电化学发光检测技术原理ppt课件

.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005,ElecsysPrinciple,电化学发光检测原理及要点解读,.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005,标记免疫技术的发展电化学发光检测原理电化学发光的技术特点校准概念及溯源性校准报警分析常见数据报警分析试剂特性解读检测菜单介绍,主要内容,.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005,放免,酶免荧光免疫化学发光,电化学发光,1960S,197080S,2000S,1，抗体技术的革命，从使用多克隆抗体向使用单克隆抗体转变2，从手工操作向全自动分析仪的转变3，从液相放射免疫技术向均相和固相免疫分析技术的转变,标记免疫技术的发展,.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005,缺点半衰期短，试剂货架期短标记物不稳定每次需做标准曲线反应时间长，不易自动化检测使用放射性核素，需要一定防护,优点分子量小,免疫损耗小简便、灵敏、特异可自行设计试剂盒应用范围广,标记物:碘125,标记免疫技术的发展放射免疫测定法(RIA),底物:无需底物,.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005,优势灵敏度较高试剂稳定较快的速度无污染,缺点包被表面积小（灵敏度和速度）包被均一性不足（精密度）检测技术多为颜色反应（特异性和灵敏度）反应时间不一致,造成结果的偏差(特别在手工操作时),标记免疫技术的发展酶联免疫测定法(ELISA),标记物:HRP辣根过氧化物酶/ALP碱性磷酸酶,底物:TMB四甲基联苯胺/对硝基苯磷酸酯P-NPP,.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005,优势灵敏度较高成本较低荧光检测信号操作简便,缺点传统的微板吸附包被技术均一性差、重复性差批量检测不能实现全自动每次检测需要做定标曲线，浪费成本,样本的前处理技术操作过程完全同ELISA方法,标记免疫技术的发展时间分辨荧光免疫(TRFIA),标记物：铕(Eu3+)、钐(Sm3+)等镧系元素底物:镧系元素螯合物,.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005,标记物：ALP碱性磷酸酶底物：MUP（4甲基伞形酮酰磷酸）激发物：光最终检测信号：荧光强度代表产品：美国AbbottAXSYM法国bioMrieuxVIDAS,标记免疫技术的发展酶荧光免疫测定法(MEIA),.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005,标记物：HRP辣根过氧化物酶/ALP碱性磷酸酶发光底物：鲁米洛、金刚烷激发物：特定的化学环境最终检测信号：可见光强度代表产品：美国J磷酸缓冲液300mmol/l,PH6.8贮存和稳定性*未开启1525保存，稳定至保质期末。e411：打开瓶盖，放置在仪器上可稳定保存3天e601/e602：打开瓶盖，在仪器上可稳定保存5天e411：用后关闭瓶盖，放置在仪器上可稳定保存28天。,电化学发光通用试剂的特性ProCell反应液,.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005,CleanCell具有下列功能：每次测量后清洗管道系统和测量室。维护电极成分：KOH176mmol/l，PH13.2贮存和稳定性未开启1525保存，稳定至保质期末。e411：打开瓶盖，放置在仪器上可稳定保存3天e601/e602：打开瓶盖，在仪器上可稳定保存5天e411：用后关闭瓶盖，在仪器上可稳定保存28天。,电化学发光通用试剂的特性CleanCell清洗液,.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005,DiluentUniversal通用稀释液成分：蛋白质基质；防腐剂：0.1,CA15-3仪器自动1：10稀释,所有IgM项目仪器自动1：400稀释原因：1.在急性感染时，这种IgM抗体的滴度很高，血清标本高倍稀释后应为阳性，否则对疾病急性期的诊断无价值，因在疾病恢复期或慢性的病人，IgM类抗体也可滴度存在。2.由于人血清中有可能存在非特异性的IgM类抗体，如类风湿病人及近期感染其它病原体或接触外来抗原的抗体。稀释可减少此类抗体的干扰。,电化学发光需强制预稀释的项目,.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005,M:白瓶R1：灰盖黑瓶R2:黑盖黑瓶,电化学发光试剂盒的组分M,R1,R2,M:链霉亲和素包被的磁微粒,夹心法：R1：生物素结合的一抗R2：钌标记的二抗,竞争法：R1：钌标记的抗原或抗体R2：生物素结合的待测物衍生物,T-uptake改良竞争法R1：生物素化的T4-聚半抗原R2：钌标记的羊抗T4抗体,IgM检测：R1：抗人Fdy抗体（封闭特异的IgG）R2：生物素化的抗人IgM抗体+钌标记的相应抗原,.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005,ProbeWashM用来完成下列任务：分析过程中清洁试剂针试剂针的每天清洗保养成分：KOH176mmol/l;去垢剂1%,PH13.2贮存与稳定性保存在1525未开启：稳定至保质期末放置在仪器上，长期开盖：3天放置在仪器上，不用时关闭瓶盖：4周自行设置ProbeWash的条件，一般检测抗原后马上检测相应抗体,需添加此清洗步骤,电化学发光通用试剂的特性ProbeWash探针清洗液,cobase411不适用,.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005,PreCleanM用于分析过程的最后一步信号产生之前，去除潜在的干扰物质。成分：磷酸缓冲液10mmol/l;氯化钠20mmol/l;去垢剂0.1%;防腐;PH7.0贮存和稳定性保存在1525稳定性：未开启：保存至保质期末上机后：4周,电化学发光通用试剂的特性PreClean预清洗液,cobase411不适用,.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005,PreClean需要Prewash的项目,FT3IIIFT4IITgIICalcitoninATSHRDigoxinproBNPIIstatproBNPIIhsTNTstathsTNT,ACTHAMHDHEASE2IIIFSHHCG+TestoPLGFsFLTHE4proGRP,电化学发光通用试剂的特性-PreClean预清洗液,cobase411不适用,freePSAtotalPSAVB12FolateIIIFolateRBChGHN-MIDPTH1-84PTHTotalVitDCSA,TCLAntiHBcAntiHBcIgMAntiHCVHIVCombiPTSyphilisHSV1-IgGHSV2-IgG,.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005,电化学发光检测测试项目总览,.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005,电化学发光检测测试项目总览,.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005,标记免疫技术的发展电化学发光检测原理电化学发光的技术特点校准概念及溯源性校准报警分析常见数据报警分析试剂特性解读检测菜单介绍,主要内容,.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005,电化学发光免疫平台检测菜单（约90项）,*更多项目在不断研发中,*红色为罗氏特色项目,.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005,甲状腺项目,TSH促甲状腺激素（查明甲状腺功能的初筛试验）T3三碘甲状腺原氨酸（作用于靶器官的主要甲状腺激素）T4甲状腺素（诊断甲亢、甲低）FT3游离三碘甲状腺原氨酸FT4游离甲状腺素TGII超敏甲状腺球蛋白（甲状腺体完整性的特殊标志物）T-uptake甲状腺素结合力（了解甲状腺素的结合位点数）Anti-TG抗甲状腺球蛋白抗体（增高见于慢性桥本甲状腺炎等）Anti-TPO抗甲状腺过氧化物酶抗体Anti-TSHR甲状腺受体抗体,.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005,肿瘤标志物,AFP甲胎蛋白（原发性肝癌最特异的肿瘤标志物）CEA癌胚抗原（增高多见于结肠癌患者）CA125糖类抗原125（最可靠的卵巢癌诊断指标）HE4人附睾蛋白4(卵巢癌检测的新诊断指标)CA15-3糖类抗原15-3（主要用于乳腺癌的监测和筛选）CA19-9糖类抗原19-9（胰腺癌敏感性最高的标志物）CA72-4糖类抗原72-4（胃肠道和卵巢癌的肿瘤标志物）,Cyfra21-1非小细胞肺癌抗原NSE神经元特异性烯醇化酶（小细胞肺癌检出的阳性率高）ProGRP胃泌素释放肽前体(小细胞肺癌特异性极高的检测指标)PSA前列腺特异性抗原（前列腺癌的筛选与早期诊断）FreePSA游离前列腺特异性抗原S100S100蛋白质(辅助诊断恶性黑色素瘤患者能脑损伤患者)Calcitonin降钙素(甲状腺髓样癌的特异指标),.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005,性激素类,Progesterone孕酮Prolactin泌乳素Testosterone睾酮Estradiol雌二醇（生物活性最强的雌激素）FSH促卵泡生成激素(协同调节和刺激性腺的发育和功能)LH促黄体生成激素(协同调节和刺激性腺的发育和功能)DHEA-S硫酸脱氢雄甾酮（辅助诊断多毛症和女子男性化）SHBG性激素结合球蛋白HCG人绒毛膜促性腺激素+亚单位HCGSTAT总HCGfreeHCG游离绒毛膜促性腺激素亚单位,AMH抗缪勒管激素(评估女性卵巢储备能力),.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005,激素类,Cortisol皮质醇(最主要的糖皮质类固醇）ACTH促肾上腺皮质激素INSULIN胰岛素C-PEPTIDEC肽hGH人生长激素,贫血诊断,Ferritin铁蛋白B12维生素B12（辅助诊断巨幼细胞性贫血）Folate叶酸（辅助诊断巨幼细胞性贫血）RBCFolate红细胞内叶酸（真实反映组织中叶酸的含量）,.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005,PAPP-A妊娠相关血浆蛋白AfreeHCG游离绒毛膜促性腺激素亚单位HCG人绒毛膜促性腺激素+亚单位AFP甲胎蛋白,PLGF血清胎盘生长因子sFLT1可溶性血管内皮生长因子受体1,唐氏筛查,先兆子痫,.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005,心脏功能,CK-MB肌酸肌酶同功酶（诊断心肌缺血性损伤的重要指标）Myoglobin肌红蛋白（诊断急性心肌梗死的的重要指标）hsTroponinT超敏肌钙蛋白T（心肌损伤特异的标志）NTpro-BNP脑利钠肽前体N端肽（反映心衰的标志物）Digoxin地高辛Digitoxin洋地黄,PCT降钙素原(鉴别细菌感染的高特异性指标)IL-6白介素6(能更早的反映患者的急性炎症反应),脓毒血症,.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005,骨标志物,-CrossLaps-胶原降解产物N-OsteocalcinN端骨钙素tP1NP总I型胶原氨基端延长肽TotalVitD总25羟维生素DiPTH甲状旁腺激素1-84PTH生物全断甲状旁腺激素,.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005,乙型肝炎系列,HBsAgII乙肝表面抗原初筛（检测HBV感染的首选标志物）HBsAgQN乙肝表面抗原定量(用于HBV感染疗效监控)Anti-HBs乙肝表面抗体定量HBeAg乙肝e抗原（阳性提示大量病毒存在）Anti-HBe乙肝e抗体Anti-HBc乙肝核心抗体Anti-HBcIgM乙肝核心抗体IgMHBsAgConfirmatory乙肝表面抗原确证实验,.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005,传染病系列,Anti-HAV甲肝抗体Anti-HAVIgM甲肝抗体IgMAntiHCV丙肝抗体HIVcombiPT艾滋病抗原抗体联合试验Syphilis梅毒特异性抗体,.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005,高致畸病原体ToRCH,ToxolgG弓形体抗体ToxolgM弓形体抗体ToxoIgGAvidity弓形体亲和力RubellalgG风疹抗体RubellalgM风疹抗体CMVlgG巨细胞抗体CMVlgM巨细胞抗体CMVIgGAvidity巨细胞抗体亲和力HSV1IgG型单纯疱疹病毒HSV2IgG型单纯疱疹病毒,.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005,类风湿疾病,AntiCCP抗环瓜氨酸肽(内风湿疾病的特异性抗体),CSA环孢霉素TCL他克莫司(FK506),过敏反应,免疫抑制药物,IgE免疫球蛋白E,.cobasmodularplatformRocheDiagnostics,R.Ziergbel,Version2.0,July2005,TG,anti-TG,anti-TPO,anti-TSHR,Ferritin,B12,Folate,RBCFol,Hepcidin,hCG+,AFP,fhCG,PAPP-A,uE3,InhibinA,hCGSTAT,PlGF,sFLT1,TSH,FT4,FT3,T4,T3,T-uptake,TnT,hsTnT,TnI,Myoglobin,CK-MB,NT-proBNP,GDF