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实验二温度和pH对酶活性的影响 实验目的1 了解温度对酶活性的影响 2 了解酶活性的最适pH及掌握一种检测最适pH的方法 实验原理酶的催化作用受温度的影响 在最适温度下 酶的反应速度最高 大多数动物酶的最适温度为37 40 植物酶的最适温度为50 60 酶对温度的稳定性与其存在形式有关 有些酶的干燥制剂 虽加热到100 其活性并无明显改变 但在100 的溶液中却很快地完全失去活性 低温能降低或抑制酶的活性 但不能使酶失活 淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色 糊精按其分子的大小 遇碘可呈蓝色 紫色 暗褐色或红色 最简单的糊精遇碘不显颜色 麦芽糖遇碘也不显色 在不同温度下 淀粉被唾液淀粉酶水解的程度 可由水解混合物遇碘呈现的颜色来判断 酶的活力受环境pH的影响极为显著 不同酶的最适pH值不同 本实验观察pH对唾液淀粉酶活性的影响 唾液淀粉酶的最适pH约为6 8 实验试剂 1 0 2 淀粉的0 3 氯化钠溶液2 淀粉酶或稀释50 100倍的唾液用蒸馏水漱口 以清除食物残渣 再含一口蒸馏水 半分钟后使其流入量筒并稀释50 100倍 稀释倍数可根据各人唾液淀粉酶活性调整 混匀备用 3 碘化钾 碘溶液 实验器材 1 试管及试管架2 恒温水浴3 冰浴4 沸水浴 实验操作 摇匀后 将1号 3号两试管放入37 恒温水浴中 2号试管放入冰水中 10min后取出 将2号管内液体分为两半 用碘化钾 碘溶液来检验1 2 3管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度 记录并解释结果 将二号管剩下的一半溶液放入37 水浴中继续保温10min后 再用碘液实验 结果如何 取3支试管 编号后按下表加入试剂 1 温度对酶活性的影响 各取不同pH的缓冲液3ml 分注入4支带有编号码的试管中 随后于每个试管中添加0 5 淀粉溶液2ml和淀粉酶2ml 将各试管内容物混匀 并依次置于37 恒温水浴中保温 每隔1分钟由第3管取出一滴混合液 置于白瓷板上 加1小滴碘化钾 碘溶液 检验淀粉的水解程度 待混合液变为棕黄色时 向所有试管依次添加1 2滴碘化钾 碘溶液 观察各试管中物质呈现的颜色 分析pH对唾液淀粉酶活性的影响 取4个50ml锥形瓶 并编号 用移液管按下表添加0 2mol L磷酸氢二钠溶液和0 1mol L柠檬酸溶液制备pH5 0 8 0的四种缓冲液 2 pH对酶活性的影响 注意事项1 加入酶液后 要充分摇匀 保证酶液与全部淀粉液接触反应 得到理想的颜色梯度变化 2 取混合液前 应将试管内溶液充分混匀 取出试液后 立即放回试管中一起保温 思考题 1 唾液淀粉酶的最适温度
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