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文档简介
2001级微生物学复习1、微生物2、微生物分类:非细胞型微生物:病毒,类病毒;朊粒原核细胞型微生物:广义细菌/真细菌:细菌、支、衣、立、螺、放。真核细胞型微生物:真菌、藻类及原虫。,第一部分:微生物生物学特性:胞型微生物:细菌第一节、细菌的形态与结构:细菌(bacteria)?广义细菌:所有原核细胞型微生物.狭义细菌:有细胞壁的单细胞原核细胞型微生物。本节指的是狭义的细菌。一、细菌的形态:球形、杆状(菌)和螺形状,细菌的形态检查:不染色活体观察动力。染色检查:革兰氏染色:结果:红色为G-菌,紫色为G+菌抗酸染色:抗酸菌和非抗酸菌,二、细菌的结构Essentialstructures基本结构cellwall细胞壁cellmembrane细胞膜Cytoplasm细胞质nuclearmaterial核质Particularstructures特殊结构capsule荚膜flagella鞭毛pili菌毛spore芽胞,G-菌:肽聚糖;:外膜脂蛋白:脂质双层:镶嵌蛋白(OMP):有的是微孔蛋白;有的是诱导酶;有的是受体。脂多糖(内毒素):脂质A核芯多糖特异多糖/O抗原,2、细胞壁的功能:保护作用;物质交换作用;维持细菌形态的作用;抗原作用。3、细胞壁缺陷菌L型细菌。(1)、定义、(2)、特点及意义、,(二)、细胞膜(cellmembrane):组成、作用:(物质转运;呼吸;细菌分裂;合成作用)。:,(三)、细胞浆作用:有丰富的酶系统,是细菌代谢的场所,生命的物质基础。重要结构:1、核糖体(ribosome):RNA和蛋白质。,2、质粒:Plasmid:定义?特点:1)体积小2)有复制性、传递性,而且是自主复制传代,控制某些性状。3)宿主范围:4)具有相容性、不相容性5)可以丢失意义。传递遗传物质;遗传工程的载体,(四)、细胞核(核质):作用控制细菌的遗传变异;鉴定细菌的作用。沙星类抗生素,异染颗粒,三)、细菌的特殊结构:荚膜;微荚膜;粘液层。作用:1、抗吞噬、与致病有关:2、抗干燥、抗有害物质保护细菌、3、黏附致病导管,医院内感染4、鉴定细菌作用,二)、鞭毛:鞭毛?成分、功能运动器官;鉴定细菌的作用。),三)菌毛:1、普通菌毛:可分为I-IV型。具有吸附致病作用。黏附具有组织特异性。2、性菌毛传递遗传物质,第二节、细菌的生理特点:细菌可在一定的条件下生长繁殖,各种不同的细菌有不同的生长现象和代谢产物,可作培养及生化反应鉴定细菌。常用鉴定细菌的生化反应:糖发酵、I、M、V、C、H2S试验等。,细菌的抵抗力消毒灭菌:定义方法:臭氧;高压灭菌;紫外线;辐射;漂白粉;过氧乙酸;戊二醛;甲醛、环氧乙烷;碘酒;碘伏、酒精、新洁尔灭。常见物品消毒:水、空气、排泄物、皮肤、手术器械、培养基等选用哪些物理、化学方法,,三)、细菌的遗传变异:细菌变异的表现细菌变异的物质基础:基因组细菌变异的机制:突变;修复错误;适应性缺失基因的转移重组:转化接合、转导、转换及融合,细菌的耐药性与控制策略:第一节、细菌的耐药性:一、细菌耐药性的分为:固有耐药性;获得性耐药性。,二、细菌耐药性的物质基础:1、染色体基因突变:2、R质粒的传递3、转座因子的介导:包括插入序列,转座子等。,第二节、细菌耐药性产生机制细菌耐药性可通过产生各种钝化酶;改变药物作用的靶部位;改变细胞壁的通透性;主动外排机制等四种方式形成。一、钝化酶的产生:1、-内酰胺酶水解酶:打开PNC和头胞类抗生素的-内酰胺环,使抗生素失活。可以是染色体基因,也可以是质粒编码的.,2、氨基糖苷类钝化酶此类药物为氨基糖和苷元结合而成药物:链、庆、卡、等。机制是耐药菌质粒产生的磷酸转移酶,使抗生素羧基磷酸化而失活,或耐药菌产生乙酰转移酶、腺苷转移酶,使抗生素氨基乙酰化和羧基腺苷酰化,结构改变而失去抗菌作用。,利福平是使RNA聚合酶亚基改变,药物不能结合到靶部位,而形成耐药性。青霉素靶部位是细菌细胞膜上的青霉素结合蛋白PBPs。PBPs具有酶活性,参与细胞壁的合成,其机制:是耐药菌使PBPs减少或构型改变,使青霉素结合减少,细胞壁继续合成,细菌继续繁殖,成为耐药菌。,喹诺酮:为人工合成的含4-喹诺酮类抗生素。其靶部位是DNA旋转酶,两个A亚基、两个B亚基组成的II型拓扑异构酶。由gyrA、gyrB基因编码。大肠杆菌可因gyrA基因突变,引起酶结构改变,阻止药物结合。物结合,。磺胺类耐药菌:改变二氢叶酸合成酶结构,使磺胺类抗生素失去集合的靶部位而耐药。,三、细胞壁透性改变和主动外排机制:1、细胞壁透性改变:G-菌细胞壁外膜孔蛋白,正常情况下有一定的大小,一定的数量,比如大肠杆菌OmpF、OmpC为1.16和1.08,含105个孔蛋白,但当细菌基因突变,或细菌天生的表达减少和消失。而形成耐药性。尤其是铜绿假单胞菌。,2、主动外排机制:铜绿假单胞菌存在有四环素、-N内酰胺类抗生素、喹诺酮外排系统。大肠杆菌质粒编码表达Tet四环素外排系统。甚至大肠杆菌和其它一些G-菌染色体上有多重耐药操纵子(mar),有的细菌染色体基因突变,使去阻遏,表现对多种抗生素的多重耐药。,四、抗菌药物使用与耐药性的关系:抗生素的使用与耐药性的形成无直接关系,抗生素仅选择作用和抑制杀灭敏感菌,促进耐药菌生长。第三节、细菌耐药性的控制策略:1、合理使用抗生素:加强监测和药敏试验,针对性用药。一种能行的不用多种;控制局部用药、预防用药、和不需要的联合用药。,2、严格消毒灭菌和隔离制度3、研制新型抗生素4、研制质粒清除剂5、抗菌药物轮休。,第三节、病毒Virus定义?是一类非细胞形态的微生物。特点:体积最小;结构简单,必须要在活细胞内寄生、以复制的方式繁殖;对抗生素不敏感,对干扰素敏感。,病毒及类病毒、阮病毒都必须依赖宿主细胞进行增殖因此从进化角度考虑甚至可以把病毒看作是宿主细胞基因的扩大或延伸。一般情况下,病毒的基因向宿主细胞提供信息病毒在细胞内复制,产生井释放大量的病毒拷贝。有些情况下,病毒的基因可整合人宿主。一、病毒的大小与形态:,二、病毒的结构与化学组成:病毒的结构有三部分:核酸;衣壳;包膜和刺突。,(一)病毒的核酸(Nucleicacid)构成病毒的基因组。核酸蕴藏着病毒遗传信息。核酸的功能:是主导病毒的生长繁殖即感染性;复制性;遗传变异性和分析鉴定病毒的作用。,蛋白质衣壳的功能是:(1)赋予病毒固有的形状;(2)保护内部核酸(3)衣壳蛋白质具有免疫原性,可刺激机体产生抗病毒免疫应答和鉴定病毒;(4)、介导吸附感染作用,(病毒表面蛋白与细胞表面相应受体有特殊的亲和力,是病毒选择性吸附感染宿主细胞的首要步骤)。,包膜和刺突的功能:1)、保护核衣壳2)、刺突有介导病毒的吸附感染作用,包膜有膜融合作用和致热作用。3)、有抗原作用Ab和CMI、有种、型特异性、可鉴定病毒。4)、包膜是病毒分类的依据5)、包膜对脂溶剂敏感。基质蛋白(内膜蛋白):,病毒的组成核酸与蛋白质一)、病毒的核酸分正和负链。二)、病毒的蛋白:蛋白是病毒的主要成分,分非结构抑制细胞生物合成的蛋白。转录酶,蛋白水解酶作为研究抗病毒药物靶部位,倍受观注。有的非结构蛋白具有,三、病毒的增殖周期:病毒复制的过程分为:吸附;穿入;脱壳;生物合成;装配释放五个步骤,又称复制周期(Replicationcycle)。,病毒装配释放的方式:(1)细胞裂解释放(2)出芽释放,(3)也可通过细胞间桥或细胞融合进入邻近的细胞。(4)、整合:致癌病毒的基因组与宿主细胞染色体整合,随细胞分裂而出现在子代细胞中,病毒的异常增殖:1、顿挫感染(Abortiveinfection):病毒进入宿主细胞后,细胞不能为病毒提供酶、能量、原料,病毒不能合成或不能装配释放出感染性病毒颗粒,称为顿挫感染(Abortiveinfection)。细胞称为非容纳细胞。,2、缺陷病毒:是一种基因组不完整不能独立复制出有感染性的病毒颗粒,须辅助病毒辅助才能生长繁殖,但可以干扰完整病毒的繁殖的病毒。五、病毒的干扰现象(Interference),1、干扰?两种病毒感染同一细胞时,同种不同型,同型不同株病毒自身干扰,一些病毒影响另一些种病毒生长繁殖称为干扰。常常是先进入的干扰后进入的;死的干扰活的;缺陷病毒干扰完整病毒。2、干扰的机制:1)、竟争干扰:竟争R;竟争同一底物。,四、病毒对理化因素的影响(一)物理因素1温度:大多数病毒(除肝炎病毒外)耐冷不耐热(多数病毒50-60C30分钟或100C几秒钟即灭活。病毒可以耐受-70140C。一般可用低温真空干燥法保存病毒,但在室温条件下干燥易使病毒灭活。2pH:病毒一般在pH5.09.0的环境是稳定的。,2)、改变代谢途径。3)、干扰素(IFN)3、干扰的意义:1)、阻止感染的发生、感染的扩散、中断感染和使疾病恢复。2)、预防接种活疫苗,可以诱导干扰素形成;预防接种时,要防止疫苗互相干扰。,对高锰酸钾、次氯酸盐等氧化剂都很敏感,升汞、酒精、强酸及强碱均能迅速杀灭病毒,饮水中漂白粉浓度对乙型肝炎,肠道病毒无效、但对过氧乙酸敏感。4、对抗生素、中草药:5、某些活性染料(如甲苯胺兰、中性红、丫啶橙)对病毒具有不同程度的渗透作用,这些染料与病毒核酸结合后,易被可见光灭活。,第三节、真菌Fungus:真菌Fungus?是一类真核细胞型微生物。,一、真菌的形态态结构:不管是单细胞还是多细胞真菌、均为真核细胞特征。而且细胞壁的组成与细菌不同:细菌细胞壁含肽聚糖、而真菌含的是微钎维(几丁质多糖,缺乏肽聚糖),所以不受PNC和头孢菌素的抑制。细胞膜含固醇。,形态:1、单细胞真菌:园形或椭原形。2、多细胞真菌有菌丝和孢子。,菌丝:营养菌丝、气中菌丝、生殖菌丝;有隔菌丝、无隔菌丝。菌丝有不同的形态。菌丝具有鉴定真菌的作用。孢子:种类、形态及意义分生孢子;叶壮孢子;孢子囊孢子,真菌的培养:培养基Sabourund(沙氏培养基/标准:糖+蛋白胨+琼脂需氧;高湿度低温:22-28C(浅部真菌);37C(深部真菌);菌落:酵母型;类酵母型;丝型,二、真菌的繁殖与培养:繁殖方式:芽生;裂殖;萌管;隔殖,三、变异性、抵抗力:真菌容易发生变异抵抗力强R:对干躁、日光、紫外线(30分钟杀死)、一般消毒剂抵抗力都强、对抗菌抗生素不敏感。S:不耐热、对石碳酸、碘酊、甲醛敏感;对抗真菌的抗生素敏感。,第2章思考题:1、什么叫细菌?(广义的、狭义的)2、细菌形态有哪几?细菌的形态有什么意义?如何进行形态检查?(包括活体检查;革兰氏染色检查;特殊结构染色检查;L-型细菌的检查)3、细菌具有哪些基本结构?各种结构有什么意义?4、G+菌与G-菌细胞壁结构组成及意义。5、细菌具有哪些特殊结构,各有什么特点及作用?6、芽胞与繁殖体是什么的关系?芽胞抵抗力强的原因有哪些?关键的因素是什么?7、什么叫L-型细菌?L-型细菌有什么特点和意义?,8、对人致病的细菌的生长繁殖需要些什么条件?9、细菌有哪些理化性状?各种现状有什么意义?10、细菌的代谢产物有什么作用意义?11、细菌以什么方式生长繁殖?鉴定细菌诊断疾病应培养在什么阶段为好?12、什么叫病毒?病毒有哪些特点?13、病毒的结构包括哪些?各种结构有什么作用意义?13、病毒的增殖周期包括哪些步骤?14、病毒在活细胞内增殖后,从病毒和宿主两方面来看,会产生
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