核酸的理化性质PPT课件

核酸的理化性质 一 一般的物理性质 1 形态 DNA 白色纤维状固体RNA 白色粉末状固体 一 一般的物理性质 2 溶解性 微溶于水不溶于乙醇 乙醚和氯仿等一般的有机溶剂RNA核蛋白体 RNP 易溶于0 14mol L的NaCl溶液DNP可溶于高浓度 1 2mol L 的NaCl溶液 一 一般的物理性质 DNA溶液粘度极高 因其分子直径小而长度大 RNA溶液粘度要小得多 3 粘度 核酸变性或降解后 粘度降低 核酸既含有酸性的磷酸基团 又含有弱碱性的碱基 故可发生两性解离 其解离状态随溶液的pH值而改变 二 两性解离 由于磷酸基团的酸性很强 所以pI较低 整个分子相当于多元酸 利用核酸的两性解离可以通过调节核酸溶液的pH来沉淀核酸 也可通过电泳分离纯化核酸 嘌呤和嘧啶具有共轭双键 能强烈吸收紫外光 在260nm处有最大吸收峰 对于纯的DNA或RNA 可以通过测得A260来推测其核酸含量 纯的DNA A260 A280 1 8纯的RNA A260 A280 2 0 三 紫外吸收性质 A260 A280值可以反映核酸的纯度 1 变性的概念 核酸在某些物理或化学因素的作用下 其空间结构发生改变 从而引起理化性质的改变及生物活性的降低或丧失 A260值升高粘度下降沉降系数加快 四 变性与复性 一 变性 一 变性 2 引起变性的因素 物理因素 热 热变性 紫外 辐射等化学因素 过酸 酸变性 过碱 碱变性 有机溶剂尿素 使氢键断裂 破坏碱基堆集力 从而引起核酸二级结构的破坏 一 变性 3 增色效应 变性后的DNA对260nm的紫外光吸收值比变性前明显升高 这种现象称为增色效应 这是由于变性的DNA双螺旋解体 藏于螺旋内部的碱基暴露出来 增色效应常可用来衡量DNA变性的程度 一 变性 4 热变性曲线 熔解曲线 在DNA发生热变性的过程中 A260随温度的变化曲线 不同DNA的熔解曲线不同 但很类似 都是 S形曲线 一 变性 又称熔解温度 熔点 5 解链温度 Tm值 meltingtemperature 指DNA的变性达到50 即增色效应达到一半时的温度 DNA的Tm值一般在70 85 之间 变性百分率 100 50 0 温度 A260 Tm 一 变性 影响Tm值的因素 DNA分子中GC碱基对的含量DNA分子中GC含量高 则Tm值大 5 解链温度 Tm值 DNA的溶液环境如离子强度 pH 一 变性 RNA含局部双螺旋 也可发生变性 RNA的变性 特点 变性效应不如DNA明显增色效应的跳跃较平缓Tm值较低 变性DNA在适当条件下 又可使两条彼此分开的链重新缔合成为双螺旋结构 此过程成为复性 1 复性的概念 退火 热变性的DNA在缓慢冷却的条件下的复性过程 二 复性 四 变性与复性 当变性的DNA经复性以重新形成双螺旋结构时 其溶液的A260值则减小 这种现象称为减色效应 减色效应常可用来衡量DNA复性的程度 2 减色效应 四 变性与复性 二 复性 不同来源的DNA分子放在一起热变性 然后慢慢冷却 让其复性 这些异源DNA RNA 之间有互补的序列或部分互补的序列 则复性时会形成 杂交分子 3 分子杂交 核酸的杂交广泛应用于分子遗传学中 四 变性与复性 二 复性 基因 gene DNA分子上具有遗传效应的特定核苷酸序列 其编码产物是多肽链或RNA 基因组 genome 一种生物体的全部基因或染色体 基因组学 genomics 一门涵盖了对所有基因进行基因组作图 核苷酸序列分析 基因定位和功能分析的科学 包括结构基因组学 structuralgenomics 和功能基因组学 fuctionalgenomics 生物信息学 bioinformatics 将计算机科学和数学应用于生物大分子信息的获取