药物检验工-10容量分析法

单元七药物含量测定技术,一、容量分析法Capacityanalysis（又称滴定分析法Titrationanalysis）1、概念：将一种已知准确浓度的试剂溶液（滴定液）准确地滴加到待测物质的溶液中，根据所消耗的溶液体积和浓度，计算待测物质的含量。2、特点：仪器简单、操作简便、快速、结果较准确等。,3、术语（1）滴定度（Titer，T）每1ml理论浓度（摩尔浓度）的滴定液相当于被测药物的质量。Thetitrationliquidper1mlofthetheoreticalconcentration(molarconcentration)correspondstothemassofthetestdrug.,T是根据滴定液中的溶质与被测物质之间的反应式求得的。如：阿司匹林含量测定中，每1ml氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）相当于18.02mg的C9H8O。,1ml0.1mol/L,0.110-3mol,（2）浓度校正因子（Concentrationcorrectionfactor，F）实际的滴定度（Theactualtiter，）,（2）稀释度（N）为增加测定结果的准确性，有时候含量测定时称取被测物质后，要经过一步或几步稀释再用于最后测定，稀释的倍数称为稀释度。,4、含量计算原料药a.不需做空白试验时b.需做空白试验校正时,为空白消耗滴定液的体积,为供试品取样量,为供试品消耗滴定液的体积,4、含量计算原料药a.不需做空白试验时：b.需做空白试验校正时：,为供试品取样量为供试品消耗滴定液的体积为空白消耗滴定液的体积,制剂preparationa.固体制剂（如：tablet）,b.注射剂injection,5、滴定液的管理Managementoftitrant,（1）配制（2）标定（3）贮藏及使用均应符合药典规定或按照药典的方法进行配制。,（一）酸碱滴定法Acid-basetitration,1、基本原理2、一般方法（1）直接滴定法Directtitration例：水杨酸原料药的含量测定,（2）间接滴定法Indirecttitration例：阿司匹林肠溶片的含量测定（二步滴定法）第一步：碱中和（定量NaOH）第二步：水解、测定（水解后剩余滴定）定、过量NaOH,中性乙醇Neutralethanol：对酚酞显中性,空白实验：用同体积溶剂代替药品溶液,3、指示剂IndicatorpH变色范围：甲基红4.46.2中性红6.88.0酚酞8.310.0百里酚酞8.09.6石蕊5.88.0甲基橙3.14.44、注意事项（P126）,（二）非水溶液滴定法Non-aqueoustitration,定义：在非水溶剂中进行的、以质子传递反应为基础的测定方法。非水溶剂的作用：增强药物的溶解能力；增强药物的酸碱性。分类：非水碱量法Non-aqueousalkalimethod；非水酸量法Non-aqueousacidmethod,非水碱量法,（1）原理：强酸置换弱酸,（2）方法method常用溶剂：冰醋酸、醋酐常用滴定剂：HClO4冰醋酸溶液常用指示剂：结晶紫冰醋酸溶液或电位法终点颜色：蓝色蓝绿色,无机酸类在醋酸中的酸性依次为：AcidicSequencesofInorganicAcidsinAceticAcid：HClO4HBrHClH2SO4HSO4HNO3其它弱酸,（3）干扰排除,测定氢卤酸（HA）盐，因释放出酸性相当强的氢卤酸，影响滴定终点，排除方法是加一定量的HgAc的HAc溶液。测定硝酸盐，释放出的HNO3可氧化破坏指示剂，妨碍终点观察，可改用电位法指示终点。测定有机酸或磷酸盐时，因其酸性较弱，对滴定无妨碍。测定硫酸盐时，硫酸在醋酸中显一元酸，根据分子中氮原子的碱性强弱，来确定滴定终点。,（三）亚硝酸钠滴定法Sodiumnitritetitrationmethod,1、原理具有芳伯氨基的药物，可在酸性条件下可与NaNO2反应生成重氮盐，根据消耗NaNO2的量，可以计算出药品的含量。,对于具有潜在芳伯氨基的药物，如芳酰氨基、硝基等，可先进行水解或还原，得到芳伯氨基后，再进行测定。Forthepotentialaromaticaminoaminodrugs,suchasaramid,nitro,etc.,canbethefirsthydrolysisorreductiontoobtainaromaticprimaryamino,thenthedetermination.,2操作中的主要条件,由于重氮化反应属于是分子间反应，反应速度比较慢，并且，采用的滴定液NaNO2以及反应生成的重氮盐都不稳定，所以，重氮化反应的速度受许多因素的影响。a反应速度与药物结构的关系：碱性弱反应速度快,首先,然后,b反应速度与酸及酸度的关系,酸的种类重氮化反应在HBr、HCl、H2SO4中反应速度是：HBrHClH2SO4平衡常数K1比K2大300倍。HBr价格很贵，用盐酸来代替，为加快反应速度，需要加入KBr（催化剂）。产生的HBr与HNO2反应，可产生大量的NOBr，所以可以加快反应速度。,酸的数量,盐酸的用量从理论上说是1mol的芳胺2mol的盐酸但实际上：芳胺盐酸12.56mol原因是：在强酸性溶液中可加速反应的进行重氮盐在酸性下稳定在酸性下可避免副反应的发生。如果盐酸的浓度太大，反到会使游离芳伯氨的量减小（成盐）。,c反应速度与滴定时温度的关系,温度过高：每升高10时，重氮化反应增加2.5倍，重氮盐分解速度增加2倍。低温下进行确定在室温下进行滴定（1030）,d滴定速度（太慢，HNO2挥发、分解）,滴定管尖端插入液面下约2/3处，一次将大部分NaNO2滴定液在搅拌条件下迅速加入。滴定管提出液面，用水冲洗后再继续滴定至终点。到达终点时，一滴加入后，搅拌15min。,e、指示终点的方法,永停法电位法外指示剂法内指示剂法我国药典主要采用永停滴定法指示终点。,永停法Permanentstoptitration,在被测溶液中插入两个相同的铂电极，在两个电极间加50mV电压，并且在回路中串联一个灵敏的检流计（10A9/格）。当用NaNO2滴定时，由于在终点前回路中没有电流，所以电流计的指针指零，或指针偏转后立刻又返回到零点。,当到达滴定终点时，由于溶液中有微过量的NaNO2，使得在两个电极上发生氧化还原反应。阳极anode：阴极cathode：在两电极间有电子的流动，从而回路中有电流产生，使得电流计指针发生偏转并且不再返回零点。永停滴定法就是利用这一现象指示终点。,盐酸普鲁卡因注射液的含量测定,取盐酸普鲁卡因注射液3支，加水40ml与盐酸溶液（12）15ml，然后置电磁搅拌器上，搅拌，再加溴化钾2g，插入铂电极后在1520用亚硝酸钠滴定液（0.102mol/L）迅速滴定，滴定时将滴定管尖端插入2/3处，边滴边搅拌至近终点时，将滴定管尖端提出液面，用少量水冲洗滴定管尖端，洗液并入溶液中，继续缓缓滴定，至电流计指针突然偏转，并不再回复。即为滴定终点，每1mol亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）相当于27.28mg的C13H20N2O2HCl。,（四）碘量法Iodometricmethod,1、基本原理Fundamental2、一般方法（1）直接滴定法凡能被碘直接氧化的药物，均可用直接滴定法。,（2）间接滴定法Indirecttitration,剩余滴定法Residualtitration凡需在过量的碘液中和碘定量反应，剩余的碘用硫代硫酸钠回滴，都可用剩余滴定法。置换滴定法Replacementtitration凡被测药物能直接或间接定量地将碘化钾氧化成碘，用硫代硫酸钠液滴定生成的碘，均可间接测出其含量。,（五）配位滴定法Coordinationtitration,它是以配位反应为基础的一种滴定分析法。可用于对金属离子进行测定。Coordinationtitrationisbasedoncoordinationreactiontitrationanalysismethod.Canbeusedformetaliondetermination.,若采用EDTA（乙二胺四乙酸二钠）作配位剂测定金属原子，其反应可表示为：Mn+Y4-=MYn-4,式中Mn+表示金属离子，Y4-表示EDTA的阴离子。,一般用金属指示剂指示终点。金属指示剂是指配位滴定中，能与金属离子生成有色配合物从而指示滴定过程中金属离子浓度变化的显色剂（多为有机染料、弱酸）。,36,变色实质：EDTA置换少量与指示剂配位的金属离子释放指示剂，从而引起溶液颜色的改变,注:In为有机弱酸，颜色随pH值而变化注意控制溶液的pH值EDTA与无色M无色配合物，与有色M颜色更深配合物,滴定前:M+InMIn显配合物颜色滴定过程:M+YMY终点:MIn+YMY+In（置换）显游离指示剂颜色,金属指示剂的作用原理：,37,常用金属指示剂Commonlyusedmetalindicator,一、原料药的含量测定1、精密称得乙酰半胱氨酸供试品W=0.3001g，加水30mL溶解后，精密量取25ml于锥形瓶，在2025消耗13.91ml碘滴定液（0.0534mol/L）迅速滴定至溶液显微黄色，并在30秒钟内不褪。每1mL碘滴定液（0.05mol/L）相当于16.32mg的C5H9NO3S。计算乙酰半胱氨酸的含量。,2、制剂标示量百分含量计算（1）片剂取牛磺酸片（规格：0.4g/片）供试品10片，精密称定，总重5.9988g，研细，精密称取适量（约相当于牛磺酸0.2g)，W=0.2042g，加水25mL，用氢氧化钠滴定液（0.1014mol/L)调节pH值至7.0，然后加入预先调节pH值至9.0的甲醛溶液15mL，摇匀，再用氢氧化钠滴定液（0.1014mol/L)滴定至pH值至9.0，并持续30分钟，以加入甲醛溶液后所消耗的氢氧化钠滴定液（0.1mol/L)的量为14.55ml。每1mL氢氧化钠滴定液（0.1mol/L)相当于12.51mg的C2H7NO3S。平均片重=0.5988g,（2）注射剂取本品5支（1g:10ml）硫酸镁注射液，混匀，精密量取5ml，置50ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取25ml，加氨氯化铵缓冲液（pH10.0）10ml与铬黑T指示剂少许，用乙二胺四醋酸二钠滴定液（0.04998mol/L）滴定至溶液由紫红色转变为纯蓝色，消耗了20.48ml，每1ml乙二胺四醋酸二钠滴定液（0.05mol/L）相当于12.32mg的硫酸镁。求其百分标示量。,原料药剩余滴定法精密称得干燥至恒重的二巯丁二钠供试品W=0.1024g，置100mL量瓶中，加水30mL溶解后，加稀硫酸2mL，精密加入硝酸银滴定液（0.1014mol/L)50mL，强力振摇，置水浴中加热23分钟，放冷，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液50mL，置具塞锥形瓶中，加硝酸2mL与硫酸铁铵指示液2mL，用硫氰酸铵滴定液（0.1mol/L)滴定，消耗14.23ml，并将滴定结果用空白试验校正，消耗22.56ml，每1m