乙肝标志物检测.ppt

乙型肝炎病毒标志物检测 概述 乙型肝炎病毒 HBV 是一种嗜肝脱氧核糖核酸病毒 属于包膜病毒 在全世界广泛流行 估计全球半数以上人口已被HBV感染过 5 的人口为HBV慢性感染中国 乙肝高发区 人群HBsAg的检出率达9 8 HBV形态与基因结构 嗜肝DNA病毒科 Hepadnaviridae 电镜 3种形态 乙型肝炎病毒 小球形颗粒空心包膜 不含核酸 管形颗粒两者均为过剩的病毒外壳 仅含HBsAg 无感染性 空心汤团 形态与基因结构 Dane颗粒 完整的病毒 形态 HBsAg HBcAg HBVDNA DNAP 外膜蛋白 核衣壳蛋白 HBeAg HBVViralGenomeOrganization HBsAg HBcAg HBeAg 3200BasePairGenome Hepatocytereceptorbindngsite HBVDNAPolymerase Proteinthattransactivatestranscriptionalpromotors 图4 2血清中的Dane颗粒和外膜颗粒毒粒有双层外膜 含核心 乙型肝炎病毒 电镜 DANE氏颗粒直径42NM核心直径27NM 乙肝六项检测 参考值 ELISA法为阴性放射免疫分析 RIA 法为阴性 HBV抗原抗体系统 HBsAg 表面抗原 是HBV的外壳 不含DNA 其本身不具有传染性 但常与HBV同时存在 常被作为传染性标志之一 是HBV感染的基本标志 也是最早出现的血清学标志之一 HBsAg阳性见于 乙肝的潜伏期 急性期慢性乙肝病毒携带与HBV感染有关的肝硬化和原发性肝细胞癌注意HBsAg阴性并不能完全排除HBV感染 HBV抗原抗体系统 抗 HBs 特异性中和抗体 保护性抗体 可阻止HBV穿过细胞膜进入新的肝细胞 抗 HBs阳性 可提示对乙肝病毒有一定程度的免疫力见于 注射乙肝疫苗或乙肝高效价免疫球蛋白 HBIG 后 产生的主动或被动免疫 乙型肝炎恢复期 隐性感染的健康人 自身产生了免疫力 HBV抗原抗体系统 HBcAg 核心抗原 一般情况不易从血清中检测到游离的HBcAg HBcAg阳性提示患者血清中有感染的HBV存在 其含量较多表示复制活跃 传染性强 预后较差 抗 HBc 非中和抗体 分IgM IgG和IgA三型抗 HBcIgM 通常在出现症状时即可检出 一般持续约6个月 提示HBV复制 是急性感染的重要指标 也是慢性活动性肝炎的重要标志抗 HBcIgG 在抗 HBcIgM下降及消失后出现 可伴随感染者终生存在 是既往感染过HBV的指标 HBV抗原抗体系统 HBeAg阳性 与HBsAg平行出现 较HBsAg消失早意义 表示乙肝处于活动期 并有较强的传染性 HBsAg持续阳性可转为慢性或肝硬化 孕妇阳性可垂直传播 抗 HBe阳性率 慢性乙肝为48 肝硬化为68 3 肝癌为80 在HBeAg消失后出现表示HBV在体内复制减少或传染性减弱或消失 乙肝急性期即出现阳性者 易进展为慢性乙肝 血清学检测的临床意义 HBsAg抗 HBsHBeAg抗 HBe抗 HBc临床意义 急性或慢性感染 大三阳 乙肝后期或慢性感染 小三阳 潜伏期或急性乙肝早期 痊愈或恢复期 有免疫力 痊愈 有免疫力 疫苗接种或曾经感染过 有免疫力 乙型肝炎病毒表面抗原蛋白前S1和前S1抗体测定 概念 乙肝病毒表面抗原蛋白前S1位于HBV病毒颗粒的表面 是乙肝病毒识别肝细胞表面特异性受体的主要成分 是乙肝病毒复制和活动的标志物 参考值 ELISA法或放射免疫分析 RIA 法 PreS1为阴性抗PreS1为阴性临床意义 1 非常重要的传染性指标 作为病毒复制的标志较HBeAg敏感 2 前S1抗原阴转越早 抗PreS1阳转越早 患者病程越短 预后越好 乙型肝炎病毒表面抗原蛋白前S2和前S2抗体测定 概念 乙肝病毒表面抗原蛋白前S2 PreS2 位于HBV病毒颗粒的表面蛋白成分 是乙肝病毒侵入肝细胞的主要结构成分 乙型肝炎病毒表面抗原蛋白前S2抗体是乙肝病毒HBV的中和抗体 参考值 ELISA法或放射免疫分析 RIA 法 PreS2为阴性抗PreS2为阴性临床意义 1 PreS2为阳性提示HBV复制异常活跃 有传染性 2 抗PreS2为阳性 见于乙肝急性期及恢复早期 提示HBV已被清除 预后较好 乙型肝炎病毒DNA测定 概念 乙型肝炎病毒DNA HBV DNA 呈双股环形 是HBV的基因物质 也是乙型肝炎的直接诊断证据 参考值 实时荧光定量PCR法 阴性临床意义 1 HBV DNA阳性 是诊断乙肝的佐证 提示HBV复制及有传染性 2 也用于监测应用HBsAg疫苗后垂直传播的阻断效果 若HBV DNA阳性 表明疫苗阻断效果不佳 乙型肝炎病毒YMDD变异测定 概念 YMDD 酪氨酸 蛋氨酸 天门冬氨酸 天门冬氨酸 位点是HBV反转录酶的活性部分 属高度保守序列 在HBV的反转录过程中 YMDD位点中的YM能与模板核苷末端糖基相作用 影响寡核苷酸与模板链的结合 参考值 实时荧光定量PCR法 基因芯片分析 焦磷酸测序法和基因克隆与测序法 该位点序列为酪氨酸 蛋氨酸 天门冬氨酸 天门冬氨酸临床意义 临床意义 YMDD是HBV反转录酶发挥催化活性所必需的关键结构 目前临床上广泛使用的胞苷类似物拉米夫定等抗病毒药物 作用靶位主要是HBV反