淋巴瘤知识入门

淋巴瘤知识入门,本幻灯片大部分图片内容来自陈国璋教授的慷慨馈赠特此致谢！,诊断的客观条件,诊断外部条件,制作精良的HE切片质控良好的免疫组化染色临床病史分子生物学检测（可选）流式细胞光度术（可选）,正常淋巴结结构,淋巴结结构,皮质区副皮质区髓质包膜和纤维分隔窦区,流入淋巴管,纤维包膜,边缘窦,次级滤泡,套区,生发中心,初级滤泡,纤维分隔,皮质区,流入淋巴管,髓质及淋巴窦,肥胖内皮的小静脉,门区淋巴窦,静脉,动脉,流出淋巴管,副皮质区,髓索,皮质区:B细胞区,初级淋巴滤泡初始B细胞和成熟B细胞滤泡树突细胞,CD21,皮质区：淋巴结的B细胞区,次级淋巴滤泡中心母细胞,中心细胞(滤泡中心B细胞;CD10+)滤泡树突细胞T细胞(CD10强+;常CD4+/T辅助及CD57+)吞噬碎片的巨嗜细胞套区B细胞(IgM+D),次级滤泡结构示意图,边缘区细胞(IgM),套区细胞(IgM+D),生发中心细胞(IgM,IgG,IgAorIgE,notIgD),CD20,CD21,CD10,CD20,皮质区：淋巴结的B细胞区,边缘区B细胞多数淋巴结中不明显在腹腔淋巴结容易见到，即在套区外侧，淡白色区域，胞浆较丰富、透明,Mantlezone,Marginalzone,CD20,皮质反应性增生改变,反应性滤泡增生对T细胞依赖抗原反应而发生生发中心有极性：亮区及暗区，扁桃体最明显可伴有浆细胞增多,抗原流入的方向,套细胞在顶端较厚“帽子”,生发中心的亮区（中心细胞较多）,生发中心的暗区(中心母细胞较多),Darkzone,Lightzone,Ki67,副皮质区：淋巴结的T区,T细胞为主(CD4CD8):小淋巴细胞，偶有较大的T细胞(一些散在于副皮质区的大细胞是激活的B细胞)高度增生内皮的小静脉(淋巴细胞在其内流通)S100+的细胞(指突状树突状细胞)Cytokeratin+树突细胞(纤维母细胞性树突细胞?),IDC,CD3,CD20,副皮质区的反应性增生,最常见原因:病毒感染,过敏反应,肿瘤引流淋巴皮质增宽,有时形成结节.T结节紧邻B滤泡，有时融合高度增生内皮细胞的血管;混合性小细胞和免疫母细胞,髓索,有较多浆细胞可显著或不明显B细胞反应时可显著,如反应性滤泡增生、浆细胞性Castleman病时,窦,流入淋巴管边缘窦淋巴内窦髓质淋巴窦流出淋巴管淋巴窦被覆窦内衬细胞(有桥粒).窦内有一些组织细胞和淋巴细胞腹腔内淋巴结淋巴窦常明显扩张,结缔组织网架,纤维包膜以及向淋巴结内伸出的纤维小梁构成网架正常情况下不明显反应性增生及周围淋巴结肿大时较明显,AnyQuestion?Takeabreak!,免疫组化的一般问题,免疫组化的重要性,鉴别淋巴瘤VS反应性增生鉴别淋巴瘤VS其他恶性肿瘤淋巴瘤的分类淋巴瘤的预后及临床分期治疗靶标,没有高质量的免疫组化就不能很好地进行淋巴瘤诊断,染色结果的判定,正确的染色结果判定，比免疫组化染色本身一样重要染色的判断必须紧密结合组织学，必须确定究竟应该是哪一种细胞着色，哪一种成分不应着色,CD20,染色结果的判断,必须申明哪种细胞为阳性，尤其是病变含有多种细胞成分时如果病理报告如下:CD20+,CD3+,CD5+,Bcl2+,CD10-,Bcl6-，没有价值正确的表述:大细胞CD20+,CD3-,CD5-,CD10-背景的小淋巴细胞：CD3+CD5+CD8+有散在的网格状CD21+滤泡树突细胞,染色结果的判断,阳性比阴性更有价值，因为阴性可能由于：抗原丢失抗原修复不足敏感性不足抗体过期加错抗体或试剂添加步骤错误,染色结果的判断,必须有阳性的内对照和外对照，证明染色结果可信染色应得到正确的预期结果大多数白细胞的标记为膜阳性TdT,S100及转录因子类抗体均为核阳性,CyclinD1,CD20,TdT,淋巴细胞的表型,B,T,NK,紧密相关,淋巴系统的形成,胸腺,?骨髓?Peyer结,淋巴结、脾、粘膜组织,中心淋巴组织:“前驱”细胞的贮存库;由此细胞发育成熟,外周淋巴组织:成熟细胞的贮存库准备对抗原产生反应,T,B,NK,?,前前B细胞,前B细胞,不成熟B细胞,成熟B细胞,激活的B细胞,浆细胞,前驱细胞，非抗体依赖,初始（Virgin）B细胞，非抗体依赖,中心细胞抗体依赖,TdT,CD20,CD22,CD19,PAX5,CD79a,CD10,Bcl-6,CD138,CytoplasmicCD22,前胸腺细胞,包膜下胸腺细胞,皮质胸腺细胞,髓质胸腺细胞,外周T细胞,前驱细胞,成熟T细胞,Cytoplasmic,Surface,CD4,CD8,CD1,CD4,CD8,CD3,CD2,CD7,TdT,淋巴瘤VS其他恶性肿瘤?,有时淋巴瘤与分化差的癌、恶性黑色素瘤、肉瘤鉴别非常困难淋巴瘤也可有各种形态(如小梁状排列、粘液变性、菊形团、梭形细胞)免疫组化对于鉴别很有帮助,对于分化差的肿瘤,*大细胞间变淋巴瘤和淋巴母细胞淋巴瘤可以LCA阴性需要加染其他标志(如CD30),Cytokeratin,CAM5.2,白细胞共同抗原,CD45(CD45RB):Leukocytecommonantigen除浆细胞之外的所有正常淋巴细胞(B,T或NK系)Reed-Sternberg细胞(Hodgkinlymphoma)CD45-通常对于淋巴瘤，不必染LCA:直接染CD20和CD3,扁桃体,LCA/CD45,免疫组化对淋巴瘤分类有多重要?,只有极少数淋巴瘤不做免疫组化，可明确诊断:滤泡性淋巴瘤边缘区B细胞淋巴瘤,粘膜相关淋巴组织类小淋巴细胞淋巴瘤绝大多数其他类型均需要免疫组化，尤其是:套细胞淋巴瘤弥漫大B细胞淋巴瘤各种T细胞淋巴瘤,B系细胞标记,CD20(e.g.L26):非常敏感(95%B细胞淋巴瘤阳性),有时B小淋巴细胞淋巴瘤染色不佳，B细胞淋巴母细胞淋巴瘤可为阴性浆细胞、浆细胞瘤和浆母细胞淋巴瘤阴性(对于这类肿瘤，CD20阴性是一诊断线索)核阳性不能判定为阳性，任何细胞过度热修复均可核阳性,CD20,B系细胞标志,CD79a(mb-1):Bcellreceptorcomplex:sensitiveandspecificBcellmarker(normalplasmacellsarepositive;germinalcentercellsarestainedweakly)50%plasmacytomasarepositiveButcanbepositiveinT-lymphoblasticlymphoma/leukemiaAntibodyexpensive:Useasback-upImmunoglobulin(cytoplasmicand/orsurfaceIg),CD79a,CD79a,Plasmacytoma,NewB-lineagemarkerPAX-5Oct-2Bob.1,PAX-5,PAX-5,PAX-5,Oct-2,Bob.1,Oct-2,Bob.1,T-系细胞标志,胞浆CD3(polyclonalagainstCD3e,monoclonalalsoavailable,e.g.PS1):T系细胞高度敏感和特异核周或核皱折处染色深组织细胞有时弱浆阳性，但无核周浓聚90%T和NK细胞淋巴瘤阳性合并使用其他T细胞标志(e.g.CD45RO,CD2),CD3,CD3,T系细胞标志,表面CD3(e.g.Leu4,T3,OKT3):需要冰冻切片染色大部分T细胞淋巴瘤表面CD3阳性NK细胞表面CD3-,胞浆CD3+,T系细胞标志,CD45RO(e.g.UCHL1,A6):高度敏感的T细胞标志，一些T细胞淋巴瘤CD3-CD45RO+但组织细胞和髓系细胞及其肿瘤也阳性CD43(e.g.MT1,DFT1,Leu22):高度敏感的T细胞标志，但不特异组织细胞和髓系细胞及其肿瘤也阳性EBV感染时，B细胞也表达小B细胞淋巴瘤时也为阳性,T系细胞标志,CD4,CD8:诊断T细胞淋巴瘤时并不常用CD2:敏感而特异的全T细胞标志比CD3贵，备用标志CD7:T细胞发育早期阶段表达尤其在诊断T淋巴母细胞淋巴瘤时有用(一些病例CD3-),一个新的T细胞标志:LAT,当一个“淋巴瘤”仅CD43阳性时,可能是一个真正的T细胞淋巴瘤/白血病一定要考虑到:髓系白血病/粒细胞肉瘤组织细胞肿瘤,i.e.thespecificTandBmarkersnegative,CD43+:Tcelllymphoma?,No:Seemyeloperoxidase,NK细胞标志,CD56(e.g.123C3):NK细胞淋巴瘤的最好标志不完全是NK细胞特异性标志;一些表达gdT细胞受体的T细胞淋巴瘤也阳性CD56在神经细胞和神经内分泌细胞也阳性，诊断NK细胞淋巴瘤时必须有其他白细胞标志,CD56(NK/Tcelllymphoma),小结:B或者T细胞淋巴瘤？,CD20CD3,CD20+,B细胞淋巴瘤;加其他分类标志,CD3+,T或NK细胞淋巴瘤;加其他标志(CD56,CD30),CD20-CD3-,非造血组织肿瘤?浆细胞瘤?浆母细胞性淋巴瘤?T细胞淋巴瘤?淋巴母细胞淋巴瘤?,淋巴瘤进一步分类,小B细胞淋巴瘤CD5CD23IgDCyclinD1bcl-6orCD10,淋巴瘤进一步分类,Bcl-2:仅区别反应性增生和滤泡性淋巴瘤诊断浆细胞瘤:LCAL26(-),CD79a(+/-),CD138(+),Oct-2(+),Bob.1(+),Ig(+),CD138(syndecan-1),CD138在浆细胞、浆母细胞和一些免疫母细胞的胞膜阳性表达用于诊断浆细胞瘤单独的CD138阳性不足以诊断浆细胞瘤，必须加LCA(CD45)等,CD138,LCA/CD45,淋巴瘤进一步分类,CD10CD10急性淋巴母细胞白血病标志,也表达于正常的生发中心B细胞和中心T细胞价值:滤泡中心细胞分化(滤泡性淋巴瘤、Burkitt淋巴瘤、一些大B细胞淋巴瘤)血管免疫母T细胞淋巴瘤,CD10,StronglypositivecellsareTcells,RFH,FL,淋巴瘤进一步分类,Bcl-6核阳性正常表达于滤泡中心B细胞、滤泡周围的CD30+细胞和少数T细胞以下淋巴瘤阳性:滤泡性淋巴瘤一些大B细胞淋巴瘤Burkitt淋巴瘤一些大细胞间变性淋巴瘤,Bcl-6,Bcl-6,淋巴瘤进一步分类,滤泡树突细胞标志(CD21,CD35,clusterin)助于诊断滤泡性淋巴瘤套细胞淋巴瘤(疏松散在网格)血管免疫母T细胞淋巴瘤大细胞间变性淋巴瘤CD30,ALK1,Mantlecelllymphoma:CD21,AngioimmunoblasticT-celllymphoma,Tonsil:Clusterin,Follicularlymphomawithdiffusecomponent:Clusterin,CD30,激活淋巴细胞标志淋巴结反应性增生时CD30+细胞增多必须是膜+/-高尔基区阳性、弥漫浆着色不应判定为阳性CD30经典的何杰金间变性大细胞淋巴瘤其他一些大细胞淋巴瘤,CD30,CD30,淋巴瘤进一步分类,Ki67:帮助诊断Burkitt淋巴瘤(100%)细胞毒性标志,e.g.TIA1,granzymeB,NK/T细胞性淋巴瘤、脂膜炎样T细胞淋巴瘤淋巴母细胞淋巴瘤:TdT,Burkittlymphoma,TIA-1,TdT(terminaldeoxynucleotidyltransferase),TdT(thymoma),TdT(tonsil),T-lymphoblasticlymphoma,淋巴瘤的分期和预后,套细胞淋巴瘤中，高Ki67index与预后不良有关ZAP-70表达是B-CLL预后不良的标志大细胞间变淋巴瘤:ALK+比ALK-预后要好,ALK1,原发系统性ALCL的总生存期(Falinietal,1999),0,5,10,Years,ALCL,t(2;5)orALK+,100%,50%,ALCL,t(2;5)orALK-,淋巴瘤的预后与分期,累及其他部位的淋巴瘤，如骨髓等，可以用一些标志检测出来ALK、CD30：大细胞间变淋巴瘤CyclinD1：套细胞淋巴瘤CD56：NK细胞淋巴瘤,ALK1,治疗靶标,治疗性抗体的靶标:anti-CD20(Rituximab，美洛华)anti-CD22anti-CD52淋巴瘤的治疗过程中，临床大夫会要求病理大夫染一些抗体标志治疗后的淋巴瘤细胞有时会失去抗原,e.g.CD20,小结:有用的分类标志,B系细胞CD20(可选:CD79a,PAX-5)T系细胞CD3(可选:CD45RO,CD2)NK系细胞CD56髓质细胞Myeloperoxidase滤泡中心细胞CD10(orbcl-6),小结:有用的分类标志,套区细胞IgD不成熟的前驱细胞T