NG-MAST在淋球菌耐药监测工作中的应用 - 中国疾病预防控制中心 ...ppt课件

淋球菌耐药机制的初步研究以及多抗原测序分型（NG-MAST）在耐药监测工作中的应用,-中国CDC性病控制中心参比实验室陈绍椿,1,研究背景耐药机制的初步研究NG-MAST在淋球菌耐药监测工作中的应用研究,概要,2,高发病率，且在不断增长诊断、报病的不足导致发病率的低估严重危害健康：不孕不育，异位妊娠，增加HIV感染几率抗生素耐药！,淋病全球性公共卫生问题,WorldHealthOrganization(WHO).Globalincidenceandprevalenceofselectedcurablesexuallytransmittedinfections2008.Geneva,Switzerland;2012.,3,PenicillinsTetracyclinesQuinolones(Ciprofloxacin)Macrolides(Azithromycin)SpectinomycinCephalosporins(Ceftriaxone,cefixime),淋病的治疗药物,4,头孢菌素敏感性下降和临床治疗失败病例的出现,WorldHealthOrganization(WHO).Antimicrobialresistanceglobalreportonsurveillance.Geneva,Switzerland;2014.,5,口服类Cefixime治疗失败病例：Japan,1Norway,2UnitedKingdom,3Austria,4France,5Canada,6andSouthAfrica.7头孢曲松治疗淋菌性咽炎失败病例：Japan,8,9Australia,10-12Sweden,13andSlovenia14,治疗失败案例汇总,1.YokoiSetal.EmergInfectDis2007;13:1275-1277.2.UnemoMetal.EuroSurveill2010;15.3.IsonCAetal.EuroSurveill2011;16.4.UnemoMetal.EuroSurveill2011;16:pii=19998.5.UnemoMetal.AntimicrobialAgentsChemother2012;56:1273-1280.6.AllenVGetal.JAMA2013;309:163-170.7.LewisDAetal.JAntimicrobChemother2013;68:1267-1270.8.OhnishiMetal.EmergInfectDis2011;17:148-149.,9.OhnishiMetal.AntimicrobAgentsChemother2011;55:3538-3545.10.TapsallJetal.JMedMicrobiol2009;58:683-687.11.ChenMYetal.JAntimicrobChemother2013;68:1445-1447.12.ReadPJetal.SexHealth2013;10:460-462.13.UnemoMetal.July2010.EuroSurveill2011;16.14.UnemoMetal.EuroSurveill2012;17.15.CamaraJetal.JAntimicrobChemother2012;67:1858-1860.,6,超级淋球菌的出现,第一株高度耐头孢曲松的“超级淋球菌”H041：XDR,MLST7363,NG-MASTST4220咽部感染，1g头孢曲松治疗失败,MIC1-2mg/L在法国和西班牙也发现了对头孢菌素高度耐药的淋球菌MLST1901NG-MASTST1407,7,URGENT!,8,应对策略,9,1.深入了解耐药机制2.加强淋球菌耐药监测：（1）加强已有淋球菌耐药监测网络（2）分子流行病学方法应用于淋球菌耐药监测（3）淋球菌临床治疗失败病例的筛查,中国的应对策略,10,耐药机制的初步研究,11,UnemoM,NicholasRA.Emergenceofmultidrug-resistant,extensivelydrug-resistantanduntreatablegonorrhea.FutureMicrobiol2012;7:1401-1422.,淋球菌耐药的可能机制,12,头孢低敏耐药菌株（MIC0.25g/ml）的特征,表1.MIC0.25g/ml菌株相关基因特征,13,头孢低敏或耐药相关基因突变筛查,CROS,isolateswithsusceptibilitytoceftriaxone;CROI/R,isolateswithdecreasedsusceptibilityorresistancetoceftriaxone;A,alanine;WT,wild-type;T,threonine;V,valine;G,glycine;S,serine;P,proline;L,leucine;D,asparticacid;I,isoleucine;H,histidine;Y,tyrosine;K,lysine;N,asparagine;*P0.05fort-test(comparisonbetweentwogroups),ANOVA(comparisonamongthreeormoregroups)orchi-squaretest.,表2.所有菌株根据不同基因突变分组后MIC均值比较及低敏耐药与特定基因相关性研究,14,NG-MAST在淋球菌耐药监测工作中的应用,15,1、追踪特定菌株的传播（如耐药菌株）2、追踪特定人群中菌株的传播（如MSM人群)3、监测菌株的爆发流行4、确定治疗失败病例和重复感染病例,NG-MAST分型的意义,16,一、分型表现：1、区分度2、结果可比性二、操作的可行性：1、耗时2、费用3、操作难易程度：硬件+软件,NG-MAST分型的优点,17,NG-MAST分型过程,临床分离株,DNA提取,porB基因PCR,porB基因测序,根据标准序列选取490bp,NG-MAST网站获取等位基因号,tbpB基因PCR,tbpB基因测序,根据标准序列选取390bp,NG-MAST网站获取等位基因号,获取ST型别,18,MIC值与NG-MAST型别的对应关系,19,表3.某监测点不同MIC值菌株的NG-MAST型别分布,19,全国不同监测点2012年度NG-MAST型别分布,表4.全国不同监测点NG-MAST优势型别分布,20,porB-908,tbpB-110:ST1407同一监测点两例，都为男性涂片阳性，培养阳性具有MosaicpenA结构，penAA501-WT,G542-WT头孢曲松MIC-0.016,MIC-0.060，PPNG，环丙沙星耐药，大观霉素敏感,ST1407菌株的发现,21,总结,1.淋球菌头孢低敏耐药菌株出现，需要进行跟踪监测。2.头孢低敏耐药与以下氨基酸替换有关：A102Dalter