河豚毒素ppt课件.ppt

河豚毒素的中毒、检测及评价,小组成员：21徐永忠24李伏寿25李天明26郑西洲29温兆俞指导老师：梁建功,1,Content,1、河豚及河豚毒素的概述2、TTX的毒理作用3、TTX中毒症状4、TTX中毒的检测5、评价,2,河豚俗称“气泡鱼”、“吹肚鱼”、“河鲀鱼”为暖温带及热带近海底层鱼类，少数种类进入淡水江河中，当遇到外敌，腹腔气囊则迅速膨胀，体内有剧毒。,3,体内毒素浓度由高到低依次为：卵巢、肝脏、脾脏、血筋、鳃、皮、精巢而体内其他部位并无毒素，因此只要处理得当，去掉含有毒素的部位便可以放心食用。所以也有“拼死吃河豚”一话，可见这种毒物的美味是多么的诱人。,4,河豚毒素(tetrodotoxin),河豚毒素,简称TTX，是一种存在于河豚、蝾螈、斑足蟾等动物中的海洋毒素。最早于1909年在日本由田原良纯从河豚鱼中提取并定名1972年由Kishi等人工合成。TTX为氨基全氢化喹唑啉化合物，分子式为C11H17N3O8，结构如图，分子量为319.27。,白色结晶，无味微溶于水，不溶于有机溶剂；对酸作用稳定；没有确定熔点，220以上炭化。,5,TTX是世界上最致命的毒药之一。1gTTX的毒性是1g氰化物的1万倍，是砒霜1250倍。TTX中毒后麻痹症状出现在食后20min3h，致死时间最短为1.5h，最长约为8h。TTX是目前已知自然生态条件下毒力最强的生物性毒素之一，0.5mg足以使一个体重70kg的人致命，对人的致死量为67g/kg。据报道日本每年食用河豚中毒死亡人数占同期食物中毒死亡人数的70%以上。,6,TTX的毒理作用,TTX是选择性极高的快速Na+通道阻断剂，因而可以阻止神经、肌肉产生兴奋活动，导致神经麻痹。其机理是：TTX通过分子内胍基与神经细胞膜钠离子通道上的羧基(COO-)相互吸引，阻止钠离子正常进入细胞，阻断神经传导；但TTX具有高度选择性，K+通道完全不受影响，因而导致细胞内的K+、Na+数量失去平衡，从而严重影响细胞的正常功能。,7,兴奋传递的过程,8,神经传导：静息电位动作电位,（外正内负）,刺激,细胞膜内高钾低钠，钾离子可随浓度差自由出入而钠离子不能，故静息电位时外正内负。当受到刺激时Na+内流形成动作电位，K+外流使膜内电位迅速下降，直到恢复静息时的电位水平。,中毒机理,9,TTX中毒症状,胃肠症状：恶心、呕吐、腹痛或腹泻等。神经麻痹症状：开始有口唇、舌尖、指端麻木；继而全身麻木、眼睑下垂、四肢无力行走不稳、共济失调，肌肉软瘫和腱反射消失。呼吸、循环衰竭症状：呼吸困难、急促表浅而不规则紫绀，血压下降，瞳孔先缩小后散大或两侧不对称，言语障碍，昏迷，最后死于呼吸、循环衰竭。,10,TTX中毒的检测,1、TTX的提取样品中TTX的提取目前大致可以分为3种：（1）液液提取法（2）直接沉淀蛋白法（3）固相萃取法,11,2、TTX的检测,河豚毒素的检测方法种类繁多,有生物测定法、理化检测方法、免疫化学测定方法等几大类。其中小鼠生物法是现行的标准检测法，该方法虽然灵敏度能满足要求,但不能对毒素定性,且小鼠个体差异较大,检测结果误差大采用柱后衍生液相色谱检测法检测水产品中河豚毒素就能很好的解决毒素的定性和定量问题。,12,样品提取后经过C18固相萃取小柱净化,用C18柱分离,过柱清液经0.45Lm滤膜过滤,进行液相色谱实验,液相色谱法,13,总结、评价,TTX虽然是世界上最致命的毒药之一，但是也可以用于镇痛。对癌症疼痛、外科手术后的疼痛、内科胃溃疡引起的疼痛，TTX制剂均有良好的止痛作用。使用河豚素的好处是用量极少（只需3微克），止痛时间长，又没有成瘾性。特别是穴位注射，作用快、效果明显，可以作为成瘾性镇痛药吗啡和杜冷丁的良好替代品。,14,同时，随着TTX分离和分析方法的进步及对其化学结构、生物功能和与其他分子相互作用的进一步研究，人们对TTX的结构、理化性质与生物活性的关系和它的作用机制的了解将更加深入。它也将会更加有力的运用于法医学鉴定，以及司法检测等方面，为司法鉴定实践工作提供更多更有效的技术支持和鉴定依据。总之，TTX不再只是令人望而生畏的毒素，研究成果为法医鉴定、临床诊治以及食品安全监测提供了有效地检测手段和科学依据。,15,牛刀小试,一、选择题1、TTX在河豚体内含量最高的部位（）A、精巢B、卵巢C、肝脏D、血筋2、TTX的中毒机理（）A、Na+通道阻断剂B、K+通道阻断剂C、EST阻断剂D、神经抑制剂,B,A,16,二、填空题1、TTX通过分子内()与神经细胞膜钠离子通道上的（）相互吸引，阻止()正常进入细胞，阻断神经传导。2、样品中TTX的提取目前大致可以分为3种：分别为,答案：胍基羧基钠离子,液液提取法、直接沉淀蛋白法、固相萃取法。,17,三、简答题1、简述TTX中毒机理。,答：TTX通过分子内胍基与神经细胞膜钠离子通道上的羧基(COO-)相互吸引，阻止钠离子正常进入细胞，阻断神经传