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琼脂糖凝胶电泳结果分析及其应用 口腔1402 琼脂糖凝胶电泳结果分析及其应用 琼脂糖凝胶电泳是常用的用于分离 鉴定DNA RNA分子混合物的方法 主要是应用琼脂糖凝胶作为支持物的电泳法 借助琼脂糖凝胶的分子筛作用 核酸片段因其分子量或者分子形状的不同 电泳速度有差异而分离 利用DNA RNA分子在泳动时的电荷效应和分子筛效应 达到分离混合物的目的 与其他支持物电泳最主要区别是 它兼有 分子筛 和 电泳 的双重作用 琼脂糖凝胶电泳结果分析及其应用 胶床准备 静置 铺胶 凝胶准备 琼脂糖凝胶电泳结果分析及其应用 结果初步分析数量分析 条带的宽度 荧光的亮度 质量分析 纯度分子量 琼脂糖凝胶电泳结果分析 影响因素 DNA分子的大小 实验证明 DNA片段迁移距离与其分子量的对数成反比 琼脂糖的浓度 一定大小的DNA片段在不同浓度的琼脂凝胶中 电泳迁移率不相同 DNA分子的构型 不同构型的DNA在琼脂糖凝胶中的电泳速度差别较大 琼脂糖凝胶电泳结果分析及其应用 1 DNA的制备 适合分离大片段DNA 琼脂糖凝胶约可区分相差100bp的DNA片段 其分辨率虽比聚丙烯酰胺凝胶低 但它制备容易 分离范围广 尤其适于分离大片段DNA 普通琼脂糖凝胶分离DNA的范围为0 2 20kb 利用脉冲电泳 可分离高达10 7bp的DNA片段 可提取大分子DNA利用琼脂糖凝胶制成凝胶块提取基因组DNA能够获得足够大的DNA片段 可以完全符合构建粘粒基因组文库的要求 2 PCR产物在琼脂糖凝胶上进行的电泳检测 3 琼脂糖在其他方面的应用
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