含磷量测定方法.doc

2.4 实验方法2.4.1 超声波工艺的研究称取菜籽油25g于150mL的三角瓶中，在超声频率为40KHz的频率下，一定的超声时间、超声功率、超声温度及加水量进行超声波水化脱胶，结束后静置0.5h，然后在2000r/min下离心20min，得到水化脱胶油。2.4.2 含磷量的测定油脂样品与金属氧化物氧化时，试样中的磷成为磷酸盐，加酸溶解而得磷酸根，在加入钼酸盐后生成磷钼酸盐，磷钼酸盐被还原而产生钼蓝，其颜色深浅与油脂中磷脂含量成正相关，由此可进行比色定量。该法具有简便、准确、灵敏度高的特点。在已离心好的油脂中，取上层油脂于小烧杯中，用电子天平称取5g油于30mL的坩埚中，每个称取三个平行，各加入0.25g氧化锌。炭化：用电炉进行脱胶油灰化的过程中，有几点要注意：（1）先小火炭化，控制电炉在400W500W之间，如果火候过大，油与氧化锌会剧烈反应，油往外溅出，即炭化初期，控制好火候是非常关键的一步。（2）待脱胶油的颜色变成黑色时，小心加大火候，到达一定温度时会燃烧，燃烧结束后，油开始慢慢的起泡，起泡时控制好火候很关键，尽量不让泡沫溢出，如有气泡溢出，则对实验的最终结果影响较大。（3）待泡沫消去，加大火候，15min后把电炉开到最大，待坩埚中的物质变为灰白色时，炭化完成。把炭化好的试样小心移入灰化炉中，在550600 的高温下灼烧至完全灰化，灼烧2.5h，取出冷却至室温，加入1：1盐酸5mL溶解灰分，并加热微沸5min，冷却，将溶解液过滤注入25mL容量瓶中，用热水（50-60）冲洗坩埚3-4次，待滤液冷却至室温后，用50氢氧化钾溶液中和滤液至出现混浊，缓慢滴加盐酸使氢氧化钙沉淀全部溶解后，再加2滴，用水稀释至刻度，摇匀即可。2.4.2.1 比色 用移液管吸取被测液2mL注入25mL比色管中，加入钼酸铵溶液2mL、亚硫酸钠溶液1mL、对苯二酚溶液1mL，然后加水稀释至刻度，加塞、摇匀。静置0.5h后，去塞，用分光光度计在波长660nm下，用3cm比色皿，按测定标准液的方法测定其吸光值，记录数据4。2.4.2.2 绘制标准曲线取10支25mL比色管，编成0、l、2、3、4、5、6、7、8、9共l0个号码，按号码顺序分别注入磷标准2号液0、l、2、4、6、8、10、12、14、16mL，再在各比色管内分别加人钼酸铵溶液2mL、亚硫酸钠溶液1mL、对苯二酚溶液1mL，然后分别加水稀释至刻度，加塞、摇匀。静置0.5h后，用分光光度计在波长660nm下，用3cm比色皿，以0号管内之溶液作空白调节吸光值至0位，分别测定各比色管溶液的吸光值。以吸光值为横坐标，以磷的含量为纵坐标绘制标准曲线4。2.4.3 磷含量的计算 根据被测液的吸光值在标准曲线查得磷含量 (P)后，可以按以下公式计算试样中的磷含量 ： 式中： P 标准曲线查得的磷量 (mg/kg) ； V1 比色时所取的被测液体积(mL) ； V2 样品灰化后稀释的体积(mL) ； m 试样质量(g) 。 2.4.4 准确性实验某一分析方法的准确度，可通过测定标准试样的误差，利用加标实验来计算回收率，以误差或回收率来判断。在回收试验中，加入已知量的标准物的样品，称加标样品，未加标准物的样品称为未知样品，在相同条件下用同种方法对加标样品和未加标样品进行磷脂含量的测定，按下列公式计算出加入标准样品的回收率：式中：P%加入标准物质的回收率 m加入标准物质的量 m1加标样品的测定值 m2未标样品的测定值2.4.5 精炼率的计算称取原