实验四病源性球菌与杆菌.ppt

病源性球菌与杆菌 一 实验目的1 掌握链球菌 脑膜炎双球菌 结核杆菌 白喉杆菌的形态特征和染色特性 2 熟悉肠道杆菌培养特征 生化反应及动力学等特性 3 了解三种葡萄球菌产生的色素 4 了解乙型溶血型链球菌在血琼脂平板上的菌落特点及溶血性 5熟悉抗 o 试验的方法及临床意义 二 实验内容1 自己动手观察链球菌 脑膜炎双球菌的形态 示教观察结核杆菌 白喉杆菌的形态 2 观察肠道杆菌的双糖发酵 鉴别培养基 ss培养基 的生化反应 3 化脓性球菌的鉴定 三种葡萄球菌的色素观察 乙型链球菌的溶血现象观察 抗 O 实验 三 作业 1 镜下绘出4种形态图2 根据生化特性及产生色素 葡萄球菌分为哪几种类型 Salmonella ShigellaMediun 主要成分基础营养乳糖指示剂抑制剂 分解乳糖 不分解乳糖 产酸 PH 指示剂变红色 红色大菌落 大肠杆菌等 无明显变化 无色半透明小菌落 志贺菌等 大肠杆菌 痢疾杆菌 结核分枝杆菌 抗酸染色 乙型溶血性链球菌 溶血环 白喉棒状杆菌 异染颗粒 实验四病原性球菌 1 五类病原性球菌的形态 排列及染色性2 葡萄球菌 链球菌的培养物3 血浆凝固酶试验 玻片法试管法4 抗链球菌溶血素 O ASO 乳胶试验5 脓汁中葡萄球菌的分离鉴定 操作 1人 组 操作 1人 组 肺炎球菌特殊染色可见的荚膜 G 球菌 金葡菌 链球菌 肺炎双球菌 1 五类病原性球菌的形态 排列及染色性 G 球菌 淋球菌 脑膜炎球菌 2 葡萄球菌 链球菌的培养物 普通琼脂平板血平板菌落形状色素溶血性金葡圆形凸起光滑中等大小金黄色 柠葡同上柠檬色 白葡同上白色 表1 血平板甲型链球菌针尖小菌落 草绿色狭窄溶血环乙型链球菌针尖小菌落 透明宽大溶血环 巧克力血平板脑膜炎双球菌菌落透明似露滴状 表2 表3 3 血浆凝固酶试验 玻片法 操作 1人 组 原理 方法 兔血浆兔血浆生理盐水 1 2 3 金葡白葡金葡 凝集 不凝集 不凝集 4 血浆凝固酶试验 试管法 金葡菌白葡菌 兔血浆兔血浆37 30 水浴观察 凝集为阳性 不凝集为阴性 凝固酶实验 试管法 五 抗链球菌溶血素 O ASO 快速胶乳法高滴度病人血清被适量溶血素中和了正常水平的抗体后 还有多余ASO 这些多余抗体即与SLO胶乳试剂反应 出现清晰 均匀的凝集颗粒 操作 1人 组 原理 阳性对照阴性对照待测血清各加溶血素 O 1滴轻摇1min再加SLO胶乳1滴轻摇3min 观察结果 方法 稀释度ASO IU ml 1 154001 308001 601600 ASO 250IU ml阴性 结果判定 注意事项 液体量要一样 菌量一样 血浆多挑几环 一滴的量 菌少挑点 不能干 3 涂菌时间一样 出现凝集为阳性 再涂凝集物可被涂散 变阴性 肠道杆菌 一 肠道杆菌的形态及染色性二 肠道杆菌的培养特性三 肠道杆菌的生化反应特点四 Widal实验 肠道杆菌的形态及染色片 肠道菌的菌落形态 EMB大肠 菌落呈紫黑色 有金属光泽 伤寒痢疾 菌落无色半透明 SSD大肠 大而不透明的红色菌落 伤寒痢疾 中等大小淡黄色菌落 大肠杆菌 EMB培养基 肠道致病菌 SS培养基 粪便标本中致病性肠道杆菌的分离与鉴定 生化反应1 单糖发酵 葡萄糖及乳糖发酵一 实验目的与原理了解糖发酵试验方法二 实验材料1 菌种 大肠杆菌 伤寒杆菌 痢疾杆菌培养物2 培养基 乳糖及葡萄糖发酵管三 实验方法 用接种环将大肠杆菌 伤寒杆菌分别各接种于葡萄糖及乳糖发酵管中 方法同前 2 37孵育18 24小时 取出观察结果 动力检测 常见肠道杆菌的生化反应鉴别表 铁质双糖琼脂基上各种肠道杆菌的生长情况 肠道杆菌在KI培养基上的培养特性 Indol实验 生化反应2 Indol实验 2 肠道杆菌在SS培养基上的生长现象 大肠杆菌伤寒杆菌SS平板红色大菌落无色透明小菌落 基础培养基 乳糖 底物 胆盐 煌绿 抑制非致病菌 中性红 指示剂 SS培养基 3 五类肠道杆菌的生化反应及动力 大肠杆菌 变形杆菌 乙型副伤寒杆菌 伤寒杆菌 痢疾杆菌 葡萄糖乳糖H2S尿素靛基质动力双糖铁 4 肠道杆菌未知菌1和未知菌2的鉴定 操作 2人 组 未知菌 双糖铁培养基 乳糖 固体 上 葡萄糖 半固体 下 生化反应 葡萄糖发酵乳糖发酵尿素酶试验H2S试验靛基质试验 蛋白胨水液体培养基 动力试验 半固体培养基 微量发酵管 方法 血清