柑桔黄龙病监测方法.doc

柑桔黄龙病监测方法(试行)为规范柑桔黄龙病疫情监测工作，及时掌握疫情发生、发展动态，特制定本办法。本办法规定了柑桔黄龙病菌监测区域、监测布点、监测时期、监测方法等要求。本办法适用于我省各地柑桔黄龙病的监测。1 监测准备收集当地柑桔、金柑属和枳属植物等芸香科植物的种植情况，柑桔黄龙病菌发生历史和现状等有关资料；制定简便易行的柑桔黄龙病菌监测计划。2 监测区域 2.1 未发生区重点监测疫情发生高风险区域，如：从疫情发生区调入柑桔属、金柑属和枳属等芸香科植物的种苗及产品的地区，境外柑桔属、金柑属和枳属植物引种种植区，柑桔属、金柑属和枳属等芸香科植物种苗繁育基地等高风险区域。主要监测是否传入柑桔黄龙病菌。2.2 发生区重点监测发生疫情的有代表性地块和发生边缘区。主要监测多年种植柑桔属、金柑属和枳属植物等植物，并有柑桔黄龙病发生历史的地块。监测柑桔黄龙病的发生动态和扩散趋势。3 监测作物 重点监测柑桔属、金柑属、枳属等芸香科植物。4 监测工具剪刀、取样袋、手套、鞋套、小镊子、荧光记录笔、标签纸、记录表、消毒液等。5 监测时期在柑桔属、金柑属和枳属类等苗或成年树春、夏、秋梢转绿后各调查1次，调查时间一般为5月上旬至11月中下旬，各地可根据当地的气候和柑桔属、金柑属和枳属作物的生育期确定具体的调查时间。6 监测方法6.1未发生区6.1.1 访问调查向柑桔属、金柑属和枳属类的种苗育苗场和采穗圃、经销商、农技人员等相关人员询问有关柑桔黄龙病情况，初步了解疫情可能发生地点、时间、危害情况。对询问过程发现的柑桔黄龙病可疑性地区，进行深入重点调查，访问结果填写柑桔黄龙病田间调查记录表（附表1）。6.1.2踏查在柑桔属、金柑属和枳属果树苗期和田间生长期进行踏查2-3次，代表面积占种植面积的50%以上。6.1.3定点调查在访问调查和踏查基础上，发现可疑疫情进行定点调查。采用5点取样法，每点随机调查10株，统计发病株率。6.2 发生区6.2.1 发生区范围监测 采取访问调查和踏查方法（具体方法见6.1.1和6.1.2），发现可疑疫情进行定点调查，结果记入附表1。6.2.2 发生区发生动态监测采取定点调查法（具体方法6.1.3）。每县选5个调查点，每30天调查1次，整个生育期调查3次，每点10亩，10亩内采取五点取样，每样点随机调查10株，统计病株率，填写柑桔黄龙病田间调查监测记录表（附表2）7 疫情诊断7.1现场诊断主要检查新梢叶片，花期和果实。新梢叶片不能转绿，叶片均匀黄化，或新梢叶片转绿后，从主、侧脉附近和叶片基部及边缘褪绿形成黄绿相间的斑驳状黄化，病株开花早而多，落的多，果实小畸形，坚硬，着色不均匀，近果蒂部分橙红色，其余部分青绿色，果汁少，渣多，味酸，成熟期后仍不着色的“青果”，或着色不均匀的“斑驳果”。7.2室内鉴定经现场检验检测，不能确定为柑桔黄龙病的，取样带回实验室进行检测鉴定。8 监测记录详细记录、汇总监测区内各调查点结果。监测结果记入附表2。并将原始记录表连同照片、影像等其它资料妥善保存于县级植物检疫机构。9 监测报告县级植物检疫机构对监测结果进行整理汇总形成监测报告，并按要求逐级报送上级植物检疫机构。附录：柑桔黄龙病病原、症状及防治措施等1 病原特征病原为Liberobacter asiaticum，属原核生物(prokaryote)，目前还未能人工培养。菌体多数呈圆形、椭圆形或线形，少数呈不规则形，大小506001701600nm，菌体的外部界限是膜质结构，厚约1733nm，平均25nm，由三层膜组成，壁膜结构与革兰氏阴性细菌的细胞壁膜构造相似。柑桔黄龙病病原分为3个种，即亚洲种(Liberobacter asiaticum)、非洲种（Liberobacter africanum）和美洲种（Liberobacter amenicum）。亚洲种引起柑桔黄龙病，非洲种引起柑桔青果病。黄龙病主要发生在亚洲和非洲的40多个国家，是柑桔上毁灭性病害。广东省汕头地区最早发生。在我国，本病主要在南部和西南部各省柑桔产区蔓延为害，摧毁了大量的柑桔园，二十世纪30年代以后逐渐严重，在广东、广西、福建、海南、台湾的柑桔产区广泛蔓延，80年代以后，随着柑桔生产的大发展，黄龙病在老病区病情加重，新病区不断扩大，至今在江西、浙江、四川、云南、贵州和湖南等省的部分产区均证实有黄龙病发生。2 为害症状柑桔树各生长期均感病， 46年生开始结果的树发病较多，苗期或十几年以上的成年树发病较少。该病全年均可发生，以夏梢、秋梢发病最多，其次是春梢。春梢发病时，当年新抽春梢能正常转绿，5月份以后部分叶片主脉、侧脉附近黄化，叶肉逐渐褪绿变黄，形成黄绿相间的驳斑，叶质硬化。夏梢或秋梢多在8月至10月间发病。新抽夏梢或秋梢中有一、二个梢的叶片尚未完全转绿时，则停止转绿。叶片在老熟过程中叶脉变黄，叶肉由淡黄色均匀黄化，叶质变硬。而有的叶片转绿后变黄，出现黄绿相间的斑驳。当年发病的黄梢，秋末叶片陆继脱落。第二年抽出的春梢，叶片明显变长、变小，变硬。叶肉变黄，叶片表现为缺锌、缺锰的症状，因此，黄龙病后期叶片症状与缺素症不容易区别。病树开花早而多，但花细小，畸形，所结果实小，畸形，着色不均匀，近果蒂部分橙红色，其余部分春绿色，称为”红鼻果”，果汁少，渣多，很酸。3 寄主范围主要危害芸香科的柑桔属、金柑属和枳属三个属的植物。其中蕉柑、甜橙、年桔较感病，酸桔、柠檬较耐病，柚子也有黄龙病。用菟丝子能将此病菌传到长春花和夹竹桃植株上，引起典型的黄龙病症状，表明这两种植物也是黄龙原寄主。4 传播途径远距离传播主要通过带病的接穗和苗木，而果园近距离传病则是带菌的柑桔木虱(Diaphorina citri)。木虱的成虫和高龄若虫(45龄)都会传病，病原体在木虱成虫体内的循回期长短不一，短的为3天或少于3天，长的为2627天。高龄若虫或成虫一旦获得病原体后，能终生传病。此病除由木虱传播外，也可通过嫁接传病，在实验室内，可通过菟丝子传到草本寄主长春花上，但是不能由汁液摩擦和土壤传病。5 生物学特性柑桔黄龙病亚洲种，属于耐热型，最适宜温度2832，症状表现明显，病害在高温地区流行，传播虫媒为柑桔木虱，主要分布于亚洲高温干燥地区。我国的柑桔黄龙病属于亚洲种。非洲种引起柑桔青果病，属于热敏感型，最适宜温度2024，症状表现明显，病害在冷凉地区流行，传病虫媒为非洲木虱，主要分布于非洲适温高湿地区；毛里球斯岛上，既有亚洲种，也有非洲种存在。6 防控措施（1）严格实行检疫 保护无病区和新区，严格执行植物检疫制度，禁止病区的接穗和苗木进入新区和无病区。疫区采取封锁措施，尽快予以扑灭。（2）建立无病苗圃，培育无病苗木 无病苗圃应选择在无柑桔木虱发生的无病区，并尽可能远离病柑桔园，至少相距5公里以上，具有良好的隔离条件，最好有高山大海等自然屏障。 砧木种子用5052热水预浸5分钟，再用5556温汤处理50分钟，然后播种育苗。 无病接穗的采集及处理 从优良品种的健康老树上采种，经5556热水处理后隔离种植，培育无病的实生树采穗。 在非病区或病区中隔离的无病老果园中，严格选择无病树作母树采穗，接穗用1000单位盐酸土霉素或四环素浸泡2小时；接穗也可用湿热空气4749处理50分钟。茎尖嫁接脱除病原是获得无病接穗和培育无病苗木的好方法，比前述方法更为优越。因为前者只能脱除黄龙病病原体，而茎尖嫁接既能脱除黄龙病病原体，又能脱除衰退病病毒和裂皮病类病毒。（3）挖除病株及防治媒介昆虫在病区及时控除病树，集中烧毁，以消除传染源，并适时喷药防治传病的柑桔木虱。铲除果园附近木虱的寄主和越冬场所，主要是果园附近的芸香科植物，消灭传染中心和虫媒是防治黄龙病发生流行的关键措施之一，因此，疫区要抓好两个时期：一是每年春芽萌动前，可结合冬季清园，加喷杀虫剂防除；二是每次新梢抽发期，视虫口密度情况，连喷12次杀虫剂防治。10%吡虫啉可湿性粉剂、20%扑虱灵可湿性粉剂、40%氧化乐果等对柑桔木虱的成虫、若虫都有很好的防治效果。对于初发病和发病较轻的柑桔园内病株，一经发现应立即整株挖除；发病较重的柑桔园，重病树应全面铲除，同时要喷洒杀虫剂，防治传病虫煤。（4）加强栽培管理通过柑桔园内管理，如水肥管理，合理施N、P、K，增强树势，以提高抗病力，并创造园中小气候，不利于柑桔木虱的发生、繁殖和传播，而有利于柑桔树的健壮生长，可以减轻黄龙病的发生和危害。有条件的果园，四周可以栽植防护林，以减少日照和保持果园有较高的湿度，这对媒介昆虫的迁飞有阻碍作用。柑桔黄龙病症状附表1：柑桔黄龙病田间调查记录表调查地点： 省 市 县 乡(镇)调查日期： 年 月 日