抗心磷脂抗体阳性产妇胎盘的病理观察.doc

抗心磷脂抗体阳性产妇胎盘的病理观察中华妇产科杂志 1998年第2期第33卷 论著作者：黄曙光吴桂芳王兆平程宁范燕燕 唐敏红孙达成张璐红单位：213003 江苏省常州市妇产医院病理科(黄曙光，张璐红)，实验室(吴桂芳，程宁，唐敏红，孙达成)，产科(王兆平，范燕燕)关键词：抗体；抗磷脂；妊娠结局；胎盘；荧光免疫技术【摘要】目的探讨抗心磷脂抗体(anticardiolipin antibody, ACA)阳性产妇与不良妊娠的关系。方法选ACA阳性产妇胎盘16例(不良妊娠及正常妊娠结果各8例)为研究组。ACA阴性产妇胎盘8例为对照组。用免疫荧光法标记。结果免疫荧光显示研究组胎盘的滋养细胞胞浆和绒毛血管壁出现免疫复合物沉积。IgA表现为线条状，IgG、IgM、C3和C4表现为线条状，颗粒状和块状。对照组免疫球蛋白均呈阴性反应，C4呈小灶性阳性反应。同期分娩的IUGR病例中，ACA阳性发生率为19.30%(22/114)；ACA阳性产妇中IUGR发生率为15.28%(22/144)。IUGR合并重度妊高征3例，早产2例。5例新生儿血清ACA IgG阳性。结论ACA阳性产妇的不良妊娠后果与自身免疫系统功能异常有关。胎盘部位的免疫性损伤可影响胎盘功能。 Immuno-Pathomorphological Study of Placenta with Anticardiophospholipid Antibody PositiveHuang Shuguang, Wu Guifang, Wang Zhaoping, et al. Changzhou Obstetrics and Gynecology Hospital, Changzhou 213003【Abstract】ObjectiveTo investigate the relationship between the anticardiophospholipid antibody (ACA)-positive cases and the poor pregnancy outcomes by observing the immuno-pathomorphology of the placenta.Methods 16 cases of ACA-positive placenta (8 normal and 8 poor pregnancy outcomes) were collected as the studied group, and 8 cases of ACA-negative placentas served as the controlled group, and immunofluorescence technique (IFT) was used.Results In the studied group, the deposits of immuno-complex were found in the cytoplasm of trophoblast and on the walls of villous blood vessels. IgA manifested as filiform, and IgG, IgM, C3 and C4 appeared as filiform, granular and tubercular as well. In contrast, all the immuno globulins displayed negative reaction in the controlled group, and C4 demonstrated some small focal positive reaction. The frequency of ACA-positive in IUGR cases were 19.30% (22/144), and of the IUGR in all the ACA-positive pregnant women was 15.28%(22/144). There were 3 cases of IUGR complicated by severe pregnancy induced hypertension, 2 cases of prematurity and 5 newborns with serum ACA IgG positive.Conclusion The poor pregnancy outcome in ACA-positive women is related to the dysfunction of autoimmuno-system, and ACA-positive may be one of the causes of IUGR. The immuno-injury occurred in the placenta may affect the normal function of placenta. Maternal antibody may be transmitted to the fetus, and its significance needs further study.【Key words】Antibodies, antiphospholipidPregnancy outcomePlacentaFluorescence antibody technique近年来的研究证实，抗磷脂抗体与反复流产、死胎、早产、妊高征及IUGR等不良妊娠后果有关1。本研究应用免疫荧光法对抗心磷脂抗体(anticardiolipin antibody, ACA)阳性产妇的胎盘进行免疫标记，以了解免疫复合物对胎盘相应部位的免疫损伤以及可能引起的不良后果。资料与方法一、研究对象1995年5月1996年10月，对在本院作围产期检查的孕妇作ACA检查筛选共5 330例，ACA阳性144例。胎盘免疫荧光检查24例；16例ACA阳性产妇胎盘为研究组，其中8例合并IUGR，8例新生儿体重正常。另设8例ACA阴性产妇胎盘为对照组。二、方法胎盘娩出5分钟内于中央部取1.5 cm2组织，行冰冻切片，厚3 m，每例备片5张。白片丙酮内固定10分钟，自然干燥后分别滴加免疫球蛋白荧光抗体和补体。工作浓度IgA 150，IgG 140，IgM，C3和C4均为14。置37恒温箱45分钟取出，PBS冲洗3次。荧光显微镜下观察并作显微摄影。每组设阳性对照片及阴性对照片。阳性判断：荧光强度(+)、(+)、(+)为阳性反应。低于(+)或无荧光着色为阴性反应。IgA、IgG抗体由DAKO公司提供，IgM、C3和C4由上海第二医科大学附属瑞金医院提供。结果一、免疫荧光显微镜观察研究组16例胎盘组织均出现免疫球蛋白荧光抗体和补体阳性着色，大部分为(+)(+)的强阳性反应。阳性反应位于绒毛滋养细胞胞浆和绒毛血管壁(图14)。IgA阳性呈线条状表现。IgG、IgM、C3和C4呈线条状、颗粒状和块状表现。有1例IgA抗体为阴性反应。ACA阳性合并IUGR和新生儿正常体重两组中，其阳性反应强度和反应部位无明显差异。对照组8例免疫球蛋白均为阴性反应，C4呈小灶性阳性反应。二、临床资料同期分娩总数中IUGR 114例，其中ACA阳性22例，IUGR中的ACA阳性发生率19.30%(22/114)。同期围产检查中共检出ACA阳性144例，ACA阳性产妇中IUGR发生率15.28%(22/144)。IUGR合并重度妊高征3例，早产2例。144例ACA阳性产妇的新生儿中有5例血清ACA IgG阳性。讨论一、不良妊娠的免疫因素ACA与自身免疫性疾病的关系，目前已越来越多地被人们关注。从生殖免疫学观点来看，妊娠过程就代表着机体一种特殊的免疫状态。正常妊娠时，这种状态有一系列免疫隔绝与免疫逃逸机制来保护。母体血清中ACA阳性时，反映了母体存在免疫功能缺陷。当妊娠开始时，就可能同时伴随着不良妊娠过程的开始。本研究中观察到母体血清ACA阳性胎盘的滋养细胞胞浆和绒毛血管壁有免疫复合物沉积，部分血管壁的强阳性物质堆聚，向管腔突出，使管腔狭小。免疫复合物沉积通过激活补体，引起多核白细胞聚集，释放蛋白水解酶和炎性介质，使细胞增生及细胞坏死，尚可使肥大细胞脱颗粒，释放药理活性物质，引起毛细血管通透性增强，平滑肌收缩。C3激活还最终导致膜攻击复合物的形成，通过细胞溶解作用损伤内皮细胞2。因此认为，由于免疫因素的参与可以造成胎盘组织和功能改变，从而导致不良妊娠的发生。狄文等3采用免疫组化法对系统性红斑狼疮(SLE)孕妇儿的胎盘的研究发现，绒毛血管处有IgG、IgM、IgA、C3沉积。在扫描电镜中发现绒毛表面有多个针尖样小孔，认为可能是SLE免疫复合物对绒毛损伤的残迹。我们推测，ACA阳性胎盘的免疫复合物沉积与已明确为自身免疫性疾病的SLE合并妊娠时的胎盘病理改变，在性质上是一致的。我们有理由认为，ACA阳性合并IUGR、妊高征、早产等不良妊娠与产妇自身免疫系统功能异常有密切关系。本资料分析发现，ACA阳性伴有不良妊娠结局的病例中，最多见的是IUGR。ACA阳性合并IUGR约占同期分娩总数中IUGR的1/5(19.30%，22/114)，而合并妊高征及早产较少见。有报道，IUGR中有30%40%病因不明4。由于ACA在妊娠过程中的不良免疫影响，因此我们提出，ACA可能是IUGR的病因之一。在不明原因IUGR的诊治中，应考虑免疫因素的原因。其次ACA阳性产妇中的IUGR发生率为15.28%(22/144)，虽然胎盘免疫荧光标记为阳性结果，但大部分新生儿体重正常。我们推测，是否与母亲的血清抗体含量及胎盘免疫损伤的面积和程度有关，类似于乙肝病毒阳性者但肝功能可为正常这一现象。二、关于胎盘免疫学的分型在对肾炎的免疫学分型中，免疫复合物型肾炎的免疫荧光特点是沿肾小球基底膜(GBM)有粗颗粒或团块状沉积。抗肾小球基底膜型(抗GBM)肾炎的免疫荧光显示，沿GBM有连续线形沉淀或光滑带状沉淀。免疫电镜证明二者在相关部位均有电子致密物存在。我们观察到，在滋养细胞胞浆和绒毛血管壁上均可见到免疫球蛋白和补体的颗粒状、块状、线条状形态，推测在ACA阳性产妇的胎盘上可能同时存在免疫复合物型和抗基底膜型的免疫病理变化。有报道认为，人类患免疫复合物型肾炎后转化为抗GBM型肾炎的机理可能是，GBM的自身抗原物质引起的抗GBM及对肾小球损伤的后果5。肾脏的免疫学分型能指导临床治疗及判断预后，但胎盘的免疫学分型是否对妊娠结果及分娩后的临床指导有意义尚未见有关报道。Starostina等6证实，妊高征产妇肾脏及胎盘等处都有免疫复合物存在。提示胎盘和肾脏具有共同抗原，可引起类似的免疫损伤。因此，妊高征产妇分娩后仍应在免疫系统监护下随访，观察肾组织和肾功能的变化。三、新生儿ACA阳性的意义据文献报道，不少自身免疫疾病具有家族性而影响后代7。但有关母胎传播的研究不多。本研究144例ACA阳性产妇的新生儿中，有5例血清ACA IgA呈阳性反应。目前所知，IgG是唯一能通过胎盘进入胎儿体内的免疫球蛋白。在ACA与妊娠的研究中，尚未见新生儿携带ACA的报道。新生儿自身抗体阳性时，对今后的生长发育是否有不良影响，是否可导致自身免疫性疾病，值得研究。(本文图14见插页第3页)参考文献1De-Carolis, Caruso A, Ferrazzani S, et al. Poor pregnancy outcome and anticardiolipin antibodies. Fetal Diagn Ther, 1994, 9:296-299.2马宝骊，肖祥熊主编.医学免疫学.武汉：同济大学出版社.1987.68-77.3狄文，洪素英，严隽鸿，等.妊娠合并系统性红斑狼疮的胎盘病理研究.中华妇产科杂志，1994，29：708-710.4戴钟英.胎儿宫内生长迟缓的分类、病因及处理要点.实用妇产科杂志，1991，7：226-220.5杨贵贞主编.医用免疫学.长春：吉林人民出版社，1980.180-189.6Starostina TA