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文档简介

土壤微生物的分离筛选 一 微生物筛选原理及介绍 二 微生物筛选的流程 三 微生物筛选的操作 content 一 微生物筛选介绍 1 概念2 筛选及纯化的方法3 培养基的选择 概念 在混杂的微生物群体中 按照微生物的代谢特征 分离出特定功能的微生物 并进行纯化直至获得单一菌株的操作过程 土壤是微生物的大本营 混杂着大量的微生物 从中分离可得到只含有一种微生物的纯培养 概念筛选及纯化的方法培养基的选择 微生物筛选的方法有 稀释涂布法和平板划线法 稀释涂布法 将土壤溶液稀释成一定的梯度 将其涂布到固体平板培养基上 平板划线法 挑取稀释涂布后长出的菌落 在固体平板培养基上划线培养 获取纯菌落 概念筛选及纯化的方法培养基的选择 细菌的筛选 选择性培养基根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学 物理因素的抗性而设计的培养基 其功能是使混合菌样中的劣势菌变成优势菌 从而提高该菌的筛选效率 概念筛选及纯化的方法培养基的选择 细菌的保存 牛肉膏蛋白胨培养基配方 g 牛肉膏3 蛋白胨10 氯化钠5 琼脂15 蒸馏水1000ml pH7 2 概念筛选及纯化的方法培养基的选择 二 微生物筛选纯化的流程 样品 富集培养 梯度稀释 涂布培养 平板划线纯化 斜面保存 三微生物筛选纯化的操作 注意事项 筛选之前 提前制作好试验用的培养基 与培养微生物相关的试验器材需要灭菌 方法为在121 的条件下高压灭菌20分钟 与微生物相关的操作需要在无菌操作台上进行 操作之前15分钟打开紫外灯 样品 富集培养 梯度稀释 涂布培养 划线纯化 斜面保存 采样 土壤样品 梅花形布点采样 取得的用四分法进行取样 将样品放入4 冰箱中保存待用 富集培养 指从微生物混合群开始 对特定种的数量比例不断增高而引向纯培养的一种培养方法 在适于目标微生物而不适于其他微生物生长的条件下继续培养 则目标微生物将成为优势种而得到纯培养 样品 富集培养 梯度稀释 涂布培养 划线纯化 斜面保存 以筛选产DMS功能微生物为例 取2 5g土样置于50ml改良基础盐液体培养基中 28 震荡培养4天 样品 富集培养 梯度稀释 涂布培养 划线纯化 斜面保存 样品 富集培养 梯度稀释 涂布培养 划线纯化 斜面保存 样品 富集培养 梯度稀释 涂布培养 划线纯化 斜面保存 将菌种用无菌水制成悬液 取若干只无菌试管 每只内盛9ml无菌水 吸取上述菌悬液lml加入第1只含有无菌水的试管内 也就是10 1 从第1只试管内 10 1 吸取lml注入第2只含有无菌水的试管内 也就是10 2 用同样方法 制成10 3 10 8的菌悬液 样品 富集培养 梯度稀释 涂布培养 划线纯化 斜面保存 划线目的 逐步纯化 直至出现单菌落 获得纯菌株 3 5次 样品 富集培养 梯度稀释 涂布培养 划线纯化 斜面保存 样品 富集培养 梯度稀释 涂布培养 划线纯化 斜面保存 样品 富集培养 梯度稀释 涂布培养 划线纯化 斜面保存 将接种菌株的斜面放入4
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