【毕业学位论文】（Word原稿）生物素对肉仔鸡生理生化特性与免疫功能的影响及其机理研究动物营养与饲料科学博士论文

1 密级： 论文编号： 中国农业科学院 博士学位论文 生物素对肉仔鸡生理生化特性与免疫功能 的影响及其机理研究 on 2 on y I 摘 要 本论文通过七个试验系统研究了生物素对肉仔鸡生长性能、血清生理生化指标 、肝脏丙酮酸羧化酶活性、组织脂肪酸沉积、肠道微生物菌群和免疫功能的影响，并采用分子生物学方法对生物素的免疫机理进行了深入研究和探讨。 试验一： 研究了玉米 探讨了生物素的适宜添加水平。将 960 只 1 日龄 仔鸡随机分成 6 个处理，每个处理 10 个重复，每个重复 16 只鸡（公母各半）；在玉米 .1 mg/.2 mg/0.3 mg/0.4 mg/ 0.5 mg/ 5 个水平的生物素，包括对照 组总计 6 种日粮处理。试验结果表明：在玉米 均日采食量和饲料转化效率影响都不显著（ P但添加生物素提高了肝脏丙酮酸羧化酶的活性，其中 0.3 mg/.4 mg/ 0.5 mg/理组显著高于对照组（ 综合考虑生长性能和肝脏丙酮酸羧化酶活性等指标，在玉米 .3 mg/ 试验二： 研究了玉米 组织脂肪酸沉积的影响。将 180 只 1 日龄 仔鸡随机分成 6 个处理，每个处理 30 只鸡（公母各半）；在玉米.1 mg/0.2 mg/0.3 mg/0.4 mg/ 0.5 mg/ 5 个水平的生物素，包括对照组总计 6 种日粮处理。试验结果表明：（ 1）添加 生物素对血清生理生化指标影响不显著（ P其中丙氨酸氨基转移酶和天门冬氨酸氨基转移酶活性呈下降趋势（ P 总蛋白和球蛋白水平呈上升趋势 （ P 钙、磷、葡萄糖含量和碱性磷酸酶活性呈下降 趋势 （ P； 胆固醇、磷脂、甘油三酯、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白呈上升趋势（ P胰高血糖素呈下降趋势（ P而甲状腺素 三碘甲状原氨酸 岛素和生长激素呈上升趋势（ P（ 2）生物素添加促进了肉仔鸡组织脂肪酸的沉积， 显著提高了肝脏组织中总脂肪酸（ 饱和脂肪酸含量（ 、 和 等脂肪酸 的含量（ ； 显著提高了 、 和 脂肪酸的含量和 18:2 比值（ 而厌氧菌总数呈下降趋势（ P（ 2）显著降低盲肠中大肠杆菌数量（ 乳酸杆菌数量没有变化。 验四： 研究了不同生物素供应状况（缺乏、充分和超量）对肉仔鸡生长性能及其血清生理生化指标的影响。将 576 只 1 日龄 仔鸡随机分成 4 个处理，每个处理 9 个重复，每个重复16 只鸡（公 母各半）；在小麦 鱼粉型基础日粮中分别添加 mg/mg/ 2.7 mg/ 3 个水平的生物素，包括对照组共计 4 种日粮处理。试验结果表明：（ 1）生物素缺乏将严重抑制肉仔鸡的采食和生长，生物素缺乏组肉仔鸡的平均日采食量和平均日增重极显著低于各生物素添加组（ （ 2）添加生物素提高了血清磷脂水平（ P= 0.9 mg/理组的血清磷脂和高密度脂蛋白 含量 显著高于对照组（ （ 3） 添加生物素后，血清胰岛素和生长激素水平呈上升趋势（ P而胰高血糖素呈下降趋势（ P 试验五： 系统研究了生物素对肉仔鸡免疫器官发育、机体免疫反应、 T 淋巴细胞亚群和神经内分泌激素的影响。将 400 只 1 日龄 仔鸡随机分成 4 个处理，每个处理 5 个重复，每个重复 20 只鸡（公母各半）；在小麦 鱼粉型基础日粮中分别添加 mg/mg/2.7 mg/ 3 个水平的生物素，包括对照组 共计 4 种日粮处理。试验结果表明：（ 1）生物素缺乏抑制了免疫器官的发育，降低其重量指数；添加生物素可促进免疫器官的发育，提高其重量指数。（ 2）生物素添加促进了体液免疫反应，提高了血清中球蛋白水平，但处理效应不显著（ P提高了血清中新城疫抗体滴度和 平。就 新城疫抗体滴度而言， 0.9 mg/ 2.7 mg/理组显著高于对照组和 0.3 mg/理组（ 提高了 T 淋巴细胞的转化效率（ P各生物素添加组高于对照组（ P 极显著提高了脾脏中 T 淋巴细胞的转化效率（ 就 B 淋巴细胞转化效率而言， 2.7 mg/理组显著高 于对照组（ （ 4）添加生物素影响了脾脏和血液中的 T 淋巴细胞亚群。 添加生物素极显著降低血液中表达 细胞含量（ 生物素的添加极显著降低脾脏中表达 细胞含量（ 且各生物素添加组之间也无显著差异（ P 试验六： 采用 法研究了生物素对脾脏细胞 因的 达的影响，从基因表达水平上探讨了生物素调节机体免疫功能的作用机理。将 60 只 1 日龄 肉仔鸡随机分成 3 个处理，每个处理 20 只鸡；小麦 鱼粉型基础日粮中分别添加 mg/.7 mg/ 2 个水平的生物素，包括对照组共计 3 种日粮处理。试验结果表明：添加生物素促进了脾脏细胞免疫因子 基因表达，极显著提高了 因的表达产 表达量 ( 试验七： 采用分子生物学方法研究了生物素对脾脏细胞增殖细胞核抗原（ 因的达的影响 ，从基因表达水平上来探讨生物素促进脾脏细胞增殖的作用机理。试验结果表明：生物素对脾脏细胞的增殖具有促进作用，添加生物素极显著提高了脾脏细胞 因的表达产物 表达量 ( 总之，在玉米 提高了肝脏丙酮酸羧化酶的活性；促进了肝脏和肌肉组织中脂肪酸的沉积，改变了肠道中的微生物菌 群数量，促进了乳酸杆菌和双歧杆菌等有益菌的增殖。当生物素缺乏时，严重抑制肉仔鸡的生长和采食；添加生物素促进了肉仔鸡免疫器官的发育，改善了体液免疫反应和细胞免疫反应，改变了脾脏和血液中 T 淋巴细胞亚群，降低了脾脏和血液中表达 细胞含量，促进了脾脏细胞 因的 达。生物素调节机体免疫功能的机理是：通过提高脾脏细胞 因的 达水平，促进细胞因子 翻译与合成，提高体内 水平和促进脾脏细胞 制与脾脏细胞的增殖分化，改善脾脏的代谢状况和促进机体免疫反应，从而实现对机体免疫功能的调节。 关键词： 肉仔鸡，生物素，脂肪酸，肠道微生物菌群，免疫功能，作用机理 to of on in by : to of in on in to of 960 AA 10 16 in .1 mg/0.2 mg/0.3 mg/0.4 mg/kg .5 mg/ of as of in P .3 mg/0.4 mg/kg .5 mg/kg of of .3 mg/kg in on : to of in on in as 180 AA 30 in .1 mg/0.2 mg/0.3 mg/0.4 mg/kg .5 mg/ of (1) of LT ST P P of LK a to P DL a to P of P 3, P (2) in In , 24:0 by of a 20:0, 20:420:418:2 a to in in P (2) of to a .4 mg/kg of (2) of P= .9 mg/kg of (3) of P P : to of on in 400 AA 5 20 in .3 mg/0.9 mg/kg .7 mg/ of as (1) of of (2) of P gG by of .9 mg/kg .7 mg/kg of .3 mg/kg of of P of .7 mg/kg of (6) in In of by of (8) 3, P s no P : to of on in to of 60 AA 20 in .3 mg/kg .7 mg/ of as of : to of on in to of as of of in In in no on P in in of of in of in It of 略词表 缩略词 英文 中文 均日增重 均日采食量 F/G 料 /增重 准差 果酸脱氢酶 门冬氨酸氨基转移酶 氨酸氨基转移酶 蛋白 蛋白 蛋白 性磷酸酶 密度脂蛋白 ow 低密度脂蛋白 油三酯 脂 固醇 脂肪酸 和脂肪酸 不饱和脂肪酸 不饱和脂肪酸 射免疫分析法 碘甲状腺原氨酸 状腺素 2 前列腺素 物血凝素 豆素 A 多糖 分钟闪烁数 激指数 35 略词 英文 中文 甲基噻唑二苯基四唑溴盐 二胺四乙酸 谢能 蛋白 利用磷 氨酸 氨酸 肪肝肾综合症 死综合症 面免疫球蛋白 免疫球蛋白 G 硫氰酸荧光素 脂酰乙醇胺 of 分化抗原 助性 T 细胞 胞毒性 T 细胞 制性 T 细胞 合酶链式反应 转录 增殖细胞核抗原 介素 扰素 氧核糖核酸 使 碳酸二乙酯 补 X 目 录 中文摘要 英文摘要 略缩词 第一部分 文献综述 1 1 研究历史概述 1 2 化学结构、物理化学特性和颉颃因子 1 3 分析方法 2 4 消化吸收和代谢 4 5 生理功能 7 6 生物素来源 10 7 缺乏症 11 8 需要量及其影响因素 12 9 应用效果研究 13 10 对免疫机能的影响及机理研究 14 11 有待进一步研究的问题 16 第二部分 主要研究内容、技术路线和方法 17 第三部分 试验研究 19 试验一 肉仔鸡玉米 19 1 试验材料与方法 20 2 试验结果与讨论 22 3 试验小结 27 试验二 生物素对 肉仔鸡血清生理生化指标和组织脂肪酸沉积的影响 28 1 试验材料与方法 29 2 试验结果与讨论 30 3 试验小结 50 试验三 生物素对肉仔鸡肠道微生物菌群的影响 51 1 试验材料与方法 52 2 试验结果与讨论 53 3 试验小结 56 试验四 半纯合日粮中添加生物素对肉仔鸡生长性能及 血清生理生化指标的影响 57 试验材料与方法 58 2 试验结果与讨论 59 3 试验小结 69 试验五 生物素对肉仔鸡免疫器官的发育和免疫功能的影响 70 1 试验材料与方法 71 2 试验结果与讨论 72 3 试验小结 88 试验六 生物素促进免疫因子 89 1 试验材料与方法 90 2 试验结果与讨论 92 3 试验小结 95 试验七 生物素促进脾脏细胞增殖的作用机理 96 1 试验材料与方法 97 2 试验结果与讨论 98 3 试验小结 100 第四部分 论文总结 101 1 基本结论 101 2 创新之处 102 3 有待进一步研究的问题 102 附录：主要指标测定方法 103 附录 1：脾脏 因的 达量