO 少见 类风湿性关节炎 RA p aLF CG MPO 少见 Felty综合征p aLF CG MPO 少见 ANCA临床意义 2 IBD ALD CTD 自身免疫性疾病相关检测 相关疾病IIF染色型特异性靶抗原抗体药物性ANCA阳性血管炎药物性狼疮 DIL pMPO 常见 LF HEL甲状腺功能亢进 PTU治疗 p aMPO LF HEL BPI 其它呼吸系统炎性疾病囊性纤维化 CF a pBPI 91 原发性支气管扩张症a pBPI 其它原发性支气管扩张a pBPI 其它感染性疾病细菌 心内膜炎 呼吸道感染 a pBPI CG 其它病毒 HIV感染 a p不明真菌 着色真菌病 a p不明原虫 急性疟疾 侵袭性阿米巴感染 a pCG PR3 ANCA临床意义 3 药物性 感染性疾病 自身免疫性疾病相关检测 诊断标准 ChapelHillConsensusConference 1994 韦格纳肉芽肿 WG 鼻或口腔炎症浸润 痛性或无痛性口腔溃疡 胸部影像学异常 发现结节 浸润或空洞 血尿 红细胞 5 HP或见红细胞管型 活组织检查 见动脉 小动脉壁内 血管周 血管外区域肉芽肿浸润 2 Churg Srauss综合征 CSS 哮喘 发作时可闻及哮鸣音或呼气相弥散的高调的啰音 外周血嗜酸性粒细胞增多 0 10 单神经病变 多发性单神经病变或多神经病变 肺部浸润 游走性和一过性肺部浸润 副鼻窦异常 急 慢性副鼻窦炎 副鼻窦压痛 或影像学提示副鼻窦混浊 病理 活组织检查发现动脉 小动脉或静脉周围嗜酸性粒细胞聚集 4 显微镜下多动脉炎 MPA 活检示小血管的坏死性血管炎和 或 没有明显免疫沉积的肾小球肾炎 多个脏器受累 呼吸系统无肉芽肿炎症 临床症状 病理活检敏感性约80 特异性 90 自身免疫性疾病相关检测 临床实际应用中的问题1 以WG为例 1 传统观念 发病率低 无意识 鼻塞 流涕 鼻出血 耳鼻喉科咳嗽 咳痰 咯血 呼吸科血尿 泡沫尿 肾内科甲状腺受累 内分泌科 康春燕 中国人民解放军总医院南楼呼吸科 2010 误诊误治 误诊率44 中国人民解放军总医院 2 症状不典型 涉及科室多 自身免疫性疾病相关检测 鼻损害 拟诊鼻疾病8例 3例做过鼻中隔 鼻甲 鼻窦等切除术 当疗效不佳时 仍未考虑本病 张孔 中山大学附属第一医院内科 2010 自身免疫性疾病相关检测 病历 WG 男 50岁 因发热 咳嗽 右下胸部疼痛3个月 左耳流脓伴同侧头痛6天入我院 3个月前无明显诱因出现发热 右下胸痛 体温38 5 左右 伴咳嗽 咳少量白痰 当地肿瘤医院查血常规正常 多次痰找结核杆菌阴性 行胸部CT检查示右下肺斑片状阴影 行B超引导下经皮穿刺肺活检 病理报告为炎性改变 对症治疗20余天 体温下降 胸痛缓解 复查胸部CT病灶无明显吸收 为明确诊断行右下肺叶切除术 术后病理报告为炎性假瘤 术后无发热 有轻微咳嗽 咳少许脓痰 出院 北京大学深圳医院 临床误诊误治 2007 自身免疫性疾病相关检测 出院第3天出现发热 左耳疼痛 流脓 左侧头痛 咳嗽加重 再次入我院 查体 体温37 7 脉搏88 min 呼吸20 min 血压120 80mmHg 意识清 左耳道内红肿 流脓 浅表淋巴结不大 胸部切口红肿 无流脓 两肺呼吸音弱 左下肺有湿啰音 心率88 min 律齐 查血白细胞12 109 L 中性粒细胞0 95 血红蛋白114g L 红细胞沉降率140mm h 尿蛋白 隐血 2 肝肾功能正常 抗链球菌溶血素O正常 类风湿因子127Ku L 正常参考值0 21Ku L C反应蛋白16 9mg L 正常参考值0 8mg L 复查胸部CT示右上 左下肺部出现阴影 诊断 1 化脓性中耳炎 2 右下肺切除术后切口感染 3 肺部感染 病历 WG 自身免疫性疾病相关检测 病历 WG 予左氧氟沙星抗感染治疗 并于入院第3天行左乳突根治术 术中见乳突气房充满肉芽肿及脓液 听骨被肉芽肿包围 术后病理报告 慢性中耳炎 脓液 血液培养均阴性 术后仍发热 咳嗽 咳痰症状加重 痰中带血丝 胸部切口化脓渗脓液 复查胸部CT示两肺有多个大的团块状病灶 考虑金黄色葡萄球菌感染 予万古霉素抗感染及支持 对症处理 自身免疫性疾病相关检测 查c ANCA PR3 MPO 结合病人胸部阴影特点 中耳化脓及ANCA阳性 尿隐血 2 考虑WG 予泼尼松30mg 每日1次口服 环磷酰胺1g 每日1次静脉滴注 后改用环磷酰胺50mg 每日1次口服 治疗第3天体温下降 咳嗽 咳痰症状缓解 切口流脓减少 行支气管镜检查示左肺上下叶 右肺上叶及左侧支气管黏膜苍白 左肺下叶背段C亚段有脓性分泌物 右侧支气管中间支气管开口处黏膜隆起 凹凸不平 见一鱼泡样新生物 其上血管丰富 管腔高度狭窄 气管镜不能进入 有中量脓性分泌物 取活检 报告为WG 继续上述治疗 病人精神 症状逐渐好转 切口逐渐愈合 复查血象 尿常规正常 但仍有咳嗽 痰中带血 带泼尼松出院 病历 WG 自身免疫性疾病相关检测 组织活检属有创检查术式 得到患者同意首先应有较充分的理由 活检阳性率 鼻腔活检阳性率不足50 活检部位的局限 取材组织小 人为致组织变态 多次 多部位活检 组织活检并不能进行病程跟踪 临床实际应用中的问题2 自身免疫性疾病相关检测 更大样本量的验证 JohnH 2001 TestCharacteristicsofImmunofluorescenceandELISATestsin856ConsecutivePatientswithPossibleANCA AssociatedConditions 自身免疫性疾病相关检测 ANCA在非AAV中的比例 2001 自身免疫性疾病相关检测 ANCA在非AAV中的比例 2003 DIMITRIOSVASSILOPOULOS PrevalenceofAntineutrophilCytoplasmicAntibodiesinPatientsWithVariousPulmonaryDiseasesorMultiorganDysfunction 2003 自身免疫性疾病相关检测 ANCA与IBD 炎症性肠病 单位 10万 亚太地区炎症性肠病处理共识意见 胃肠病学 2006 慢性炎症性肠病 CIBD 相关自身抗体 靶抗原阳性率 溃疡性结肠炎克隆恩病小肠杯状细胞280pANCA767胰外分泌腺和排出道239酿酒酵母470 自身免疫性疾病相关检测 各项指标联合检测增加CIBD血清学诊断的命中率 80 胰腺抗体 酿酒酵母抗体 39 胰腺抗体 70 酿酒酵母抗体 溃疡性结肠炎 83 小肠杯状细胞抗体 pANCA 28 小肠杯状细胞抗体 76 pANCA 克罗恩病 自身免疫性疾病相关检测 抗胰外分泌腺抗体 猴胰腺 靶抗原 胰腺外分泌腺细胞及排除道基质 猴胰腺相关疾病 克隆恩病39 自身免疫性疾病相关检测 抗酿酒酵母抗体 酿酒酵母涂片 靶抗原 酿酒酵母细胞壁成分基质 酿酒酵母相关疾病 克隆恩病70 自身免疫性疾病相关检测 抗小肠杯状细胞抗体 猴小肠 靶抗原 小肠杯状细胞基质 猴小肠相关疾病 溃疡性结肠炎28 萎缩性胃炎及恶性贫血相关自身抗体 靶抗原阳性率 萎缩性胃炎恶性贫血抗胃壁细胞抗体 PCA 6090抗内因子抗体 IF 50 自身免疫性疾病相关检测 抗胃壁细胞抗体 猴胃 靶抗原 胃壁细胞膜上H KATP酶基质 猴胃相关疾病 萎缩性胃炎60 恶性贫血90 乳糜泻 麸质过敏性肠病 麸质敏感性肠病相关自身抗体 靶抗原阳性率 肌内膜90 100麦胶蛋白80 100组织谷氨酰胺转移酶91 100 ESPGHAN 诊断标准 EuropeanSocietyofPediatricGastroenterology HepatologyandNutrition 麸质过敏性肠病 自身免疫性疾病相关检测 ANCA结果综合判读 JudySavige2003 自身免疫性疾病相关检测 2000 2003 2009 2008 ProfessorJudySavige 自身免疫性疾病相关检测 IF与ELISA结果综合判断 1 自身免疫性疾病相关检测 IF与ELISA结果综合判断 2 自身免疫性疾病相关检测 慢性炎症性结缔组织病 CICTD 慢性炎症性结缔组织病 CICTD SystemischerLupusErythematodes SLE 干燥综合征 SS 系统性硬化症 SSc RheumatoideArthritis RA 多肌炎 皮肌炎 PM DM 类风湿性关节炎 RA 系统性红斑狼疮 SLE ANCA相关性血管炎 MPOandPR3 自身免疫性疾病相关检测 类风湿性关节炎 类风湿性关节炎又称类风湿 RA 是一种病因尚未明了的慢性全身性炎症性疾病 以慢性 对称性 多滑膜关节炎和关节外病变为主要临床表现 属于自身免疫炎性疾病 该病好发于手 腕 足等小关节 反复发作 呈对称分布 最常见的慢性炎性关节病患病率 0 5 1 0 发病几率 30 80 100 000 year75 患者为女性 在35和45之间以及 60年龄患者中多发 自身免疫性疾病相关检测 类风湿性关节炎常见症状 关节疼痛与压痛关节肿胀晨僵关节摩擦音 自身免疫性疾病相关检测 诊断标准 早期发现可以较好地预防类风湿性关节炎的不可逆病变 因此早期诊断是RA诊断的第一要务 但RA通常由医师数次诊查之後才能确定 有鉴於此 美国风湿协会 AmericanCollegeofRheumatology 简称为ACR 於一九八七年集合专家重新拟定一套简单而准确的诊断标准 目前 很多国家都采用这一标准 另外 国内也提出了有关本病的诊断标准 自身免疫性疾病相关检测 1987年ACR标准 晨僵 至少一个关节活动时疼痛或有压痛 至少一个关节肿胀 软组织肥厚或积液而非骨质增生 至少另一个关节肿胀 两个关节受累所间隔的时间应不超过3个月 对称性关节肿胀同时侵犯机体两侧的同一个关节 如果侵犯近侧指间关节 掌指关节或趾关节时不需要完全对称 远侧指间关节的累及不能满足此项标准 骨隆起部或关节附近伸侧的皮下结节 标准的X线片所见 除骨质增生外 必须有受累关节附近的骨质疏松存在 自身免疫性疾病相关检测 1987年ACR标准 类风湿因子阳性 滑膜液中粘蛋白凝固不佳 具有下述滑膜病理学改变中三个或更多 明显的绒毛增生 表层滑膜细胞增生及呈栅栏状 明显的慢性炎细胞 主要为淋巴细胞和浆细胞 浸润及形成淋巴结的趋势 表层或间质内致密的纤维素沉积 灶性坏死 皮下结节中的组织学改变应显示中心区细胞坏死灶 围绕着栅状增生的巨噬细胞及最外层的慢性炎细胞浸润 自身免疫性疾病相关检测 1987年ACR标准 典型类风湿性关节炎 其诊断标准需上述项目中的7项 在1 5项中 关节症状至少必须持续6周 肯定类风湿性关节炎 其诊断需上述项目中的5项 在1 5项中 关节症状至少必须持续6周 可能类风湿性关节炎 其诊断需上述项目中的3项 1 5项中至少有1项 其关节症状至少必须持续6周 可疑类风湿性关节炎 其诊断需下列各项中的2项 而且关节症状的持续时间应不少于3周 晨僵 压痛及活动时痛 为医生所看到 间歇或持续至少3周 关节肿胀的病史或所见 皮下结节 为医生所看到 血沉增快 C反应蛋白阳性 虹膜炎 除非在儿童类风湿性关节炎 否则价值可疑 自身免疫性疾病相关检测 1988年国内标准 1988年全国中西医结合风湿类疾病学术会议修订通过 症状 以小关节为主 多为多发性关节肿痛或小关节对称性肿痛 单发者须认真与其他鉴别 关节症状至少持续6周以上 晨僵 体征 受累关节肿胀压痛 活动功能受限 或畸形 或强直 部分病例可有皮下结节 实验室检查 RF 类风湿因子 阳性 ESR 血沉 多增快 X线检查 重点受累关节具有典型类风湿性关节炎X线所见 自身免疫性疾病相关检测 对具备上述症状及体征的患者 或兼有RF阳性 或兼有典型X线表现者均可诊断 并有如下分期 早期 绝大多数受累关节有肿痛及活动受限 但X线仅显示软组织肿胀及骨质疏松 中期 部分受累关节功能活动明显受限 X线片显示关节间隙变窄及不同程度骨质腐蚀 晚期 多数受累关节出现各种畸形或强直 活动困难 X线片显示关节严重破坏 脱位或融合 1988年国内标准 1988年全国中西医结合风湿类疾病学术会议修订通过 自身免疫性疾病相关检测 2009年RA分类标准和评分系统 ACR EULAR 必要条件 1个关节肿痛 并有滑膜炎症证据 临床 超声或MRI 未分化关节炎需排除其他疾病所致关节炎症状和体征 其他条件血清学试验 RF或抗CCP抗体 阳性 受累关节种类 小或大关节 和数量 滑膜炎病程 急性炎症反应产物 自身免疫性疾病相关检测 诊断步骤 2009 满足两项必要条件 并有影像学典型RA骨破坏改变 可确诊为RA 无影像学典型RA骨破坏时 依据评分表 见后 6分确诊为RA 根据关节受累情况 用树枝计算法判定 满足任意一项即可确诊RA 自身免疫性疾病相关检测 评分表 自身免疫性疾病相关检测 根据关节受累情况 用树枝计算法判定 满足任意一项即可确诊RA 10个关节 至少一个小关节 加血清学试验阳性或滑膜炎 6周或ESR或CRP升高三者之一 4 10个小关节 加血清学高滴度 如血清学低滴度 需加滑膜炎病程 6周和ESR或CRP升高二者之一 1 3个小关节 加血清学高滴度及滑膜炎病程 6周和ESR或CRP升高二者之一 如血清学低滴度 则应同时满足滑膜炎病程 6周和ESR或CRP升高 2 10个中大关节 应血清学高滴度 滑膜炎病程 6周 ESR或CRP升高同时存在 树枝计算法 自身免疫性疾病相关检测 鉴别诊断 在类风湿关节炎的诊断过程中 应注意与骨关节炎 痛风性关节炎 反应性关节炎 银屑病关节炎和其他结缔组织病 系统性红斑狼疮 干燥综合征 硬皮病等 所致的关节炎相鉴别 自身免疫性疾病相关检测 鉴别诊断 骨关节炎该病为退行性骨关节病 发病年龄多在40岁以上 主要累及膝 脊柱等负重关节 活动时关节痛加重 可有关节肿胀 积液 手指骨关节炎常被误诊为类风湿关节炎 尤其在远端指间关节出现赫伯登 Heberden 结节和近端指关节出现布夏尔 Bouchard 结节时易被视为滑膜炎 骨关节炎通常无游走性疼痛 大多数患者血沉正常 类风湿因子阴性或低滴度阳性 X线示关节间隙狭窄 关节边缘呈唇样增生或骨疣形成 痛风慢性痛风性关节炎有时与类风湿关节炎相似 痛风性关节炎多见于中老年男性 常呈反复发作 好发部位为单侧第一跖趾关节或跗关节 也可侵犯膝 踝 肘 腕及手关节 急性发作时通常血尿酸水平增高 慢性痛风性关节炎可在关节和耳廓等部位出现痛风石 自身免疫性疾病相关检测 鉴别诊断 银屑病关节炎银屑病关节炎以手指或足趾远端关节受累为主 也可出现关节畸形 但类风湿因子阴性 且伴有银屑病的皮肤或指甲病变 强直性脊柱炎本病主要侵犯脊柱 但周围关节也可受累 特别是以膝 踝 髋关节为首发症状者 需与类风湿关节炎相鉴别 该病有以下特点 青年男性多见 主要侵犯骶髂关节及脊柱 外周关节受累多以下肢不对称关节受累为主 常有肌腱端炎 90 95 患者HLA B27阳性 类风湿因子阴性 骶髂关节及脊柱的X线改变对诊断极有帮助 自身免疫性疾病相关检测 鉴别诊断 结缔组织病所致的关节炎干燥综合征 系统性红斑狼疮均可有关节症状 且部分患者类风湿因子阳性 但它们都有相应的特征性临床表现和自身抗体 其他对不典型的以单个或少关节起病的类风湿关节炎要与感染性关节炎 包括结核感染 反应性关节炎和风湿热相鉴别 通过自身抗体的检测可以很好地进行确诊和鉴别诊断 自身免疫性疾病相关检测 类风湿因子 RA非特异性抗体 定义 抗IgG型免疫球蛋白自身抗体抗原 IgGFC段的CH2和CH3区敏感度 60 80 IgM RF 应用欧蒙ELISA 患者中71 n 93 特异性 非常有限存在于很多风湿性或非风湿性的疾病和正常人中 60岁 5 30 IgM RF 应用欧蒙ELISA 正常人中12 n 200 自身免疫性疾病相关检测 RA 特异性自身抗体 抗含瓜氨酸蛋白抗体 CCP 环瓜氨酸肽 Sa抗核周因子抗体 APF 抗角蛋白抗体 AKA 抗丝集蛋白抗体 AFA 自身免疫性疾病相关检测 抗核周因子和抗角蛋白抗体 食管 大鼠 上皮细胞 口腔 抗角蛋白抗体 AKA 1979 抗核周因子 APF 1964 靶抗原 丝集蛋白 靶抗原 前丝集蛋白 自身免疫性疾病相关检测 丝集蛋白 丝集蛋白 上皮细胞表达的蛋白质 连接角蛋白纤维 前体 前丝集蛋白 自身免疫性疾病相关检测 将精氨酸替换为瓜氨酸 自身免疫性疾病相关检测 CCP 环瓜氨酸