褐藻糖胶ppt课件.ppt

第六节褐藻糖胶（Fucoidan）,褐藻糖胶(FuCoidan)也称岩藻多糖、岩藻多糖、岩藻聚糖硫酸酯，是水溶性多糖，它存在于褐藻细胞间组织中我们所看到的海带、掌状海带、泡叶藻和巨藻等表面渗透出的粘液中，其主要成分是岩藻多糖。,1,主要组分,L-岩藻糖-4-硫酸酯，少量的半乳糖、甘露糖、术糖、糖醛酸、阿拉伯糖及蛋白质等,2,一、褐藻糖胶的结构,由a-(13)连接的L-岩藻糖组成，部分岩藻糖残基的C4位被硫酸根取代。在分子链内，每23个岩藻糖残基就有一个由岩藻形成的支链点。,3,4,5,二、褐藻糖胶物性,（1）褐藻糖胶是一种乳白色粉末。（2）溶于水，不溶于乙醇、丙酮、氯仿等有机溶,6,三、褐藻糖胶的生理活性,7,免疫调节作用,褐藻糖胶在体外可以诱导白细胞介素和丙型干扰素(IFN一7)产生；体内给药可增强T细胞、B细胞、巨噬细胞(Mqo)和自然杀伤细胞(NK)的功能，促进绵羊红细胞(SRBC)的初次抗体应答。此外，海藻多糖是小鼠B淋巴细胞有丝分裂原，对大鼠脾脏淋巴细胞和人外周血液单个核细胞也有激活作用。从而证明了海藻多糖具有增强机体免疫功能的作用。作为免疫增强剂，有预防放疗所致造血组织损伤，刺激造血恢复及增强癌症患者的免疫功能,8,抗凝血作用,具有抗凝血的作用，它能够显著延长激活部分凝血活酶时问，说明其具有明显的抗凝血作用。褐藻糖胶具有明显的抗凝血和促纤溶的药理学活性，其活性作用随褐藻糖胶浓度的增加而增强，但由于多糖的相对分子质量大而不易被吸收，所以抗凝效果不及肝素，只适用于血粘度较高的病人，仅可作为预防血栓形成的药物或保健品。研究发现，多糖的抗凝血效果还跟摄取方式有关，静脉注射的效果明显高于腹腔注射。,9,降血糖作用,褐藻糖胶具有显著降血糖作用，可在24h内维持降糖效用口。当胰岛细胞受损伤时褐藻糖胶可能对其有保护作用。给经四氧嘧啶诱导生成糖尿病的小鼠注射一定量的褐藻糖胶后，能缓解其糖尿病症状，减少饮水量，糖耐量明显改善。,10,对重金属及其他毒素的阻吸作用,大量研究表明褐藻糖胶是一种优质的膳食纤维。在人体内具有较重要的生理功能，如促进胃肠蠕动。吸附有毒物质并加速排出，尤其是吸附多种有毒重金属如Pb、Sn、Cd等，减轻这些物质对人体的毒害。从而在胃肠道内担任着“清道夫”的角色。,11,抑制肿瘤细胞生长,抑制肿瘤细胞生长的作用，可以有效的抑制小鼠Sl80和Heps肿瘤细胞的生长。,12,四、褐藻糖胶的分离技术1、酸提取法,海带,粉碎,提取2次,0.1moHCI,滤液,加NaOH,离心,滤液加乙醇,沉淀,乙醇洗脱,减压干燥,粗品,13,2、水提取法,海带藻粉热水浸提离心取上清液，滤渣在同样条件再提取1次合并2次滤液调节滤液pH至中性减压浓缩乙醇沉淀无水乙醚、丙酮洗涤2次真空干燥褐藻糖胶粗品在提取过程中,14,3、乙醇沉淀法,15,4、十六烷氯化吡啶(CPC)沉淀法,16,5、溶剂萃取法,17,6、氯化钙法,将褐藻酸转化为褐藻酸钙，避免了褐藻酸的溶出。藻粉用2.5L,80乙醇抽提，过滤，滤渣浸在4.5L35甲醛中过夜后倒出甲醛，风干，加入2CaCl2，水溶液，室温提取4h，离心，沉淀再于70提取2h，合并两次上清液，减压浓缩，透析，冷冻干燥，得褐藻糖胶粗品,18,五、褐藻糖胶的纯化技术,经上述方法提取得到的褐藻糖胶粗品通常还含有部分水溶性褐藻酸、海带淀粉、蛋白质、色素等杂质,需要进一步纯化，纯化方法主要有以下几种。,19,1、乙醇分步沉淀法,利用褐藻酸在低浓度乙醇(20%30%)中发生沉淀,而褐藻淀粉可溶于较高浓度乙醇(60%)的性质,将褐藻糖胶粗品用乙醇进行分步沉淀,从而除去杂质。乙醇分级沉淀法：粗多糖配成5水溶液加乙醇至20离心上清液加乙醇至75抽滤沉淀用乙醇和丙酮浸洗40干燥褐藻糖胶。,20,先用20%乙醇沉淀出褐藻酸,再加乙醇至60%乙醇浓度，使褐藻糖胶沉淀出来。然后对60%乙醇沉淀物进行乙醇重沉淀。先加乙醇至30%乙醇浓度,没有沉淀生成。加乙醇至70%乙醇浓度,褐藻糖胶呈半胶体,加入1ml的10%NaCl溶液后,迅速絮凝。离心,沉淀用乙醇和乙醚浸洗,干燥得砂状颜色的褐藻糖胶粉末。,乙醇重沉淀,21,利用季胺盐如十六烷基氯化吡啶(CPC)或十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)能与褐藻糖胶形成沉淀的性质,使褐藻糖胶沉淀出来,而这一沉淀又可溶于高浓度的CaCl2或NaCl溶液。,2、季胺盐沉淀法,22,粗多糖配成2水溶液离心去除不溶物上清液中加5CTAB离心收集沉淀将沉淀溶于3molLCaCl2中加乙醇至60离心沉淀用乙醇和丙酮浸洗40干燥褐藻糖胶,23,将热水提取物配成1%水溶液用3%CPC沉淀3000r/min离心沉淀溶于4mol/LCaCl2,在37静置20h加3倍乙醇10000r/min离心沉淀溶于水透析冷冻干燥。,24,3、透析法和酶消化法,用透析法除去溶液中的离子和小分子物质，用酶消化法除去混杂在提取液中的蛋白质。,研究中发现