实验五—糖果中还原糖的测定PPT课件

.,1,项目四食品中糖类物质的测定,河源职业技术学院李叶青,.,2,教学目标,【知识目标】掌握还原糖、总糖的概念掌握还原糖、总糖测定的原理与方法【技能目标】熟练掌握食品中还原糖、总糖含量测定的操作能根据不同食品中的含糖量制取合适浓度的样液及选择合适的测定方法。掌握无糖型食品中总糖含量测定的操作,.,3,教学内容,【检验标准】一、食品中还原糖含量的测定GB/T5009.7-2008-直接滴定法、高锰酸钾滴定法二、食品中蔗糖的测定GB/T5009.8-2008-酸水解前后测定还原糖含量之差三、食品中总糖的测定：酸水解后还原糖总量,.,4,实验六黄酒中总糖含量的测定,【检验依据】,GB/T13662-2008黄酒总糖（以葡萄糖计）（g/L）：干黄酒：15.0半干黄酒：15.140.0半甜黄酒：40.1100甜黄酒：100,.,5,实验六黄酒中总糖含量的测定,【检验依据】,GB/T13662-2008黄酒总糖检验方法：甜黄酒和半甜黄酒：廉爱农法干黄酒和半干黄酒：亚铁氰化钾滴定法,.,6,实验内容,（1）实验目的掌握用廉爱农法测定黄酒中总糖的原理及方法。了解糖含量低（干型）的黄酒中总糖含量的测定方法。（2）实验原理通常是以还原糖的测定方法为基础的。样品经处理除去蛋白质等杂质后，加入盐酸，在加热条件下使蔗糖水解为还原性单糖，以滴定法测定水解后样品中的还原糖总量，即总糖。,黄酒中总糖含量的测定廉爱农法,.,7,实验内容,廉爱农法滴定实验原理费林溶液与还原糖共沸，生成氧化亚铜沉淀。以次甲基蓝为指示液，用试样水解液滴定沸腾状态的费林溶液。达到终点时，稍微过量的还原糖将次甲基蓝还原成无色为终点，依据试样水解液的消耗体积，计算总糖含量。,黄酒中总糖含量的测定廉爱农法,.,8,实验内容,（3）试剂费林甲液：称取硫酸铜(CuSO45H20)69.28g，加水溶解并定容至1000mL。费林乙液：称取酒石酸钾钠346g及氢氧化钠100g，加水溶解并定容至1000mL，摇匀，过滤，备用。葡萄糖标准溶液（2.5g/L）：称取经103105烘干至恒重的无水葡萄糖2.5g(精确至0.0001g)，加水溶解，并加浓盐酸5mL，再用水定容至1000mL。(6mol/L)盐酸溶液：量取浓盐酸50mL，加水稀释至100mL.1g/L甲基红指示液：称取0.1g甲基红，用70乙醇溶解并定容到100mL。200g/L氢氧化钠溶液：称取氢氧化钠20g，用水溶解并稀释至100mL。,黄酒中总糖含量的测定廉爱农法,.,9,实验内容,（3）实验用具分析天平（感量0.0001g，0.01g）电炉滴定管、铁架台、移液管锥形瓶、玻璃珠、棉手套,黄酒中总糖含量的测定廉爱农法,.,10,实验内容,（4）实验步骤,制备样品、称样,样液提取、澄清,标定酒石酸铜溶液,锥形瓶中加入酒石酸铜甲、乙液各5mL；酸式滴定管中装入处理好的含糖样液,记录消耗样液的总体积，计算结果,制备样品、取样,样液提取、澄清,标定酒石酸铜溶液,锥形瓶中加入酒石酸铜甲、乙液各5mL；酸式滴定管中装入处理好的含糖样液,记录消耗样液的总体积，计算结果,取部分提取液加入1:1盐酸68水解15min，调pH至中性,制备样品、称样,制备样品、取样,样液提取、澄清,取部分提取液加入1:1盐酸68水解15min，调pH至中性,锥形瓶中加入酒石酸铜甲、乙液各5mL；酸式滴定管中装入处理好的含糖样液,制备样品、称样,制备样品、取样,样液提取、澄清,取部分提取液加入1:1盐酸68水解15min，调pH至中性,黄酒中总糖含量的测定廉爱农法,.,11,实验内容,（5）测定方法a.样品酸水解吸取黄酒样品2-5mL（控制水解液总糖含量为1g/L2g/L），放入250mL容量瓶中。加水50mL，加入5mL(1:1)盐酸溶液，置6870水浴中加热15min，取出迅速冷却至室温，加2滴甲基红指示剂，用200g/LNaOH溶液中和至红色消失（近中性），加水至刻度。定容，混匀备用。,黄酒中总糖含量的测定廉爱农法,.,12,(5)测定方法b.费林溶液的标定预滴定准确吸取费林甲、乙液各5mL于250mL锥形瓶中，加水30mL,玻璃珠4粒，混合后置于电炉上加热至沸腾。滴入葡萄糖标准溶液，保持沸腾，待试液蓝色即将消失时，加入次甲基蓝指示液两滴，继续用葡萄糖标准溶液滴定至蓝色消失为终点。记录消耗葡萄糖标准溶液的体积(V)。,实验内容,黄酒中总糖含量的测定廉爱农法,.,13,(5)测定方法c.费林溶液的标定准确吸取费林甲液和乙液各5mL，置于250mL锥形瓶中，加水30mL，加玻璃珠4粒，混匀。从滴定管滴加入比预滴定少1mL的葡萄糖标准溶液，至电炉上加热沸腾，加入次甲基蓝指示液2滴，保持沸腾2min，以每2秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好褪去为终点。记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积。全部滴定操作应在3min内完成。平行滴定3次，取其平均值，按下式计算甲、乙液各5mL相当于葡萄糖的质量。m1=CVS式中：m1费林甲、乙液各5mL相当于葡萄糖的质量,gC葡萄糖标准溶液的浓度，g/mLVS标定时消耗葡萄糖标准溶液的总体积，mL,实验内容,黄酒中总糖含量的测定廉爱农法,.,14,实验内容,(5)测定方法d.样品溶液预滴定吸取费林甲液及乙液各5.00mL于250mL锥形瓶中，加30mL水，加玻璃珠3粒，加热使其沸腾，从滴定管中滴加处理好的黄酒样品溶液，保持沸腾，待试液蓝色即将消失时，加入次甲基蓝指示液两滴，继续用样品溶液滴定至蓝色消失为终点。记录消耗样品溶液的体积(V1)。,黄酒中总糖含量的测定廉爱农法,.,15,(5)测定方法e.样品溶液测定吸取费林甲液及乙液各5.00mL置于250mL锥形瓶中，加30mL水，加玻璃珠3粒，从滴定管中加入比预测时体积少1mL的样品溶液，加热使其沸腾，加入次甲基蓝指示液2滴，保持沸腾2min后，以每2秒1滴的速度继续滴加样品溶液，直至蓝色刚好褪去为终点。记录消耗样品溶液的总体积。平行测定2次。,实验内容,黄酒中总糖含量的测定廉爱农法,.,16,实验内容,黄酒中总糖含量的测定廉爱农法,（6）结果计算，单位g/L式中：V3取样体积，mLm1费林甲、乙液各5mL相当于葡萄糖的质量，gV2-测定时消耗样品稀释液的体积，mLV-样品溶液的定容体积，mL,.,17,实验内容,黄酒中总糖含量的测定廉爱农法,（7）结果分析有效数字保留：所得结果保留一位小数。精密度要求：在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的5%.,.,18,（8）说明与讨论总糖测定结果一般以转化糖计，但也可以以葡萄糖计，要根据产品的质量指标要求而定。如用转化糖表示，应该用标准转化糖溶液标定费林溶液，如用葡萄糖表示，则应该用标准葡萄糖溶液标定。在营养学上，总糖是指能被人体消化、吸收利用的糖类物质的总和，包括淀粉。这里所讲的总糖不包括淀粉，因为在测定条件下，淀粉的水解作用很微弱。,实验内容,黄酒中总糖含量的测定廉爱农法,.,19,实验内容,（9）操作注意事项影响测定结果的主要操作因素有反应液碱度、热源强度(电炉功率)、锥形瓶规格、煮沸时间、滴定速度等。1.滴定必须在沸腾条件下进行，其原因一是可以加快还原糖与Cu2+的反应速度；二是次甲基蓝变色反应是可逆的，还原型次甲基蓝遇空气中氧时又会被氧化为氧化型。此外，氧化亚铜也极不稳定，易被空气中氧所氧化。保持反应液沸腾可防止空气进入，避免次甲基蓝和氧化亚铜被氧化而增加耗糖量。,黄酒中总糖含量的测定廉爱农法,.,20,实验内容,（9）操作注意事项2.滴定时不能随意摇动锥形瓶，更不能把锥形瓶从热源上取下来滴定，以防止空气进入反应溶液中。3.滴定时溶液碱度愈高，二价铜的还原越快，因此要严格控制反应液体积，标定和测定时消耗体积应相近，使反应体系碱度一致。4.标定和滴定时热源强度也必须一致，电炉功率要一致，温度恒定后才能加热，且必须控制反应液加热至沸腾时间保持一致，否则加热至沸腾的时间不同，引发蒸发量不同，反应液碱度发生变化，从而引入误差。,黄酒中总糖含量的测定廉爱农法,.,21,实验内容,（9）操作注意事项5.沸腾时间和滴定速度对结果影响也较大。沸腾时间短，消耗糖液多，故一般沸腾2min后进行滴定。6.测定时先将反应样液绝大部分加入到费林溶液中，与其共沸，仅留1mL左右由滴定方式加入，其目的是使绝大多数样液与碱性酒石酸铜在完全相同的条件下反应，减少因滴定操作带来的误差。7.费林甲液和乙液应分别贮存，用时才混合，否则酒石酸钾钠铜络合物长期在碱性条件下会慢慢分解析出氧化亚铜沉淀，使试剂有效浓度降低。,黄酒中总糖含量的测定廉爱农法,.,22,（9）操作注意事项8、样品溶液预测的目的一是本法对样品溶液中还原糖浓度有一定要求（1g/L2g/L），测定时样品溶液的消耗体